一种提高西红花产量的生物菌肥在栽培中的应用方法与流程

本发明涉及生物菌肥在栽培中的应用方法领域，具体为一种提高西红花产量的生物菌肥在栽培中的应用方法。

背景技术

本技术依托国家自然科学基金项目“西红花内生真菌对宿主种球退化、耐盐性与药材品质的影响及栽培应用”的一部分。为构建西红花药材质量品质评价体系、研究西红花内生真菌的种群结构，筛选促生长、增抗性的目标菌株，考察目标菌在人工气候室和试验田内对西红花药材品质的影响。期望通过本研究丰富西红花内生菌资源与功能，为应用内生真菌提高中药材品质，形成西红花优质种球的繁育体系探索一条新的途径，在上世纪六十年代，西红花从日本引种至国内，目前国内主产区主要是浙江、上海等地。西红花在原产地环境中生长情况良好，大多是野生。而引种至国内后，种植中期则需要“起球”。西红花从种植栽培到采收加工均是人工管理，生产面窄，规模小、耗费了大量的劳动力和财力，产量较低，难以满足各方面需求，这也是它价格一直居高不下的主要原因。而提高西红花种球的繁殖能力和产量，是其种植及产业化发展迫切需要解决的问题。是提升其药材品质的重要途径。

技术实现要素：

本发明的目的在于提供一种提高西红花产量的生物菌肥在栽培中的应用方法，以解决上述背景技术中提出的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种提高西红花产量的生物菌肥在栽培中的应用方法，包括以下步骤：

步骤s101：备料，准备若干内生真菌放置在斜面试管的内侧；

步骤s102：将内生真菌自低温保藏的斜面试管菌种活化后，转接至pda培养基中，培养10-20天；

步骤s103：将内生真菌用打孔器打成5mm的菌饼；

步骤s104：将菌饼接种至灭菌常温状态下pdb培养基中发酵培养；

步骤s105：封口，放入摇床，培养7天既得；

步骤s106：通过将制成的内生真菌与自来水混合，用压缩喷雾器对准西红花植株均匀喷雾，其余大田施肥、治虫等田间管理措施均按常规管理措施进行，喷施的菌肥量为6ml/m2。

优选的，起球前施肥，西红花栽培在土壤中，需要的水量较大，菌肥才可以渗透进去，采用6ml生物菌肥和2000ml自来水混合的方式喷施。

优选的，西红花起球后，在室内大棚内放置于木框、铁框中，所需水量较少，且此时西红花不宜多浇水，故以将西红花表面喷湿且菌肥不淋下为度，采用6ml生物菌肥和200ml自来水混合喷施。

优选的，所述步骤s104过程中其中每200mlpdb接种8块菌饼。

优选的，所述步骤s102、步骤s105中的温度控制在24摄氏度到28摄氏度。

优选的，所述本应用方法在8月之后球茎不宜浇水，故不再喷施。

优选的，所述步骤s101至步骤s105之间，每道步骤之间操作采用无菌环境。

优选的，所述本方法操作以不施用生物菌肥为对照，试验至少设5次重复，其他栽培管理措施按当地生产习惯统一操作。

优选的，所述本应用方法在操作的过程中要及时的将带有病变的植株清理。

优选的，所述步骤s101备料所用的内生真菌为从西红花植株中分离所得到的汉斯属内生真菌。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：

本发明所用的内生真菌为从西红花植株中分离所得到的汉斯属内生真菌，分别在西红花大田和人工气候室栽培时，加入内生真菌制成的生物菌肥共同栽培。采用该项新技术，可大大提高西红花产量和有效成分的含量。该技术施肥方法简单，抑郁大面积推广，投资少，生产出的西红花为绿色产品将内生真菌自低温保藏的斜面试管菌种活化后，转接至pda培养基中，于24到28摄氏度下，培养10-20天，将内生真菌用打孔器打成5mm的菌饼，接种至灭菌常温状态下pdb培养基中发酵培养，其中每200mlpdb接种8块菌饼，封口，放入摇床，在24到28摄氏度下下，培养7天既得，用压缩喷雾器对准西红花植株均匀喷雾，其余大田施肥、治虫等田间管理措施均按常规管理措施进行，喷施的菌肥量为6ml/m2，起球前施肥，西红花栽培在土壤中，需要的水量较大，菌肥才可以渗透进去，采用6ml生物菌肥和2000ml自来水混合的方式喷施，西红花起球后，在室内大棚内放置于木框/铁框中，所需水量较少，且此时西红花不宜多浇水，故以将西红花表面喷湿且菌肥不淋下为度，采用6ml生物菌肥和200ml自来水混合喷施，8月之后球茎不宜浇水，故不再喷施，通过西红花内生真菌筛选出增抗性的目标菌株，制成液体生物菌肥，应用于西红花栽培，结果表明，喷施生物菌肥可大大提高西红花产量和有效成分的含量，该技术施肥方法简单，抑郁大面积推广，投资少，生产出的西红花为绿色产品，提高了药材的单产；提高原药材的药材质量及临床疗效，同时施用生物菌肥后，西红花坏球数目降低，药材产量提高60％，依据2015《中国药典》测定西红花指标性成分，结果表明，喷施菌肥后，西红花单株球茎药材产量增加41.8％，30根西红花柱头重量提高18％。

附图说明

图1为本发明一种提高西红花产量的生物菌肥在栽培中的应用方法步骤流程图。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

请参阅图1，本发明提供一种技术方案：一种提高西红花产量的生物菌肥在栽培中的应用方法，包括以下步骤：

步骤s101：备料，准备若干内生真菌放置在斜面试管的内侧；

步骤s102：将内生真菌自低温保藏的斜面试管菌种活化后，转接至pda培养基中，培养10-20天；

步骤s103：将内生真菌用打孔器打成5mm的菌饼；

步骤s104：将菌饼接种至灭菌常温状态下pdb培养基中发酵培养；

步骤s105：封口，放入摇床，培养7天既得；

步骤s106：通过将制成的内生真菌与自来水混合，用压缩喷雾器对准西红花植株均匀喷雾，其余大田施肥、治虫等田间管理措施均按常规管理措施进行，喷施的菌肥量为6ml/m2。

优选的，起球前施肥，西红花栽培在土壤中，需要的水量较大，菌肥才可以渗透进去，采用6ml生物菌肥和2000ml自来水混合的方式喷施。

优选的，西红花起球后，在室内大棚内放置于木框、铁框中，所需水量较少，且此时西红花不宜多浇水，故以将西红花表面喷湿且菌肥不淋下为度，采用6ml生物菌肥和200ml自来水混合喷施，8月之后球茎不宜浇水，故不再喷施。

本发明起球前施肥，西红花栽培在土壤中，需要的水量较大，菌肥才可以渗透进去，采用6ml生物菌肥和2000ml自来水混合的方式喷施，开始栽培使需要大量的营养和水份供其吸收。

本发明西红花起球后，在室内大棚内放置于木框、铁框中，所需水量较少，且此时西红花不宜多浇水，故以将西红花表面喷湿且菌肥不淋下为度，采用6ml生物菌肥和200ml自来水混合喷施，发育完成后，若有过多的水份留在其中，植株又吸收不了，会导致出现病变或者烂根。

本发明所述步骤s104过程中其中每200mlpdb接种8块菌饼，便于与其他生物菌肥的充分结合。

本发明所述步骤s102、步骤s105中的温度控制在24摄氏度到28摄氏度，便于生物菌肥的发酵。

本发明所述本应用方法在8月之后球茎不宜浇水，故不再喷施，便于植株的生长和采收。

本发明所述步骤s101至步骤s105之间，每道步骤之间操作采用无菌环境，避免在各个步骤之间的操作出现病变或携带病原体。

本发明所述本方法操作以不施用生物菌肥为对照，试验至少设5次重复，其他栽培管理措施按当地生产习惯统一操作，便于最为对照组，避免出现偶然现象。

本发明所述本应用方法在操作的过程中要及时的将带有病变的植株清理，避免植株的病变在其之间传播扩散。

本发明所述步骤s101备料所用的内生真菌为从西红花植株中分离所得到的汉斯属内生真菌，便于与西红花的锲合。

工作原理：本发明所用的内生真菌为从西红花植株中分离所得到的汉斯属内生真菌，分别在西红花大田和人工气候室栽培时，加入内生真菌制成的生物菌肥共同栽培。采用该项新技术，可大大提高西红花产量和有效成分的含量。该技术施肥方法简单，抑郁大面积推广，投资少，生产出的西红花为绿色产品将内生真菌自低温保藏的斜面试管菌种活化后，转接至pda培养基中，于24到28摄氏度下，培养10-20天，将内生真菌用打孔器打成5mm的菌饼，接种至灭菌常温状态下pdb培养基中发酵培养，其中每200mlpdb接种8块菌饼，封口，放入摇床，在24到28摄氏度下下，培养7天既得，用压缩喷雾器对准西红花植株均匀喷雾，其余大田施肥、治虫等田间管理措施均按常规管理措施进行，喷施的菌肥量为6ml/m2，起球前施肥，西红花栽培在土壤中，需要的水量较大，菌肥才可以渗透进去，采用6ml生物菌肥和2000ml自来水混合的方式喷施，西红花起球后，在室内大棚内放置于木框/铁框中，所需水量较少，且此时西红花不宜多浇水，故以将西红花表面喷湿且菌肥不淋下为度，采用6ml生物菌肥和200ml自来水混合喷施，8月之后球茎不宜浇水，故不再喷施，通过西红花内生真菌筛选出增抗性的目标菌株，制成液体生物菌肥，应用于西红花栽培，结果表明，喷施生物菌肥可大大提高西红花产量和有效成分的含量，该技术施肥方法简单，抑郁大面积推广，投资少，生产出的西红花为绿色产品，提高了药材的单产；提高原药材的药材质量及临床疗效，同时施用生物菌肥后，西红花坏球数目降低，药材产量提高60％，依据2015《中国药典》测定西红花指标性成分，结果表明，喷施菌肥后，西红花单株球茎药材产量增加41.8％，30根西红花柱头重量提高18％。

需要说明的是，在本文中，诸如第一和第二等之类的关系术语仅仅用来将一个实体或者操作与另一个实体或操作区分开来，而不一定要求或者暗示这些实体或操作之间存在任何这种实际的关系或者顺序。而且，术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含，从而使得包括一系列要素的过程、方法、物品或者设备不仅包括那些要素，而且还包括没有明确列出的其他要素，或者是还包括为这种过程、方法、物品或者设备所固有的要素。

尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。