本发明涉及一种从北冰洋鳕鱼中提取功能性二肽胶原蛋白的方法。
背景技术
胶原蛋白肽广泛用于食品、化妆品、保健品行业，以往胶原蛋白肽的制备原料主要来源于陆生动物的骨骼和皮，但是由于消费者对疯牛病、口蹄疫、禽流感等流行病的顾虑，鱼皮逐渐成为制备胶原蛋白肽的重要原料。
目前，提取鱼皮中胶原蛋白的方法大多存在胶原蛋白提取率低，或者工艺较复杂，提取时间较长、腥味较重、脂肪残存严重等问题。
技术实现要素：
本发明的一个目的在于提出一种从北冰洋鳕鱼中提取功能性二肽胶原蛋白的方法。
本发明的一种从北冰洋鳕鱼中提取功能性二肽胶原蛋白的方法，包括如下步骤：s101：将北冰洋鳕鱼的鱼皮剪碎，然后将其冷冻干燥，再用粉碎机粉碎；s102：将所述步骤s101处理后得到的鱼皮放入45倍～50倍其重量的氯化钠溶液中，然后在室温下搅拌10h～14h，再离心分离并过滤并收集鱼皮，然后再向所述鱼皮放入45倍～50倍其重量的氯化钠溶液中，再在室温下搅拌10h～14h，然后离心分离并过滤，再用清水清洗鱼皮并收集鱼皮；s103：调节所述步骤s102处理过的所述鱼皮的浓度为24mg/100ml～28mg/100ml，然后将其加热至35℃～45℃，再加入质量浓度为1％～2％的胃蛋白酶溶液并搅拌酶解2.5h～5h，然后依次离心分离、过滤并收集滤液，得到功能性二肽胶原蛋白。
本发明的从北冰洋鳕鱼中提取功能性二肽胶原蛋白的方法，能够有效保证提取率和产品质量，获得质量稳定，纯度高的产品。通过胃蛋白酶的作用，可以得到无色无味的胶原蛋白产品，改善了胶原蛋白的风味。另外还有效的保留了羟脯氨酸活性二肽的比例，保证了产品的功效。
另外，本发明的从北冰洋鳕鱼中提取功能性二肽胶原蛋白的方法，还可以具有如下附加的技术特征：
作为本发明优选的实施方式，在所述步骤s102中，所述氯化钠溶液的质量分数为5％。
作为本发明优选的实施方式，在所述步骤s103中，所述胃蛋白酶的添加量为5000u/g～7000u/g。
作为本发明优选的实施方式，在所述步骤s103中，在加热之前，调节鱼皮的ph值为2.0～4.0。
作为本发明优选的实施方式，离心分离的时间为10min～15min。
作为本发明优选的实施方式，所述步骤s103的具体步骤为：调节所述步骤s102处理过的所述鱼皮的浓度为25.49mg/100ml、ph值为3.0，然后将其加热至45℃，再加入质量浓度为1％的胃蛋白酶，搅拌酶解3h，然后依次离心分离、过滤并收集滤液，得到功能性二肽胶原蛋白。
作为本发明优选的实施方式，在所述步骤s102中，用清水清洗鱼皮2次～3次。
作为本发明优选的实施方式，在所述步骤s101中，剪碎后的所述鱼皮的直径不大于2cm；粉碎后的所述鱼皮直径不小于1mm。
本发明的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出，部分将从下面的描述中变得明显，或通过本发明的实践了解到。
具体实施方式
下面详细描述本发明的实施例，所述实施例是示例性的，旨在用于解释本发明，而不能理解为对本发明的限制。
北冰洋(arcticocean)又称北极海，是世界最小最浅以及最冷的大洋。大致以北极圈为中心，位于地球的最北端，被亚欧大陆和北美大陆环抱着，有狭窄的白令海峡与太平洋相通；通过格陵兰海和许多海峡与大西洋相连，是世界大洋中最小的一个，面积仅为1475万平方千米，不到太平洋的10％。它的深度为1097米，最深为5527米。古希腊曾把它叫做“正对大熊星座的海洋”。1845年，英国伦敦地理学会命名，经汉文翻译为北冰洋。
北冰洋是以北极点为中心的周围地区，是一片辽阔的水域。位于北极圈内的北冰洋，整个面积为1310万平方千米，是世界四大洋中最小的一个，只有太平洋面积的1\14。因此，北冰洋又被称为北极海。北冰洋海水的总容积为1690万立方千米，平均深度为1296米，(利特克海沟)为5449米。北冰洋占北极地区面积的60％以上，其中2\3以上的海面全年覆盖着厚一米半到四米的巨大冰块。
北极北冰洋鳕鱼分布于整个北极地区，是典型的冷水性鱼类，当温度超过5℃时，即不见它们的踪影。北冰洋鳕鱼以其他鱼类及无脊椎动物为食，吃得多，长得也快，10年左右能长到1米大；食量大，是贪食的洄游鱼类。因集群性生活，捕捉很容易，自古就是相当有名的食用鱼。繁殖力强，体长1米左右的雌鱼，一次可产300万～400万粒卵之多。黄海生殖期1～2月，怀卵量34万～83万粒，沉性卵，径0.98～1.05mm。夏季，北极北冰洋鳕鱼主要生活于喀拉海区巴伦支海的结冰区边缘。北极鳕幼鱼以小型浮游植物和浮游动物为食。随着生长，它所摄食的浮游生物个体逐渐由小变大，并部分地捕食小型鱼类。到每年的9月，北极鳕开始向西方和南方迁移，在冬季零下温度时进行产卵，为浮性卵，产卵量为9000～18000粒。由于水温低，所以孵化期长达4～5个月。它是一种中小型鱼类，最大体长可达36厘米，是北极地区重要的经济鱼类之一。
胶原蛋白是动物结缔组织中的主要成分，也是鱼类和哺乳动物体内含量最多，分布最广的功能性蛋白，胶原蛋白与组织的形成，成熟，细胞间信息的传递，以及关节润滑，伤口愈合，钙化作用，血液凝固和肌肤衰老等有着密切的关系。
胶原蛋白具有非常独特的氨基酸组成，其中甘氨酸含量约为23％，脯氨酸含量约为12％，羟脯氨酸含量约为10％，谷氨酸含量约为10％，丙氨酸含量为8％，精氨酸含量约为8％，其中羟脯氨酸是胶原蛋白特有的氨基酸，作为胶原蛋白的特性氨基酸在对人体的功效作用上起着非常重要的作用。结构决定功能，通过独特的酶解技术可以有效保留对人体健康有功效的羟脯氨酸-甘氨酸，羟脯氨酸-脯氨酸，羟脯氨酸-丙氨酸，羟脯氨酸-谷氨酸，羟脯氨酸-精氨酸。
下面通过具体实施例详细描述本发明。
实施例1
实施例1提出了一种从北冰洋鳕鱼中提取功能性二肽胶原蛋白的方法，包括如下步骤：
(1)将北冰洋鳕鱼的鱼皮剪至直径不大于2cm的碎块，然后将其冷冻干燥，再用粉碎机粉碎，粉碎后的所述鱼皮直径不小于1mm。
(2)将所述步骤(1)处理后得到的鱼皮放入45倍其重量的质量分数为5％的氯化钠溶液中，然后在室温下搅拌14h，再离心分离10min并过滤并收集鱼皮，然后再向所述鱼皮放入50倍其重量的质量分数为5％的氯化钠溶液中，再在室温下搅拌10h，然后离心分离15min并过滤，再用清水清洗鱼皮2次并收集鱼皮。
(3)调节所述步骤(2)处理过的所述鱼皮的浓度为28mg/100ml、ph值为2.0，然后将其加热至40℃，再加入质量浓度为2％的胃蛋白酶溶液并搅拌酶解5h，然后依次离心分离10min、过滤并收集滤液，得到功能性二肽胶原蛋白。其中，所述胃蛋白酶的添加量为每克鱼皮添加7000u。
实施例2
实施例2提出了一种从北冰洋鳕鱼中提取功能性二肽胶原蛋白的方法，包括如下步骤：
(1)将北冰洋鳕鱼的鱼皮剪至直径不大于2cm的碎块，然后将其冷冻干燥，再用粉碎机粉碎，粉碎后的所述鱼皮直径不小于1mm。
(2)将所述步骤(1)处理后得到的鱼皮放入50倍其重量的质量分数为5％的氯化钠溶液中，然后在室温下搅拌10h，再离心分离15min并过滤并收集鱼皮，然后再向所述鱼皮放入45倍其重量的质量分数为5％的氯化钠溶液中，再在室温下搅拌14h，然后离心分离10min并过滤，再用清水清洗鱼皮3次并收集鱼皮。
(3)调节所述步骤(2)处理过的所述鱼皮的浓度为24mg/100ml、ph值为4.0，然后将其加热至35℃，再加入质量浓度为1.5％的胃蛋白酶溶液并搅拌酶解3.75h，然后依次离心分离12min、过滤并收集滤液，得到功能性二肽胶原蛋白。其中，所述胃蛋白酶的添加量为每克鱼皮添加5000u。
实施例3
实施例3提出了一种从北冰洋鳕鱼中提取功能性二肽胶原蛋白的方法，包括如下步骤：
(1)将北冰洋鳕鱼的鱼皮剪至直径不大于2cm的碎块，然后将其冷冻干燥，再用粉碎机粉碎，粉碎后的所述鱼皮直径不小于1mm。
(2)将所述步骤(1)处理后得到的鱼皮放入48倍其重量的质量分数为5％的氯化钠溶液中，然后在室温下搅拌12h，再离心分离12min并过滤并收集鱼皮，然后再向所述鱼皮放入48倍其重量的质量分数为5％的氯化钠溶液中，再在室温下搅拌12h，然后离心分离13min并过滤，再用清水清洗鱼皮3次并收集鱼皮。
(3)调节所述步骤(2)处理过的所述鱼皮的浓度为25.49mg/100ml、ph值为3.0，然后将其加热至45℃，再加入质量浓度为1％的胃蛋白酶，搅拌酶解3h，然后依次离心分离12min、过滤并收集滤液，得到功能性二肽胶原蛋白。其中，所述胃蛋白酶的添加量为每克鱼皮添加6000u。
本发明的从北冰洋鳕鱼中提取功能性二肽胶原蛋白的方法，能够有效保证提取率和产品质量，获得质量稳定，纯度高的产品。通过胃蛋白酶的作用，可以得到无色无味的胶原蛋白产品，改善了胶原蛋白的风味。另外还有效的保留了羟脯氨酸活性二肽的比例，保证了产品的功效。
在本说明书的描述中，参考术语“一个实施例”、“一些实施例”、“示例”、“具体示例”、或“一些示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不必须针对的是相同的实施例或示例。而且，描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。此外，在不相互矛盾的情况下，本领域的技术人员可以将本说明书中描述的不同实施例或示例以及不同实施例或示例的特征进行结合和组合。
尽管上面已经示出和描述了本发明的实施例，可以理解的是，上述实施例是示例性的，不能理解为对本发明的限制，本领域的普通技术人员在本发明的范围内可以对上述实施例进行变化、修改、替换和变型。