本发明属于医药技术领域，具体涉及从镰刀霉属植物内生微生物代谢产物中提取得到三种新的拉帕醌类化合物，化合物ⅰ1-methoxylfusarnaphthoquinonesa，化合物ⅱ5-dehydroxysolaninol，化合物ⅲ1-dehydroxysolaninol，以及三种化合物的制备方法。
背景技术：
目前从微生物代谢产物中分离得到50000种以上的天然产物，其中多种化合物生物活性良好，具有被开发成为新型药物的潜质。随着研究的深入，从传统陆生微生物代谢产物中获得新型先导化合物的概率逐渐降低，速度逐年减缓，故开发特境微生物资源成为当务之急。植物内生微生物由于其生境特殊，能够代谢产生结构特殊，活性良好的化合物，是目前的研究热点之一。
对长白红景天内生微生物fusariumsp.hjt-p-5的研究表明，其代谢产物含有多种拉帕醌类化合物，该类化合物对人肺癌细胞a549和人结肠癌细胞hct116有明显的抑制活性。
技术实现要素：
本发明提供了采集自长白红景天（rhodiolaangustanakai）叶片部位的内生镰刀霉属微生物（fusariumsp.hjt-p-5）的固体发酵产物中分离得到三个新型拉帕醌类化合物ⅰ~ⅲ，化合物ⅰ命名为1-methoxylfusarnaphthoquinonesa，化合物ⅱ命名为5-dehydroxysolaninol，化合物ⅲ名为1-dehydroxysolaninol，化学结构式分别为：
药理活性表明这三个化合物对人肺癌细胞a549和人结肠癌细胞hct116有明显的抑制活性。
这三种拉帕醌类化合物的制备方法是以采集自长白红景天（rhodiolaangustanakai）叶片部位的内生镰刀霉属微生物（fusariumsp.hjt-p-5）的固体发酵产物为原料，经溶剂萃取和多种色谱方法分离，得到三个新的拉帕醌类化合物；采用高分辨质谱，核磁共振等谱学技术，确定了这三个化合物的结构，其具体制备步骤如下：
（1）将采集自长白红景天（rhodiolaangustanakai）叶片部位的内生镰刀霉属微生物（fusariumsp.hjt-p-5）进行固体发酵；
固体培养基配方：大米，纯净水；
发酵条件：将菌株hjt-p-5接种于真菌4号培养基发酵液的锥形瓶中摇床震荡培养，再将震荡培养的发酵液连同菌丝体接种于装有固体培养基的锥形瓶中静置发酵培养；
（2）代谢产物的提取：使用等体积丙酮对植物内生真菌hjt-p-5固体发酵产物进行超声提取，经8层纱布过滤，将提取液与菌丝体及大米分离，提取液浓缩至干，加水混悬，依次用等体积的乙酸乙酯、正丁醇萃取3次，减压回收溶剂得到乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；
（3）乙酸乙酯层用正相硅胶柱色谱分离纯化，采用体积比为氯仿:甲醇=100:0、100:1、100:2、100:3、100:5、100:10的梯度洗脱，收集洗脱液；
（4）步骤（3）的洗脱液经高效液相色谱分离纯化，采用体积比为乙腈:水:四氢呋喃=15:80:5的溶液洗脱，浓缩后得化合物ⅰ，采用体积比为乙腈:水=31:69的溶液洗脱得化合物ⅱ、ⅲ。
本发明的有益效果为：本发明的化合物为新的拉帕醌类化合物，本发明原料为植物内生微生物发酵产物，安全易得，方法简单易操作，不引入有毒物质，成本低廉，可大规模持续开发利用。本发明的化合物及制备方法在抗肿瘤药物研究开发上具有非常重要的意义。
具体实施方式
以下结合具体实施方式对本发明做进一步说明。
实施例1
化合物ⅰ~ⅲ的制备：
（1）将采集自长白红景天（rhodiolaangustanakai）叶片部位的内生镰刀霉属微生物（fusariumsp.hjt-p-5）进行固体发酵；
固体培养基配方：大米80g，纯净水120ml；
发酵条件：将菌株hjt-p-5接种于4瓶装有200ml真菌4号培养基发酵液的500ml锥形瓶中摇床震荡培养2d（培养条件：28℃，120r/min），再将震荡培养2d后的发酵液连同菌丝体按接种量10%的比例接种于40瓶装有固体培养基的500ml锥形瓶中静置发酵培养40d，（培养条件：28℃）；
（2）代谢产物的提取：使用等体积丙酮对植物内生真菌hjt-p-5固体发酵产物进行超声提取，15min×3次，经8层纱布过滤，将提取液与菌丝体及大米分离，提取液浓缩至干，加2l水混悬，依次用等体积的乙酸乙酯、正丁醇萃取3次，减压回收溶剂得到乙酸乙酯萃取物（44.66g）和正丁醇萃取物（41.13g）；
（3）乙酸乙酯层用正相硅胶柱色谱分离纯化，采用体积比为氯仿:甲醇=100:0、100:1、100:2、100:3、100:5、100:10的梯度洗脱，收集洗脱液；
（4）步骤（3）的洗脱液经高效液相色谱分离纯化，采用体积比为乙腈:水：四氢呋喃=15:80:5的溶液洗脱，浓缩后得化合物1，采用体积比为乙腈:水=31:69的溶液洗脱得化合物ⅱ、ⅲ。
采用核磁共振（nmr）等波谱技术测定其结构，化合物ⅰ~ⅲ的波谱数据见下表1~表3。
表1化合物ⅰ氢谱(500mhz)和碳谱(125mhz)核磁数据（dmso-d6）
表2化合物ⅱ氢谱(500mhz)和碳谱(125mhz)核磁数据（dmso-d6）
表3化合物ⅲ氢谱(500mhz)和碳谱(125mhz)核磁数据（dmso-d6）