一种用于皮肤美白与缓解红肿的化合物及其制备方法与流程

本发明涉及医药
技术领域：
，具体涉及一种用于皮肤美白与缓解红肿的化合物及其制备方法。
背景技术：
胡椒是传统中药，为胡椒科植物，主要含生物碱和挥发油，此外还含丰富的有机酸、酚类化合物。生活中用胡椒粉煮水或泡酒擦洗冻疮效果显著。胡椒提取物在冻疮治疗以改善微循环，兼顾抗炎、镇痛和止痒等功效都有相关报道。糖苷类化合物是植物在生长过程中形成的次级代谢产物，糖苷类化合物具有稳定性好、较强的亲水性等特点，可以广泛应用于化妆品的保湿成分。若以葡萄糖苷形式存在于动物体表或体内能更好的发挥其生物活性。目前，糖苷类化合物制备方法主要是从植物中分离提纯法、生物酶促合成法和化学法合成法。从植物体提取糖苷类化合物工艺复杂，酸碱度难以控制，缺乏有效的纯化和分离技术。现有技术中没有出现过将胡椒提取物与葡萄糖苷应用在皮肤美白与缓解红肿的相关报道。技术实现要素：本发明所要解决的技术问题是：提供一种具有皮肤美白、保湿、消炎止痒、缓解红肿、促进受伤组织修复的化合物及其制备方法。为了解决上述技术问题，本发明采用的技术方案为：一种用于皮肤美白与缓解红肿的化合物，所述用于皮肤美白与缓解红肿的化合物为胡椒醇葡萄糖苷，所述胡椒醇葡萄糖苷的化学结构式如下：本发明还提供一种上述胡椒醇葡萄糖苷的制备方法，包括如下步骤：步骤1、向溶剂中加入胡椒醇和2,3,4,6-o-四乙酰基-α-d-溴代葡萄糖并搅拌，所述胡椒醇和2,3,4,6-o-四乙酰基-α-d-溴代葡萄糖的摩尔比为1～10：1，再加入催化剂反应，所述催化剂和胡椒醇的摩尔比为1:1～10，反应结束后得到如下化学结构式的第一葡萄糖苷：步骤2、将步骤1所得的第一葡萄糖苷与氢化钠以摩尔比1:1～10混合，再加入甲醇和硫酸镁，加热回流12～24小时，反应结束后调节ph至中性，过滤得到滤液，将所述滤液浓缩得到胡椒醇葡萄糖苷，所述胡椒醇葡萄糖苷的化学结构式如下：本发明的有益效果在于：本发明将胡椒的有效成分胡椒醇与葡萄糖相结合，运用有机化学合成方法制备了一种胡椒醇葡萄糖苷，反应具有简单易行、容易控制和选择性好等优点，将胡椒醇葡萄糖苷应用于生物活体实验，发现其具有皮肤美白、保湿、消炎止痒、缓解红肿、促进受伤组织修复等功效，应用前景十分广泛。附图说明图1为本发明具体实施方式的胡椒醇葡萄糖苷的质谱图；图2为本发明具体实施方式的胡椒醇葡萄糖苷的苷核磁共振氢谱图；图3为本发明具体实施方式的胡椒醇葡萄糖苷的苷核磁共振碳谱图。具体实施方式为详细说明本发明的技术内容、所实现目的及效果，以下结合实施方式并配合附图予以说明。本发明最关键的构思在于:将胡椒的有效成分胡椒醇与葡萄糖相结合，运用有机化学合成方法制备了一种胡椒醇葡萄糖苷，制备得到的胡椒醇葡萄糖苷具有皮肤美白、保湿、消炎止痒、缓解红肿、促进受伤组织修复等功效。请参照图1～图3所示，一种用于皮肤美白与缓解红肿的化合物，所述用于皮肤美白与缓解红肿的化合物为胡椒醇葡萄糖苷，所述胡椒醇葡萄糖苷的化学结构式如下：本发明还提供一种上述胡椒醇葡萄糖苷的制备方法，包括如下步骤：步骤1、向溶剂中加入胡椒醇和2,3,4,6-o-四乙酰基-α-d-溴代葡萄糖并搅拌，所述胡椒醇和2,3,4,6-o-四乙酰基-α-d-溴代葡萄糖的摩尔比为1～10：1，再加入催化剂反应，所述催化剂和胡椒醇的摩尔比为1:1～10，反应结束后得到如下化学结构式的第一葡萄糖苷：步骤2、将步骤1所得的第一葡萄糖苷与氢化钠以摩尔比1:1～10混合，再加入甲醇和硫酸镁，加热回流12～24小时，反应结束后调节ph至中性，过滤得到滤液，将所述滤液浓缩得到胡椒醇葡萄糖苷，所述胡椒醇葡萄糖苷的化学结构式如下：胡椒醇葡萄糖苷为白色或类白色固体，化学名为2-((苯并[d][1,3]二氧基-6-基)甲氧基)-四氢-6-(羟甲基)--2h-吡喃-3,4,5-三醇(简称胡椒醇葡萄糖苷)，分子式为c14h18o8。核磁氢谱(400mhz,d2o)δ:6.91(s,1h),6.86(j＝8.0hz,1h),6.81(j＝8.0hz,1h),5.90(s,2h),4.70-4.75(m,5h),4.57(d,j＝8.0hz,1h),4.41(d,j＝8.0hz,1h),3.83(d,j＝8.0hz,1h),3.62-3.65(m,1h),3.27-3.38(m,3h),3.19(t,j＝8.0hz,1h).核磁碳谱(100mhz,d2o)δ:147.65,146.96,132.34,121.57,108.87,108.33,102.26,101.29,77.44,77.19,73.96,70.60,69.70,61.60.高分辨质谱(ms)：计算值c14h18o8:314.29,测量值314.29+23(m+na-)。由上述描述可知，本发明的有益效果在于：本发明将胡椒的有效成分胡椒醇与葡萄糖相结合，运用有机化学合成方法制备了一种胡椒醇葡萄糖苷，反应具有简单易行、容易控制和选择性好等优点，将胡椒醇葡萄糖苷应用于生物活体实验，发现其具有皮肤美白、保湿、消炎止痒、缓解红肿、促进受伤组织修复等功效，应用前景十分广泛。进一步的，所述步骤1具体为：向丙酮中加入胡椒醇和2,3,4,6-o-四乙酰基-α-d-溴代葡萄糖并在25～30℃下搅拌，所述胡椒醇和2,3,4,6-o-四乙酰基-α-d-溴代葡萄糖的摩尔比为1～10：1，再加入碳酸钾反应2～10小时，所述碳酸钾和胡椒醇的摩尔比为1:1～10，反应结束后加入蒸馏水析出如下化学结构式的第一葡萄糖苷：第一葡萄糖苷化学名为1-(3,4-亚甲二氧苄基)2,3,4,6-o-四乙酰基-α-d-葡萄糖苷。进一步的，所述步骤1具体为：向二氯甲烷中加入胡椒醇和2,3,4,6-o-四乙酰基-α-d-溴代葡萄糖并在0℃下搅拌，所述胡椒醇和2,3,4,6-o-四乙酰基-α-d-溴代葡萄糖的摩尔比为1～10：1，再加入ag2co3避光反应10～40小时，所述ag2co3和胡椒醇的摩尔比为1:1～10，反应结束后过滤，滤液干燥、减压蒸去溶剂得到如下化学结构式的第一葡萄糖苷：第一葡萄糖苷化学名为1-(3,4-亚甲二氧苄基)2,3,4,6-o-四乙酰基-α-d-葡萄糖苷。进一步的，所述步骤2中加入稀盐酸调节ph至中性。进一步的，所述步骤2中滤液浓缩后再进行乙醇-水体系重结晶得到胡椒醇葡萄糖苷。胡椒醇葡萄糖苷为白色或类白色固体，化学名为2-((苯并[d][1,3]二氧基-6-基)甲氧基)-四氢-6-(羟甲基)--2h-吡喃-3,4,5-三醇(简称胡椒醇葡萄糖苷)。实施例1一种用于皮肤美白与缓解红肿的化合物的制备方法，包括如下步骤：步骤1、向装有25ml丙酮的三口烧瓶中，加入8.0g(0.053mol)胡椒醇和四乙酰基-α-d-溴代葡萄糖5.0g(0.012mol)，加入8.0g碳酸钾，加热搅拌回流8小时，停止反应。冷却至室温，加入40ml蒸馏水充分搅拌，析出固体即为第一葡萄糖苷；步骤2、向装有50ml甲醇的三口烧瓶中，加入3.0g(0.006mol)步骤1所得第一葡萄糖苷、氢化钠3.0g(0.125mol)和4.0g无水硫酸镁，加热搅拌回流10小时，薄层色谱检测原料点消失。停止反应，蒸去溶剂，滴加盐酸溶液(1m)调制中性，经乙醇-水(1:1)重结晶，得到类白色或者白色固体，即为所述胡椒基葡萄糖苷，产率90％。实施例2步骤1、向装有25ml丙酮的100ml三口烧瓶中，加入8.0g(0.053mol)胡椒醇和四2,3,4,6-o-四乙酰基-α-d-溴代葡萄糖10.0g(0.024mol)，加入10.0g碳酸钾，室温加热搅拌12小时，停止反应。加入50ml蒸馏水充分搅拌，析出固体即为第一葡萄糖苷，产率35％；步骤2、向装有40ml甲醇的三口烧瓶中，加入3.0g(0.006mol)步骤1所得第一葡萄糖苷和氢化钠3.0g(0.125mol)，3.5g无水硫酸镁，加热搅拌回流12小时，薄层色谱检测原料点消失。停止反应，蒸去溶剂，滴加盐酸溶液(m)调制中性，经乙醇-水(1:1)重结晶，得到类白色或者白色固体，即为所述胡椒基葡萄糖苷,产率88％。实施例3步骤1、向装有40ml二氯甲烷的三口烧瓶中，加入8.0g(0.053mol)胡椒醇和四2,3,4,6-o-四乙酰基-α-d-溴代葡萄糖5.0g(0.012mol)，加入14.6g(0.053mol)碳酸银，加热搅拌回流8小时，停止反应。冷却至室温，过滤，滤液加入5％氢氧化钠溶液充分洗涤3次，分出有机层，硫酸镁干燥，过滤，减压蒸去溶剂，得到第一葡萄糖苷固体，产率28％；步骤2、向装有50ml甲醇的三口烧瓶中，加入3.0g(0.006mol)步骤1所得的第一葡萄糖苷甲醇钠0.5g(0.009mol)和5.0g无水硫酸镁，加热搅拌回流10小时，薄层色谱检测原料点消失。停止反应，蒸去溶剂，滴加盐酸溶液(1m)调制中性，经乙醇-水(1:1)重结晶，得到类白色或者白色固体，即为所述胡椒基葡萄糖苷,产率94％。实施例4步骤1、向溶剂中加入胡椒醇和2,3,4,6-o-四乙酰基-α-d-溴代葡萄糖并搅拌，所述胡椒醇和2,3,4,6-o-四乙酰基-α-d-溴代葡萄糖的摩尔比为10：1，再加入碳酸钾反应，所述碳酸钾和胡椒醇的摩尔比为1:10，反应结束后得到第一葡萄糖苷。步骤2、将步骤1所得的第一葡萄糖苷与氢化钠以摩尔比1:10混合，再加入甲醇和硫酸镁，加热回流12～24小时，反应结束后调节ph至中性，过滤得到滤液，将所述滤液浓缩得到胡椒醇葡萄糖苷。实施例5步骤1、向溶剂中加入胡椒醇和2,3,4,6-o-四乙酰基-α-d-溴代葡萄糖并搅拌，所述胡椒醇和2,3,4,6-o-四乙酰基-α-d-溴代葡萄糖的摩尔比为1：1，再加入碳酸钾反应，所述碳酸钾和胡椒醇的摩尔比为1:1，反应结束后得到第一葡萄糖苷。步骤2、将步骤1所得的第一葡萄糖苷与氢化钠以摩尔比1:1混合，再加入甲醇和硫酸镁，加热回流12～24小时，反应结束后调节ph至中性，过滤得到滤液，将所述滤液浓缩得到胡椒醇葡萄糖苷。抗红肿测试方法：为了测试本发明物具有抗红肿效果，将该发明物配置成含不同浓度的胡椒醇葡萄糖苷组合物对人体皮肤进行测试。去红肿测试方法如下：选取30名志愿者，年龄在25-55岁，之前无过敏史，全身无过敏现象，在志愿者同意情况下，在受试者前臂施用0.2％的十二烷基硫酸钠溶液来引发皮肤红肿，该区域用封闭的贴片保护24小时。24小时后，除去贴片，可以使用minoltachromameter的a*值对刺激引发的发红进行评估，并拍照存档。测定之后，立即用本发明的组合物处理该区域。使用方法：连续使用8周，早晚各一次，拍照存档。对比第0周和第8周的照片，观察结果。对比组1：同样在这30名受试者前臂另外一处同样施用上述方法进行处理。测定之后，用安慰剂处理该区域。使用方法：连续使用8周，早晚各一次，拍照存档。对比第0周和第8周的照片，观察结果。对比组2：同样在这30名受试者前臂另外一处同样施用上述方法进行处理。测定之后，不用任何药物处理。使用方法：连续使用8周，早晚各一次，拍照存档。对比第0周和第8周的照片，观察结果。判定标准：序号效果鉴定标准1++显著效果红肿消除70％以上2+有效红肿消除30％以上3-无效红肿消除5％以下去红肿效果测试记录表：显著效果++有效+无效-组合物19165组合物215105组合物32343对比组10624对比组20228从上表可见：组合物1、组合物2、组合物3均含有胡椒醇葡萄糖苷活性组分，且均对皮肤红肿治疗有显著的治疗效果。组合物1、组合物2、组合物3分别添加不同浓度的胡椒醇葡萄糖苷，但从表中可以看出组合物3效果更为显著，由此可见2％浓度胡椒醇糖苷添加量对缓解皮肤红肿有着显著的效果。美白效果测试方法：为了测试本发明物具有美白效果，将该发明物配置成含不同浓度的胡椒醇葡萄糖苷组合物对人体皮肤进行测试。黑色素抑制率测试方法：选取30名女性志愿者，采用mexametermx18测量人体皮肤中黑色素含量，对上述产品的美白功效进行评价。采用皮肤色素仪测定其面部皮肤的黑色素含量。测试环境温度在(23±1)℃。使用方法：连续使用30天，各实施例每天早晚各使用一次，均匀的涂抹在皮肤上，受试对象在测试期间不使用其他具有美白的产品。最后测定黑色素降低率，黑色素降低率越高说明美白效果越好。黑色素降低率＝(使用前1天的黑色素含量-连续使用化妆品30天后黑色素含量)÷使用前1天的黑色素含量×100％。黑色素抑制率测试数据表实验组胡椒醇葡萄糖苷含量％黑色素抑制率％实施例10.524％实施例21.058％实施例32.079％对比组103％对比组201％由上述测试数据表可以看出，添加胡椒醇葡萄糖苷的组合物对黑色素具有明显的抑制效果，而且含2.0％浓度的胡椒醇葡萄糖苷组分对黑色素抑制效果很明显。酪氨酸酶抑制率测试方法：在0.9ml的试样溶液中，加入1mll酪氨酸(0.3mol)和0.1molph＝6.8的磷酸缓冲液(pbs),在37℃恒温水槽中预热10分钟，再加入0.1ml酪氨酸酶水溶液，充分搅拌混匀，在37℃反应15分钟后，测定480nm吸光度(a)。另外，用上述实施例代替磷酸缓冲溶液进行同样的反应，测得吸光度(b)。为了对照，在不加胡椒醇葡萄糖苷溶液和酪氨酸酶的条件下，测得吸光度(c)。用以下公式计算出酪氨酸酶活性抑制率。酪氨酸酶抑制率(％)＝(b-a)/(b-c)*100酪氨酸酶活性抑制数据表：实验组胡椒醇葡萄糖苷含量％酪氨酸酶抑制率％实施例10.531％实施例21.053％实施例32.072％对比组101％对比组200.5％由上述测试数据表可以看出，添加胡椒醇葡萄糖苷的组合物对酪氨酸酶具有明显的抑制效果，而且含2.0％浓度的胡椒醇葡萄糖苷组分对酪氨酸抑制效果很明显。抗紫外效果实施例抗紫外功效测试：将人正常的角化细胞(hacat细胞)接入到30个微孔板上进行培养，密度为1*85个细胞/孔，并在dmem培养基中37下培养24h，用紫外线(uvb)照射培养细胞，然后将实施例1至3与对比组1-2的样品分别添加到每个孔培养物中，24h后用mtt的检测方法来分析细胞活性。测试结果表由上表可以看出本发明物有助于降低紫外光对细胞的的损伤，降低了细胞的死亡率，而且能提高细胞新陈代谢，有助于细胞增殖。trpv1拮抗活性测试：trpv1是trp(transientreceptorpotential)瞬时受体电位受体家族之一，是一种伤害性感受器，能够被辣椒素、伤害性热刺激和酸化等特异性激活。本实验是对胡椒醇葡萄糖苷对辣椒素引起p物质具有抑制性进行评估。试验方案，设置空白组，对照组和测试组，空白组(神经元细胞和生理盐水)，对照组(神经元细胞和辣椒素)，测试组(在对照组中加入指定浓度的胡椒醇葡萄糖苷)。因此，胡椒醇葡萄糖苷溶液在该测试中的浓度分别为0.01％；0.1％；1％，培养时间为10分钟。细胞共培养10分钟后，取培养物上清液，通过elisa分析从培养物上清液中评估p物质。测试结果数据表从表中可以看出胡椒醇葡萄糖苷对辣椒素引起p物质具有良好的抑制性，对trpv1具有良好的拮抗作用。综上所述，本发明提供的用于皮肤美白与缓解红肿的化合物，本发明将胡椒的有效成分胡椒醇与葡萄糖相结合，胡椒醇的羟基与葡萄糖的羟基通过醚化合成胡椒醇葡萄糖苷，反应具有简单易行、容易控制和选择性好等优点，将胡椒醇葡萄糖苷应用于生物活体实验，发现其具有皮肤美白、保湿、消炎止痒、缓解红肿、促进受伤组织修复等功效，应用前景十分广泛。以上所述仅为本发明的实施例，并非因此限制本发明的专利范围，凡是利用本发明说明书及附图内容所作的等同变换，或直接或间接运用在相关的
技术领域：
，均同理包括在本发明的专利保护范围内。当前第1页12