技术总结
本发明公开了一种构建人T淋巴细胞受体β链互补决定区CDR3文库的PCR引物和方法，包括以下步骤：a.实验试剂：RNA提取试剂盒、cDNA合成试剂盒、PCR扩增酶的准备；b.利用RNA提取试剂盒提取淋巴细胞样本RNA；c.利用cDNA合成试剂盒将提取出的RNA样本反转录为cDNA，本发明能够高效的扩增TCRβ和TCRδCDR3区域，巢式PCR的方法扩增效率高达90％，可高效构建CDR3文库，解决样本中TCR模板量少的问题；利用特异性的PCR扩增酶，克服多重PCR扩增效率不均衡的现象，还原模板中CDR3的真实组成情况；利用此方法扩增的CDR3文库大小主要集中在100bp‑300bp之间，能够通过二代测序将其条带测通，有效降低其测序成本，从而了解CDR3序列的排列情况，为进一步的市场开发应用提供可能性，便于推广使用。
技术研发人员：王科嘉;梁青
受保护的技术使用者：王科嘉
技术研发日：2018.08.15
技术公布日：2018.11.23