利用高浓度豆腐废水培养两株小球藻生产油脂的研究方法与流程

技术特征：

1.利用高浓度豆腐废水培养两株小球藻生产油脂的研究方法，其特征在于，包括如下步骤：

1)小球藻接种：

(1)将小球藻L166、L38分别接种于容器内；

(2)添加BG-11培养基；

(3)接种体积比为8-10.5％(V接种物/V培养基)；

(4)置于光培养箱中培养7-10天：培养条件为温度22-25℃，白色荧光照明4000-6000Lx并通入0.5-1.0L.min^-1的过滤灭菌空气条件下培养；

2)废水预处理：

(1)将豆腐废水离心、过滤并进行100-121℃高压灭菌处理；

(2)将灭菌后的豆腐废水分别稀释10倍和100倍，向12个锥形瓶中分别加入不同稀释倍数的豆腐水样200ml，每个稀释浓度设置6个样品；

(3)调节pH为7-9；

3)小球藻培养：

在6个稀释10倍的豆腐废水样品中分别接种两种小球藻L166和L38各3瓶，控制初始吸光度为0.1±0.05；

在6个稀释100倍的豆腐废水样品中分别接种两种小球藻L166和L38各3瓶，控制初始吸光度为0.1±0.05；

培养条件为：温度22-25℃，白色荧光照明4000-6000Lx；

4)小球藻油脂的测定。

2.根据权利要求1所述的利用高浓度豆腐废水培养两株小球藻生产油脂的研究方法，其特征在于，所述步骤4)小球藻油脂的测定具体步骤如下：

(1)培养20-25天后，取2.55mL不同稀释倍数豆腐废水培养下的小球藻L166和L38藻液，添加450μL二甲基亚砜及1mg/mL溶于丙酮的尼罗红溶液24μL；

(2)在恒温水浴振荡器中200rpm充分震荡混匀；

(3)在30℃暗室静置10min；

(4)选取580nm作为激发荧光检测波长进行测定，根据荧光值查找标准曲线计算油脂生产率(mg/L/d)

3.根据权利要求1所述的利用高浓度豆腐废水培养两株小球藻生产油脂的研究方法，其特征在于，所述步骤2)中豆腐废水原始水质：化学需氧量22.7±0.74g/L，总氮0.95±0.05mg/L，总磷0.12±0.007g/L。