本发明属于植物提取分离
技术领域：
，特别涉及一种水曲柳种子提取物、提取分离方法及其应用。
背景技术：
水曲柳(fraxinusmandschuricarupr)为木犀科(oleaceae)梣属(fraxinus)植物的一种，分布于朝鲜、日本、俄罗斯以及中国大陆等。在中国，水曲柳主要分布于中国东北黑龙江的大兴安岭东部和小兴安岭、吉林的长白山等地。生长于海拔700米至2100米的地区，一般生长在山坡疏林中或河谷平缓山地。水曲柳一直作为优质木材，有广泛的用途，比如制作家具、运动器材、及农具手柄等生活用途。其树皮具有抗炎镇痛之功效，常作秦皮的替代品使用。《新华本草纲要》记载了它的皮味苦，性寒有，具有清热燥湿，清肝明目的功能，用于肠炎、痢疾、月经不调、白带、慢性支气管炎、急性结膜炎、疟疾的治疗。水曲柳种子的采摘时间一般在九月末到十月初，从种子的胚芽时期到成熟大约需要140天左右，成熟种子的长度约1.4～1.6cm。水曲柳种子的化学成分系统研究未见报道，同属植物种子研究表明，种子含有的主要成分与树皮、叶相似，其主要化学成分是香豆素类、环烯醚萜类和苯乙醇苷类化合物，环烯醚萜主要以苷的形式或者与苯乙醇形成酯。近年来的研究表明，环烯醚萜类化合物作为梣属植物的主要代谢产物，具有多种值得关注的生理活性，例如降血糖、保肝、抗氧化、促进皮肤再生、利尿等，在植物化学研究中逐渐成为了热点。技术实现要素：本发明水曲柳种子提取物在制备降血糖、皮肤增白及健脑健忆药物中具备应用前景。本发明提供了一种水曲柳种子提取物，包含以下22种组分：如式s2-1-2所示的nuzhenide、式s2-2-2所示的isooleonuezhenide、式s2-4-1所示的jaspolyoleosideb、式s2-2-3所示的safghanosidea、式s2-4-2所示的excelsideb、式s3-1所示的lucidumosidea、式s3-2所示的safghanosideg、式s3-3所示的oleopolynuzhenidea、式s2-2-4-1所示的gi-3、式e2-4所示的jaspolyanoside、式e-5-1所示的(8e)-ligstroside、式ea-6-3所示的nicotiflorine、式ea-6-7所示的oleuricinea、式m-m-6-2所示的sclerosteroidj、式m-1所示的3β,28-dihydroxyoleana-11,13(18)-diene、式m-3所示的熊果酸、式m-6-2-1所示的秦皮醇、式m-6-2-2所示的茴香内酯、式m-2所示的(+)-8-hydroxypinoresinol、式m-6-89所示的al072、式m-6-3所示的d-aromadendrane-4β,10α-diol、式e2-1所示的酪醇；一种上述水曲柳种子提取物的提取分离方法，包括如下步骤：s1，将水曲柳种子制成粉末，用相当于3倍粉末重量的体积浓度为90％的乙醇溶液渗漏提取三次，每次浸泡48h后再开始渗漏，合并三次提取液并减压浓缩，得浸膏；s2，将s1中浸膏用水分散溶解，依次分别用二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇萃取，对各萃取剂层减压浓缩，得二氯甲烷萃取混合物、乙酸乙酯萃取混合物、正丁醇萃取混合物；其中，减压浓缩的条件均为：45℃、－0.1mpa；s3，将二氯甲烷萃取混合物经100～200目硅胶柱层析分离，石油醚-乙酸乙酯溶液梯度洗脱，得7个馏分，各馏分分别用300～400目硅胶柱层析分离，用石油醚-乙酸乙酯溶液梯度洗脱，分离得到式m-1、m-2、m-3、m-6-2-1、m-m-6-2、m-6-89、m-6-2-2、m-6-3的8种化合物；s4，将乙酸乙酯萃取混合物用60～100目硅胶以质量比1:1拌样，干燥后上100～200目硅胶柱，用二氯甲烷-甲醇溶液梯度洗脱，然后用甲醇冲洗，得7个馏分，各馏分分别用200～300目硅胶柱层析分离，用二氯甲烷-甲醇溶液梯度洗脱，然后用小孔树脂柱层析，甲醇-水系统洗脱，得式e2-4、e-5-1、ea-6-3、ea-6-7、e2-1的5种化合物；s5，将正丁醇萃取混合物用聚酰胺树脂柱层析进行富集，得白色固体，用相当于白色固体4/5重量的60～100目硅胶拌样，干燥后干法上100～200目的硅胶柱，用二氯甲烷-甲醇溶液梯度洗脱，甲醇冲洗，得7个馏分，各馏分分别经300～400目的硅胶柱层析，用二氯甲烷-甲醇溶液梯度洗脱，然后用小孔树脂柱、硅胶柱中的一种或两种或同种反复使用做层析，得式s2-1-2、s2-2-2、s2-4-1、s2-2-3、s2-4-2、s3-1、s3-2、s3-3、s2-2-4-1的9种化合物；其中，s5中二氯甲烷-甲醇溶液中两者的体积比为100：1～0：1；小孔树脂柱进行层析时洗脱剂均为甲醇-水溶液，且两者的体积比为1:9～9:1；。一种上述的水曲柳种子提取物在皮肤增白药物、益智健脑药物、降血糖药物方面的应用。优选地，所述水曲柳种子提取物中秦皮醇、al072、lucidumosidea、sclerosteroidj、熊果酸、nuzhenide在抑制酪氨酸酶活性上的应用。优选地，所述水曲柳种子提取物中秦皮醇、al072、lucidumosidea、sclerosteroidj、熊果酸、茴香内酯、oleuricinea、nuzhenide、safghanosidea在抑制乙酰胆碱酯酶活性上的应用。优选地，所述水曲柳种子提取物中秦皮醇、al072、lucidumosidea、sclerosteroidj、isooleonuezhenide、茴香内酯、熊果酸、oleuricinea、nuzhenide、safghanosidea在抑制α-葡萄糖苷酶活性上的应用。与现有技术相比，本发明的有益效果：本发明利用薄层色谱、硅胶柱色谱、mci-chp20p、高效液相色谱hplc等现代色谱分离技术，通过nmr、uv等现代波谱分析技术，从水曲柳种子中首次提取分离的化合物22个，环烯醚萜类13个，三萜类3个，香豆素类2个，1个木质素类，1个脂肪酸内酯类以及2个其他类。水曲柳种子提取物中部分化合物具有良好的α-葡萄糖苷酶、酪氨酸酶和乙酰胆碱酯酶抑制活性，在制备降血糖、皮肤增白及健脑健忆药物中具备应用前景。具体实施方式下面是对本发明的一个具体实施方式进行详细描述，但应当理解本发明的保护范围并不受具体实施方式的限制。实施例1一种水曲柳种子提取物的提取分离方法，包括以下步骤：s1，将水曲柳种子30kg制成粉末，用相当于3倍粉末重量的体积浓度为90％的乙醇溶液渗漏提取三次，每次浸泡48h后再开始渗漏，合并三次提取液，45℃、－0.1mpa条件下减压浓缩，得浸膏1.441kg；s2，将s1中浸膏用适量水分散溶解，依次分别用二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇萃取，对各萃取剂层在45℃、－0.1mpa条件下减压浓缩，得二氯甲烷萃取混合物(0.388kg)、乙酸乙酯萃取混合物(0.089kg)、正丁醇萃取混合物(0.433kg)还有水层部分(0.485kg)。s3，将二氯甲烷萃取混合物经100～200目硅胶柱层析分离，石油醚-乙酸乙酯溶液(40:1～1:1)梯度洗脱，得7个馏分：fr1(石油醚-乙酸乙酯(40:1～35:1))、fr2(石油醚-乙酸乙酯(35:1～25:1))、fr3(石油醚-乙酸乙酯(25:1～20:1))、fr4(石油醚-乙酸乙酯(20:1～15:1))、fr5(石油醚-乙酸乙酯(15:1～10:1))、fr6(石油醚-乙酸乙酯(10:1～2:1))、fr7(石油醚-乙酸乙酯(2:1～1:1))，各馏分分别用300～400目硅胶柱层析分离，用石油醚-乙酸乙酯溶液(30:1～1:1)梯度洗脱，在fr4中分离得到了式m-1(20mg，洗脱液体积比16:1)化合物，在fr5中分离得到式m-3(8mg，洗脱液体积比10:1)，fr6中分离得到了式m-6-3(18mg，洗脱液体积比12:1)、m-6-89(10mg，洗脱液体积比9:1)、m-6-2-1(13mg，洗脱液体积比8:1)、m-m-6-2(16mg，洗脱液体积比15:1)，fr7中分离得到了式m-2(3g，洗脱液体积比14:1)、m-6-2-2(20mg，洗脱液体积比6:1)，共8种化合物；s4，将乙酸乙酯萃取混合物用60～100目硅胶以质量比1:1拌样，干燥后上100～200目硅胶柱，用二氯甲烷-甲醇溶液(100：1～0：1)梯度洗脱，然后用甲醇冲洗，洗脱过程中根据tlc检测结果，得到7个馏分：br1(二氯甲烷：甲醇梯度为100:1～75:1)、br2(二氯甲烷：甲醇梯度为75:1～50:1)、br3(二氯甲烷：甲醇梯度为50:1～30:1)、br4(二氯甲烷：甲醇梯度为30:1～20:1)、br5(二氯甲烷：甲醇梯度为20:1～8:1)、br6(二氯甲烷：甲醇梯度为8:1～1:1)、br7(二氯甲烷：甲醇梯度为1:1～0:1)，各馏分分别用200～300目硅胶柱层析分离，用二氯甲烷-甲醇溶液(70：1～5：1)梯度洗脱，富集主要化合物(大部分化合物主要集中在二氯甲烷：甲醇梯度为45:1～5:1阶段收集)，然后用小孔树脂柱层析，甲醇-水(以甲醇为准，v/v，洗脱梯度为10％，25％，50％，75％，90％)系统洗脱，其中馏分br2中分离得到式e2-1(25mg，50％)、e2-4(38mg，75％)，馏分br5中分离得到式e-5-1(22mg，50％)，馏分br6中分离得到式ea-6-3(15mg，50％)、ea-6-7(58mg，75％)，共5种化合物。s5，将正丁醇萃取混合物用聚酰胺树脂柱层析进行富集，得白色固体0.25kg，用0.2kg重量的60～100目硅胶拌样，干燥后干法上2kg的100～200目硅胶柱，用二氯甲烷-甲醇溶液(100：1～0：1)梯度洗脱，甲醇冲洗，洗脱过程中根据tlc检测结果，得到7个馏分：cr1(二氯甲烷：甲醇梯度为100:1～65:1)、cr2(二氯甲烷：甲醇梯度为65:1～45:1)、cr3(二氯甲烷：甲醇梯度为45:1～30:1)、cr4(二氯甲烷：甲醇梯度为30:1～20:1)、cr5(二氯甲烷：甲醇梯度为20:1～10:1)、cr6(二氯甲烷：甲醇梯度为10:1～1:1)、cr7(纯甲醇冲柱)；馏分cr2，经硅胶(300～400目)柱层析，以二氯甲烷-甲醇(80：1～5：1)梯度洗脱，将其划分为4段cr2-1(二氯甲烷：甲醇梯度为80:1～30:1)、cr2-2(二氯甲烷：甲醇梯度为30:1～20:1)、cr2-3(二氯甲烷：甲醇梯度为20:1-8:1)、cr2-4(二氯甲烷：甲醇梯度为8:1～5:1)，对cr2-1馏分用mci-chp20p填料，甲醇-水(以甲醇为准，v/v，洗脱梯度为10％，25％，50％，75％，90％)梯度洗脱，得到式s2-1-2(134mg，50％)的化合物；cr2-2馏分先反复经硅胶柱层析(二氯甲烷-甲醇梯度洗脱，50：1～5：1)，并结合mci-chp20p(甲醇-水，以甲醇为准，v/v，洗脱梯度为10％，25％，50％，75％，90％)，将得到式s2-2-2(19mg，25％)、s2-2-3(16mg，50％)、s2-2-4-1(15mg，75％)的化合物；cr2-4馏分先反复经硅胶柱层析(二氯甲烷-甲醇梯度洗脱，40：1～1：1)，并结合mci-chp20p(甲醇-水，以甲醇为准，v/v，洗脱梯度为10％，25％，50％，75％，90％)，得到式s2-4-1(186mg，50％)、s2-4-2(96mg，75％)的化合物；馏分cr-3，经硅胶(300～400目)柱层析，以二氯甲烷-甲醇(60：1～5：1)梯度洗脱，将其划分为5段cr3-1(二氯甲烷：甲醇梯度为60:1～45:1)、cr3-2(二氯甲烷：甲醇梯度为45:1～25:1)、cr3-3(二氯甲烷：甲醇梯度为25:1～15:1)、cr3-4(二氯甲烷：甲醇梯度为15:1～5:1)、cr3-5(纯甲醇洗柱)，洗脱过程中根据tlc检测，主要的化合物集中在cr3-2～cr3-4中，因此对每一小段馏分进行300～400目硅胶柱层析(二氯甲烷-甲醇梯度洗脱，40:1～1:1)分离，后结合mci-chp20p(甲醇-水，以甲醇为准，v/v，洗脱梯度为10％，25％，50％，75％，90％)纯化，在每一小段各得到一个化合物，分别为式s3-1(104mg，25％)、s3-2(118mg，50％)、s3-3(15mg，75％)。为鉴定上述提取方法中分离得到的22种化合物是哪种物质，对每种化合物做了相应的结构鉴定，谱图数据如下：环烯醚萜苷类化合物谱图数据:nuzhenide(s2-1-2)：1h-nmr(400mhz,methanol-d4)：δ5.94(1h,m,1-h),7.49(1h,m,3-h),3.94(2h,m,5-h),2.47(2h,ddd,j＝16.1,14.3,9.1hz,6-h2),6.09(1h,qd,j＝7.1,1.7hz,8-h),1.74(3h,m,10-h3),3.69(4h,m,11-ome),4.80(4h,dd,j＝7.8,3.9hz,1′-h),3.52–3.27(7h,m,2′,3′,4′,5′-h,3″,4″,5″-h),3.69(4h,m,7″′-ha,6′-ha),3.71(h,m,6′-hb),4.31(2h,m,1″-h),3.20(2h,m,2″-h),4.21(1h,dd,j＝11.9,5.8hz,6″-ha),4.31(h,m,26″-hb),7.06(2h,dq,j＝9.4,3.1hz,2″′,6″′-h),6.69(2h,m,3″′,5″′-h),3.94(2h,m,7″′-hb),2.80(3h,m,8″′-h2)。13c-nmr(400mhz,methanol-d4),δ95.1(c-1),155.2(c-3),109.4(c-4),31.8(c-5),41.3(c-6),173.0(c-7),124.9(c-8),130.5(c-9),13.7(c-10),168.7(c-11),52.0(ome),100.8(c-1′),74.7(c-2′),77.9(c-3′),71.6(c-4′),78.4(c-5′),62.7(c-6′),104.4(c-1″),75(c-2″),77.9(c-3″),71.5(c-4″),75.1(c-5″),65(c-6″),130.8(c-1″′),130.9(c-2″′),116.1(c-3″′),156.8(c-4″′),116.1(c-5″′),130.9(c-6″′),72.2(c-7″′),36.4(c-8″′)。isooleonuezhenide(s2-2-2)：1h-nmr(400mhz,methanol-d4)：δh5.92(2h,t,j＝1.7hz,1-h),7.52(2h,s,3-h),7.50(s,3-h),3.95(6h,m,5-h),3.98(m,5-h),2.80(2h,m,6-ha),2.49(2h,dd,j＝14.3,8.8hz,6-hb),6.09(2h,qd,j＝7.2,1.4hz,8-h),1.73(6h,m,10-h3),3.69(5h,m,11-ome),4.87(d,j＝7.5hz,1′-h),3.52–3.24(13h,m,2′,3′,4′,5′-h),4.32(4h,m,6′-h),4.32(4h,m,1″-h),3.52–3.24(13h,m,2″,3″,4″,5″-h),4.32(4h,m,6″-h),4.32(4h,m,1″′-h),3.52–3.24(13h,m,2″′,3″′,4″′,5″′-h),4.32(4h,m,6″′-h),7.05(2h,m,2″″,6″″-h),6.68(2h,m,3″″,5″″-h),3.69(5h,s,7″″-ha),3.95(6h,m,7″″-hb),2.80(4h,m,8″″-h2)。13c-nmr(400mhz,meod),δ95.1(c-1),156.8(c-3),109.4(c-4),31.7(c-5),41.3(c-6),173.0(c-7),124.9(c-8),130.7(c-9),13.7(c-10),168.7(c-11),51.9(ome),100.8(c-1′),74.9(c-2′),77.9(c-3′),71.6(c-4′),74.7(c-5′),65.0(c-6′),104.4(c-1″),75(c-2″),77.9(c-3″),71.5(c-4″),77.9(c-5″),62.7(c-6″),104.4(c-1″′),74.7(c-2″′),77.9(c-3″′),71.6(c-4″′),75.1(c-5″′),65.0(c-6″′),130.9(c-1″″),129.9(c-2″″),116.1(c-3″″),155.2(c-4″″),116.1(c-5″″),129.9(c-6″″),72.2(c-7″″),36.4(c-8″″)。jaspolyoleosideb(s2-4-1)：1hnmr(400mhz,methanol-d4)：parta：δh5.92(1h,d,j＝1.6hz,1-h),7.55(2h,m,3-h),3.95(2h,m,5-h),2.48(1h,ddt,j＝16.2,14.1,6.3hz,6-ha),2.80(1h,m,6-hb),6.04(2h,t,j＝1.7hz,8-h),1.74(9h,m,10-h3),3.70(9h,m,11-ome),4.83(3h,dd,j＝7.7,2.2hz,1′-h),3.50–3.26(10h,m,2′,3′,4′,5′-h),3.70(9h,m,6′-ha),3.84(1h,m,6′-hb),7.30(2h,m,2″,6″-h),7.03(2h,m,3″,5″-h),,4.12(1h,dd,j＝9.1,4.6hz,7″-ha),4.23(1h,ddd,j＝11.9,5.8,3.7hz,7″-hb)，2.96(2h,m,8″-h2)；partb：δh5.93(1h,s,1-h),7.55(2h,m,3-h),4.23(1h,m,5-h),2.80(3h,m,6-ha),2.96(1h,m,6-hb),6.17(1h,m,8-h),1.74(9h,m,10-h3),3.70(9h,m,11-ome),4.83(3h,dd,j＝7.7,2.2hz,1′-h),3.50–3.26(10h,m,2′,3′,4′-h),3.54(ddd,j＝9.5,6.0hz,2.0,5′-h),4.02(2h,m,6′-ha),4.23(2h,m,6′-hb)；partc：δh5.71(1h,m,1-h),7.55(2h,m,3-h),3.95(2h,m,5-h),2.48(1h,ddt,j＝16.2,14.1,6.3hz,6-ha),2.80(1h,m,6-hb),6.04(2h,t,j＝1.7hz,8-h),1.74(9h,m,10-h3),3.70(9h,m,11-ome),4.83(3h,dd,j＝7.7,2.2hz,1′-h),3.50–3.26(10h,m,2′,3′,4′,5′-h),3.70(9h,m,6′-ha),3.84(1h,m,6′-hb)。13c-nmr(400mhz,meod),parta:δ95.1(c-1),155.2(c-3),109.2(c-4),31.7(c-5),41.0(c-6),173.6(c-7),125.0(c-8),130.3(c-9),13.6(c-10),168.7(c-11),52.1(ome),100.8(c-1′),74.6(c-2′),77.8(c-3′),71.4(c-4′),78.3(c-5′),62.6(c-6′),137.9(c-1″),131.0(c-2″),122.4(c-3″),150.4(c-4″),122.4(c-5″),131.0(c-6″),65.0(c-7″),36.3(c-8″)；partb:δ95.3(c-1),155.3(c-3),109.2(c-4),31.8(c-5),41.3(c-6),171.7(c-7),125.2(c-8),130.6(c-9),13.8(c-10),168.7(c-11),52.1(ome),100.4(c-1′),74.6(c-2′),77.8(c-3′),71.6(c-4′),75.0(c-5′),65.0(c-6′)；partc:δ95.1(c-1),155.2(c-3),109.3(c-4),31.8(c-5),41.2(c-6),173.1(c-7),125.2(c-8),130.3(c-9),13.9(c-10),168.7(c-11),52.3(ome),100.4(c-1′),74.9(c-2′),77.8(c-3′),71.6(c-4′),78.3(c-5′),62.6(c-6′)。safghanosidea(s2-2-3)：1h-nmr(400mhz,methanol-d4)：δ5.94(3h,dt,j＝18.9,1.7hz,1-h),7.55(1h,m,3-h),4.00(4h,m,5-h),2.51(3h,ddd,j＝17.4,14.3,9.2hz,6-ha),2.74(3h,tt,j＝9.2,5.7hz,6-hb),6.08(3h,m,8-h),1.73(8h,m,10-h3),3.69(7h,s,11-ome),4.82(3h,m,1′-h),3.42–3.30(13h,m,2′,3′,4′,5′,2″,3″,4″,5″-h),3.69(7,m,6′-ha),3.90(4h,m,6′-hb),5.94(3h,dt,j＝18.9,1.7hz,1″-h),3.62(h,m,6″-hb),7.84(1h,dq,j＝9.4hz,3″′-h),7.41-7.63(5h,m,5″′,9″′-h)。13c-nmr(400mhz,meod),δ95.1(c-1),155.2(c-3),109.4(c-4),31.8(c-5),41.3(c-6),173.0(c-7),124.9(c-8),130.5(c-9),13.6(c-10),168.7(c-11),52.0(ome),100.8(c-1′),74.7(c-2′),77.9(c-3′),71.5(c-4′),77.7(c-5′),62.7(c-6′),95.6(c-1″),75(c-2″),78.4(c-3″),71.6(c-4″),75.1(c-5″),65.0(c-6″),169.9(c-1″′),116.4(c-2″′),147.5(c-3″′),135.8(c-4″′),130.7(c-5″′),130.9(c-6″′),131.1(c-7″′),130.9(c-8″′),130.7(c-9″′)。excelsideb(s2-4-2)：1h-nmr(400mhz,methanol-d4):δh5.94(1h,m,1-h),7.49(1h,m,3-h),3.94(2h,m,5-h),2.47(2h,ddd,j＝16.1,14.3,9.1hz,6-h2),6.09(1h,qd,j＝7.1,1.7hz,8-h),1.74(3h,m,10-h3),3.69(4h,m,11-ome),4.80(4h,dd,j＝7.8,3.9hz,1′-h),3.52–3.27(7h,m,2′,3′,4′,5′-h,3″,4″,5″-h),3.69(4h,m,7″′-ha,6′-ha),4.12(h,m,6′-hb),4.31(2h,m,1″-h),3.20(2h,m,2″-h),3.82(1h,dd,j＝11.9,5.8hz,6″-ha),3.62(h,m,6″-hb),7.06(2h,dq,j＝9.4,3.1hz,2″′,6″′-h),6.69(2h,m,3″′,5″′-h),3.94(2h,m,7″′-hb),2.80(3h,m,8″′-h2)。13c-nmr(400mhz,meod),δ95.1(c-1),155.2(c-3),109.4(c-4),31.7(c-5),41.3(c-6),173.0(c-7),124.9(c-8),130.5(c-9),13.7(c-10),168.7(c-11),52.0(ome),100.8(c-1′),78.1(c-2′),77.9(c-3′),71.6(c-4′),74.7(c-5′),69.9(c-6′),104.4(c-1″),75.1(c-2″),78.4(c-3″),71.5(c-4″),77.9(c-5″),62.7(c-6″),130.7(c-1″′),130.9(c-2″′),116.1(c-3″′),156.7(c-4″′),116.1(c-5″′),130.9(c-6″′),72.2(c-7″′),36.4(c-8″′)。lucidumosidea(s3-1):1h-nmr(400mhz,methanol-d4)：δh5.42(1h,m,1-h),7.48(1h,m,3-h),3.27(2h,m,5-h),2.47(1h,dd,j＝9.0,13.2hz,6-ha),2.65(1h,dd,j＝3.1,13.2hz,6-ha),1.75(1h,m,8-ha),1.60(1h,m,8-hb),2.10(1h,m,9-h),1.17(3h,m,10-h3),3.69(3h,m,11-ome),4.69(1h,d,j＝7.8hz,1′-h),3.52–3.27(7h,m,2′,3′,4′,5′-h,),7.06(2h,dq,j＝9.4,3.1hz,2″,6″-h),6.72(2h,m,3″,5″-h),4.18(2h,m,7″-h),2.83(2h,m,8″-h2)。13c-nmr(400mhz,meod),δ95.1(c-1),155.2(c-3),109.4(c-4),31.8(c-5),36.4(c-6),173.0(c-7),35.1(c-8),37.2(c-9),13.7(c-10),168.7(c-11),51.9(ome),100.8(c-1′),74.7(c-2′),77.9(c-3′),71.5(c-4′),78.4(c-5′),62.7(c-6′),130.0(c-1″′),130.9(c-2″′),116.4(c-3″′),156.8(c-4″′),116.1(c-5″′),130.9(c-6″′),65.0(c-7″′),35.4(c-8″′)。safghanosideg(s3-2):1h-nmr(400mhz,methanol-d4)：parta：δh5.92(2h,q,j＝1.7hz,1-h),7.52(2h,d,j＝2.7hz,3-h),3.99(2h,m,5-h),2.48(2h,m,6-ha),2.77(4h,m,6-hb),6.06(2h,m,8-h),1.74(8h,m,10-h3),4.82(3h,m,1′-h),3.52–3.31(8h,m,2′,3′,4′,5′-h),3.70(12h,m,6′-ha),3.85(3h,m,6′-hb),7.01(3h,m,2″,6″-h),6.70(2h,m,3″,5″-h),4.08(m,2h),7″-ha),4.31(2h,m,7″-hb),2.77(4h,m,8″-h2),partb：δh5.92(2h,q,j＝1.7hz,1-h),7.52(2h,d,j＝2.7hz,3-h),3.99(2h,m,5-h),2.77(4h,m,6-ha),2.96(m,3h,6-hb),6.15(2h,m,8-h),1.74(8h,m,10-h3),3.70(3h,m,11-ome),4.82(3h,m,1′-h),3.31(8h,m,2′,3′,4′,5′-h),3.70(12h,m,6′-ha),3.85(3h,m,6′-hb),7.28(2h,m,2″,6″-h),7.01(2h,m,3″,5″-h),4.31(2h,m,7″-h),4.31(2h,m,7″-hb),2.96(3h,m,8″-h2)。13c-nmr(400mhz,meod),parta:δ95.1(c-1),155.3(c-3),109.4(c-4),31.8(c-5),41.2(c-6),173.5(c-7),124.9(c-8),130.4(c-9),13.6(c-10),168.6(c-11),101.0(c-1′),74.7(c-2′),77.9(c-3′),71.5(c-4′),78.4(c-5′),62.7(c-6′),130.0(c-1″),131.0(c-2″),116.3(c-3″),156.8(c-4″),116.3(c-5″),130.9(c-6″),65.0(c-7″),36.4(c-8″)；partb:δ95.3(c-1),155.2(c-3),109.3(c-4),31.8(c-5),41.1(c-6),171.7(c-7),125.1(c-8),130.6(c-9),13.9(c-10),168.7(c-11),52.0(ome),100.8(c-1′),74.9(c-2′),77.9(c-3′),71.6(c-4′),78.4(c-5′),62.7(c-6′),137.9(c-1″),131.0(c-2″),122.5(c-3″),150.5(c-4″),122.5(c-5″),130.9(c-6″),65.0(c-7″),36.6(c-8″)。oleopolynuzhenidea(s3-3)：1hnmr(400mhz,methanol-d4)：parta：δh5.92(2h,q,j＝1.5hz,1-h),7.54(2h,m,3-h),3.97(2h,m,5-h),2.45(2h,m,6-ha),2.75(4h,m,6-hb),6.11(3h,m,8-h),1.75(4h,ddd,j＝8.8,7.1,1.5hz,10-h3),3.70(9h,m,11-ome),4.82(2h,dd,j＝10.1,7.7hz,1′-h),3.42–3.24(6h,m,2′,3′,4′,5′-h),3.70(9h,m,6′-ha),3.82(1h,d,j＝1.4hz,6′-hb),7.29(1h,m,2″,6″-h),7.05(2h,t,j＝8.1hz,3″,5″-h),3.70(9h,m,7″-ha),3.97(2h,m,7″-hb),2.95(2h,m,8″-h2),4.82(2h,dd,j＝10.1,7.7hz,1″′-h),4.19(m,2h,2″′-h),3.42-03.24(6h,m,3″′,4″′,5″′-h),3.70(9h,m,6″′-ha),3.82(1h,d,j＝1.4hz,6″′-hb)；partb：δh5.92(2h,q,j＝1.5hz,1-h),7.54(2h,m,3-h),4.19(2h,m,5-h),2.75(4h,m,6-ha),2.95(2h,m,6-hb),6.11(3h,m,8-h),1.75(4h,ddd,j＝8.8,7.1,1.5hz,10-h3),3.70(9h,m,11-ome),4.82(2h,dd,j＝10.1,7.7hz,1′-h),3.42–3.24(6h,m,2′,3′,4′,5′-h),3.70(9h,m,6′-ha),3.82(1h,d,j＝1.4hz,6′-hb)；partc：δh5.92(2h,q,j＝1.5hz,1-h),7.54(2h,m,3-h),3.97(2h,m,5-h),2.45(2h,m,6-ha),2.75(4h,m,6-hb),6.11(3h,m,8-h),1.75(4h,ddd,j＝8.8,7.1,1.5hz,10-h3),3.70(9h,m,11-ome),4.82(2h,dd,j＝10.1,7.7hz,1′-h),3.42–3.24(6h,m,2′,3′,4′,5′-h),3.70(9h,m,6′-ha),3.82(1h,d,j＝1.4hz,6′-hb)。13c-nmr(400mhz,meod),parta:δ95.1(c-1),155.3(c-3),109.4(c-4),31.8(c-5),41.2(c-6),173.6(c-7),125.1(c-8),130.6(c-9),13.8(c-10),168.7(c-11),52.2(ome),101.0(c-1′),74.8(c-2′),78.4(c-3′),71.5(c-4′),77.9(c-5′),62.7(c-6′),137.2(c-1″),131.1(c-2″),122.7(c-3″),150.8(c-4″),122.7(c-5″),131.1(c-6″),71.5(c-7″),35.3(c-8″),101.1(c-1″′),74.8(c-2″′),75.6(c-3″′),71.4(c-4″′),75.0(c-5″′),62.6(c-6″′)；partb:δ95.1(c-1),155.1(c-3),109.3(c-4),31.8(c-5),41.2(c-6),171.6(c-7),124.9(c-8),130.5(c-9),13.5(c-10),168.6(c-11),52.0(ome),100.9(c-1′),74.8(c-2′),78.4(c-3′),71.4(c-4′),77.9(c-5′),62.7(c-6′)；partc:δ95.3(c-1),155.1(c-3),109.3(c-4),31.8(c-5),41.0(c-6),173.2(c-7),124.8(c-8),130.3(c-9),13.6(c-10),168.7(c-11),51.9(ome),100.8(c-1′),74.8(c-2′),78.4(c-3′),71.4(c-4′),77.9(c-5′),62.8(c-6′)。gi-3(s2-2-4-1)：1h-nmr(400mhz,methanol-d4)：parta：δh5.94(brs,1-h),7.58(s,3-h),4.01(m,5-h),2.47(dd,j＝14.7,9.0hz,6-ha),2.73(m,6-hb),6.05(brq,j＝7.1hz,8-h),1.75(dd,j＝7.3,1.5hz,10-h3),3.76(s,11-ome),4.83(d,j＝8.1hz,1′-h),3.25-3.43(m,2′,3′,4′,5′-h),3.68(m,6′-ha),3.88(brd,j＝12.0hz,6′-hb),7.29(d,j＝8.5hz,2″,6″-h),6.99(d,j＝8.5hz,3″,5″-h),3.80(m,7″-ha),4.03(dt,j＝10.0,7.3hz,7″-hb),2.94(t,j＝7.3hz,8″-h2),4.31(d,j＝7.8hz,1″′-h),3.19(brt,j＝8.3hz,2″′-h),3.42(t,j＝9.5hz3″′-h),3.25-3.43(4″′-h),3.42(m,5″′-h),4.21(dd,j＝12.0,5.6hz,6″′-ha),4.34(dd,j＝12.0,2.0hz,6″′-hb)；partb：δh6.04(brs,1-h),7.52(s,3-h),4.11(dd,j＝9.3,4.4hz,5-h),2.73(dd,j＝14.6,9.3hz6-ha),2.96(dd,j＝14.6,4.4hz,6-hb),6.18(brq,j＝7.1hz,8-h),1.76(dd,j＝7.3,1.5hz,10-h3),3.68(s,11-ome),4.83(d,j＝7.6hz,1′-h),3.25-3.43(m,2′,3′,4′,5′-h),3.66(m,6′-ha),3.81(m6′-hb)。13c-nmr(400mhz,meod),parta:δ95.1(c-1),155.3(c-3),109.3(c-4),31.7(c-5),41.3(c-6),173.6(c-7),125.0(c-8),130.7(c-9),13.9(c-10),168.7(c-11),52.0(ome),100.9(c-1′),74.9(c-2′),78.3(c-3′),71.6(c-4′),77.8(c-5′),62.6(c-6′),137.9(c-1″),130.9(c-2″),122.4(c-3″),150.4(c-4″),122.4(c-5″),131.0(c-6″),71.4(c-7″),36.5(c-8″),104.3(c-1″′),75.0(c-2″′),77.8(c-3″′),71.3(c-4″′),75.0(c-5″′),65.0(c-6″′)；partb:δ95.3(c-1),155.2(c-3),109.3(c-4),31.8(c-5),41.1(c-6),171.7(c-7),125.2(c-8),130.4(c-9),13.8(c-10),168.7(c-11),52.1(ome),100.8(c-1′),74.7(c-2′),78.3(c-3′),71.5(c-4′),77.8(c-5′),62.6(c-6′)。jaspolyanoside(e2-4)：1h-nmr(400mhz,methanol-d4):parta:δh5.92(1h,q,j＝1.6hz,1-h),7.51(2h,m,3-h),3.88(4h,m,5-h),2.22(1h,m,6-ha),2.75(1h,m,6-hb),6.08(2h,dtd,j＝18.6,7.6,6.2hz,8-h),1.64(3h,m,10-h3),3.68(13h,m,11-ome),4.80(2h,dd,j＝7.8,3.3hz,1′-h),3.48–3.10(12h,m,2′,3′,4′,5′-h),4.28(3h,m,6′-h2),7.05(4h,m,2″,6″-h),6.70(4h,m,3″,5″-h),4.02(3h,m,7″-ha),4.28(3h,m,7″-hb),2.75(m,1h,8″-h2)；partb:δh5.99(1h,t,j＝1.7hz,1-h),7.51(2h,m,3-h),4.02(3h,m,5-h),2.22(1h,m,6-ha),2.75(1h,m,6-hb),6.08(2h,dtd,j＝18.6,7.6,6.2hz,8-h),1.64(3h,m,10-h3),3.68(13h,m,11-ome),4.80(2h,dd,j＝7.8,3.3hz,1′-h),3.48–3.10(12h,m,2′,3′,4′,5′-h),3.68(3h,m,16′-ha),3.88(4h,m,6′-hb)。13c-nmr(400mhz,meod),parta:δ95.4(c-1),155.2(c-3),109.3(c-4),31.8(c-5),41.0(c-6),173.6(c-7),124.9(c-8),130.7(c-9),13.8(c-10),168.6(c-11),51.9(ome),100.8(c-1′),74.7(c-2′),77.9(c-3′),71.4(c-4′),75.1(c-5′),64.3(c-6′),130.4(c-1″),130.9(c-2″),116.1(c-3″),156.7(c-4″),116.1(c-5″),156.7(c-6″),72.2(c-7″),36.3(c-8″)；partb:δ95.1(c-1),155.2(c-3),109.3(c-4),31.8(c-5),41.0(c-6),173.6(c-7),124.9(c-8),130.4(c-9),13.5(c-10),168.6(c-11),52.2(ome),100.8(c-1′),74.7(c-2′),78.0(c-3′),71.6(c-4′),78.4(c-5′),62.8(c-6′)。(8e)-ligstroside(e-5-1)：1h-nmr(400mhz,methanol-d4):δh5.93(1h,d,j＝1.9hz,1-h),7.52(1h,s,3-h),3.72(4h,m,5-h),2.71(1h,dd,j＝14.1,4.5hz,6-ha),2.83(2h,t,j＝6.9hz,6-hb),6.09(1h,q,j＝7.0hz,8-h),1.65(3h,d,j＝6.9hz,10-h3),3.72(4h,m,11-ome),4.82(1h,dd,j＝7.8,1.2hz,1′-h),3.19(dd,j＝8.8,7.8hz,2′-h),3.40–3.31(3h,m,3′,4′,5′-h),3.72(4h,m,6′-ha),3.90(1h,d,j＝11.9hz,6′-hb),7.06(2h,m,2″,6″-h),6.73(2h,m,3″,5″-h),4.24(2h,m,7″-h2),2.83(2h,t,j＝6.9hz,8″-h2)。13c-nmr(400mhz,meod),parta:δ95.2(c-1),155.1(c-3),109.4(c-4),31.8(c-5),41.2(c-6),173.2(c-7),124.9(c-8),130.0(c-9),13.5(c-10),168.6(c-11),51.9(ome),100.8(c-1′),74.7(c-2′),77.9(c-3′),71.5(c-4′),78.4(c-5′),62.7(c-6′),130.4(c-1″),131.0(c-2″),116.3(c-3″),157.0(c-4″),116.3(c-5″),131.0(c-6″),66.9(c-7″),35.1(c-8″)。nicotiflorine(ea-6-3)：1h-nmr(600mhz,dmso-d6):δh6.03(1h,brs,1-h),7.57(1h,s,3-h),4.11(1h,dd,j＝9.5,4.5hz,5-h),2.73(1h,dd,j＝15.0,9.5hz,6-ha),2.96(1h,dd,j＝15.0,4.5hz,6-hb),6.18(1h,dq,j＝7.0,1.2hz,8-h),1.76(1h,dd,j＝7.0,1.5hz,10-h3),3.73(3h,s,11-ome),4.80(1h,d,j＝8.0hz,1′-h),3.41(1h,t,j＝9.0hz,3′-h),3.63(1h,dd,j＝12.0,5.5hz,6′-ha),3.82(1h,dd,j＝12.0,1.2hz,6′-hb),4.30(1h,d,j＝8.0hz,1″-h),3.66(1h,dd,j＝12.0,5.5hz,6″-ha),3.86(1h,dd,j＝12.0,1.8hz,6″-hb),7.30(2h,d,j＝8.5hz,2″′,6″′-h),6.99(2h,d,j＝8.5hz,3″′,5″′-h),3.77(1h,dt,j＝10.0,7.0hz,7″′-ha),4.10(1h,dt,j＝10.0,7.0hz,7″′-hb),2.94(2h,t,j＝7.0hz,8″′-h2)。13c-nmr(600mhz,dmso-d6):93.0(c-1),153.5(c-3),107.5(c-4),30.2(c-5),40.1(c-6),170.7(c-7),123.2(c-8),129.1(c-9),12.9(c-10),166.3(c-11),51.3(c-ome),99.2(c-1'),73.3(c-2'),76.5(c-3'),69.9(c-4'),77.3(c-5'),61.1(c-6'),102.5(c-1″),73.3(c-2″),76.4(c-3″),70.0(c-4″),76.5(c-5″),60.8(c-6″),135.6(c-1″′),129.2(c-2″′),121.6(c-3″′),148.9(c-4″′),121.6(c-5″′),129.2(c-6″′),70.0(c-7″′),33.6(c-8″′)。oleuricinea(ea-6-7)：1h-nmr(600mhz,dmso-d6):δh5.85(1h,s,1-h),7.50(s,3-h),3.85(1h,dd,j＝8.0,4.0hz,5-h),2.37(1h,m,6-ha),2.75(1h,m,6-hb),5.94(1h,m,8-h),1.66(5h,d,j＝6.0hz,10-h3),3.60(3h,s,11-ome),4.63(1h,d,j＝8.0hz,1′-h),2.97-3.35(8h,m,2′,3′,4′,5′-h,3″,4″,5″-h),3.56(1h,m,6′-h),4.19(1h,d,j＝7.6hz,1″-h),3.35(1h,m2″-h),4.20(1h,m,6″-h),6.44(2h,d,j＝8.0hz,2″′,6″′-h),6.59(2h,d,j＝8.0hz,3″′,5″′-h),4.25(2h,m7″′-ha),4.01(1h,m7″′-hb),2.64(1h,m,8″′-h2)。13c-nmr(600mhz,dmso-d6):92.8(c-1),153.4(c-3),107.7(c-4),30.0(c-5),40.1(c-6),170.6(c-7),123.4(c-8),129.2(c-9),13.1(c-10),166.2(c-11),51.2(c-ome),98.9(c-1'),73.5(c-2'),76.4(c-3'),70.0(c-4'),73.2(c-5'),69.9(c-6'),102.8(c-1″),73.2(c-2″),76.5(c-3″),70.0(c-4″),77.3(c-5″),61.0(c-6″),128.6(c-1″′),115.0(c-2″′),129.7(c-3″′),155.6(c-4″′),129.7(c-5″′),115.0(c-6″′),64.1(c-7″′),34.8(c-8″′)。三萜类化合物谱图数据：sclerosteroidj(m-m-6-2)：1h-nmr(600mhz,dmso-d6):δh1.00-2.05(11h,m,1,2,4,5,6,7,11,12,15,16-h),0.57(1h,s,18-h),4.16(1h,d,j＝12.0hz,19-ha),4.35(1h,d,j＝12.0hz,19-hb),5.74(1h,ddd,j＝17.0,10.5,7.5hz,20-h),4.96(1h,brd,j＝17.0hz,21-ha),4.97(1h,brd,j＝10.5hz,21-hb),2.05(2h,s,oac-h),3.15/3.19(3h,s,ome-h)。13c-nmr(400mhz,dmso-d6):29.1(c-1),28.6(c-2),100.2(c-3),35.4(c-4),42.6(c-5),28.2(c-6),31.3(c-7),35.6(c-8),54.8(c-9),38.3(c-10),22.1(c-11),38.2(c12),43.3(c-13),56.0(c-14),24.5(c-15),27.7(c-16),55.4(c-17),13.26(c-18),62.7(c-19),139.4(c-20),115.0(c-21),20.8/173.7(c-oac),47.3/47.3(c-ome)。3β,28-dihydroxyoleana-11,13(18)-diene(m-1)：1h-nmr(151mhz,dmso-d6):δh1.89(1h,dt,j＝3.5,13.1hz,1-ha),1.03(1h,dt,j＝3.6,13.4hz,1-hb),1.74(1h,m,2-ha),1.22(1h,m,2-hb),3.24(1h,dd,j＝4.9,11.4hz,3-h),0.82(1h,m,5-h),1.63(1h,m,6-ha),1.45(1h,m,6-hb),1.30(1h,dd,j＝3.7,14.2hz,7-ha),1.37(1h,m,7-hb),1.94(1h,brs,9-h),5.59(1h,dd,j＝1.3,10.6hz,11-h),6.43(1h,dd,j＝3.0,10.6hz,12-h),1.75(1h,m,15-ha),1.02(1h,m,15-hb),1.81(1h,dt,j＝3.4,13.8hz,16-ha),1.39(1h,m,16-hb),2.43(1h,dd,j＝1.7,14.4hz,19-ha),1.66(1h,d,j＝14.4hz,19-hb),1.46(1h,m,21-ha),1.22(1h,m,21-hb),1.68(1h,m,22-ha),1.63(1h,m,22-hb),0.98(3h,s,23-h),0.78(3h,s,24-h),0.90(3h,s,25-h),0.73(3h,s,26-h),1.00(3h,s,27-h),3.62(1h,d,j＝11.2hz,28-ha),3.58(1h,d,j＝11.2hz,28-hb),0.80(3h,s,29-h),0.97(3h,s,30-h)。13c-nmr(400mhz,dmso-d6):37.6(c-1),32.4(c-2),79.3(c-3),38.7(c-4),54.8(c-5),18.0(c-6),32.4(c-7),36.5(c-8),53.7(c-9),40.1(c-10),127.1(c-11),125.2(c-12),138.4(c-13),41.8(c-14),24.4(c-15),30.3(c-16),39.3(c-17),135.1(c-18),37.6(c-19),32.8(c-20),35.0(c-21),27.0(c-22),27.3(c-23),15.2(c-24),17.5(c-25),16.4(c-26),19.4(c-27),65.3(c-28),23.6(c-29),32.2(c-30)。熊果酸(ursolicacid，m-3)：1h-nmr(400mhz,pyridine-d5):δh1.58(1h,m,1-ha),0.76(1h,s,1-hb),1.33(1h,m,2-h),3.20(1h,dd,j＝4.5,11.7hz,3-h),0.68(1h,d,j＝11.4hz,5-h),1.67(1h,m,j＝13.9,6.8hz,6-ha),1.47(1h,m,6-hb),1.21(1h,m,7-ha),1.47(1h,m,7-hb),1.47(1h,m,9-h),0.93(1h,m,11-h),5.40(1h,m,12-h),1.58(1h,m,15-ha),1.96(1h,dt,j＝13.4,4.9hz,15-hb),1.81(1h,dt,j＝7.2,13.6hz,16-ha),1.58(1h,m,16-hb),2.13(1h,d,j＝11.3hz,18-h),1.33(1h,m,19-h),0.98(1h,m,20-h),1.47(1h,m,21-ha),1.58(1h,m,21-hb),1.86(1h,dd,j＝7.3,12.6hz,22-h),0.93(3h,m,23-h),0.76(3h,s,24-h),0.73(3h,s,25-h),0.87(3h,s,26-h),1.04(3h,s,27-h),0.90(3h,d,j＝6.0hz,29-h),0.81(3h,d,j＝6.4hz,30-h)。13c-nmr(400mhz,pyridine-d5):40.1(c-1),22.9(c-2),76.8(c-3),41.3(c-4),52.4(c-5),18.0(c-6),33.3(c-7),40.8(c-8),47.0(c-9),36.6(c-10),23.3(c-11),121.6(c-12),138.5(c-13),41.7(c-14),28.3(c-15),22.9(c-16),47.1(c-17),54.8(c-18),31.2(c-19),28.3(c-20),28.3(c-21),36.9(c-22),23.7(c-23),17.1(c-24),17.0(c-25),15.3(c-26),24.8(c-27),178.7(c-28),21.3(c-29),23.0(c-30)。香豆素类化合物谱图数据：秦皮醇(fraxinol，m-6-2-1)：1h-nmr(600mhz,dmso-d6):δh6.23(1h,d,j＝9.66hz,3-h),7.95(1h,d,j＝9.66hz,4-h),6.84(1h,s,8-h),9.02(brs,6-oh),3.85,3.82(9h,s,5-ome,7-ome)。13c-nmr(400mhz,dmso-d6):160.6(c-2),112.1(c-3),139.4(c-4),142.9(c-5),135.7(c-6),153.0(c-7),95.5(c-8),147.8(c-9),106.8(c-10),61.2(c-11),56.5(c-12)。茴香内酯(pimpinellin，m-6-2-2)：1h-nmr(600mhz,dmso-d6):δh6.36(1h,d,j＝9.8hz,3-h),8.07(1h,d,j＝9.8hz,4-h),4.03(3h,s,5-ome),4.14(3h,s,6-ome),7.65(2h,d,j＝2.2hz,2′-h),7.07(2h,d,j＝2.2hz,3′-h)。13c-nmr(400mhz,dmso-d6):159.8(c-2),114.7(c-3),140.3(c-4),142.2(c-5),135.4(c-6),149.7(c-7),114.7(c-8),144.5(c-2′),144.5(c-8a),109.1(c-4a),105.0(c-3′),63.1(c-6-ome),61.1(c-5-ome)。木质素类化合物谱图数据：(+)-8-hydroxypinoresinol(m-2)：1h-nmr(400mhz,dmso-d6):δ7.05(1h,d,j＝2.1hz,2-h),6.78(1h,d,j＝2.8hz,5-h),6.85(1h,dd,j＝2.1,2.1hz,6-h),4.67(1h,s,7-h),4.03(1h,d,j＝9.3hz,9-ha),3.85(1h,d,j＝5.9hz,9-hb),3.86(3h,s,3-ome,3′-ome),7.05(1h,d,j＝2.7hz,2′-h),6.79(1h,d,j＝2.7hz,5′-h),6.87(1h,dd,j＝2.0,2.0hz,6′-h),4.84(1h,s,7′-h),3.04(1h,s,8′-h),4.46(1h,dd,j＝8.6,8.7hz,9′-ha),3.76(1h,dd,j＝6.2,8.7hz,9′-hb)。13c-nmr(400mhz,dmso-d6):129.1(c-1),112.7(c-2),149.1(c-3),147.4(c-4),116.1(c-5),121.6(c-6),89.3(c-7),92.8(c-8),76.1(c-9),56.4(c-3-ome),133.6(c-1′),111.3(c-2′),148.7(c-3′),147.5(c-4′),115.7(c-5′),120.5(c-6′),87.8(c-7′),62.4(c-8′),72.0(c-9′),56.4(c-3′-ome)。脂肪酸内脂类化合物谱图数据：al072(m-6-89)：1h-nmr(400mhz,methanol-d4):δh0.86(1h,m,1-h),0.91(1h,m,2-h),0.87(1h,m,3-h),0.88(1h,m,4-ha),1.32(1h,m,4-hb),1.65(1h,t,j＝7.0hz,7-h),2.80(1h,t,j＝6.3hz,8-h),1.27(1h,m11-ha),2.08(1h,dd,j＝6.8,13.6hz,11-hb),1.54(1h,m,13-h),2.37(1h,t,j＝7.5hz,28-h),1.29(1h,m,30-h),1.10(1h,m,31-ha),1.29(1h,m,31-hb),1.17(1h,m,32-h),3.62(1h,dd,j＝6.1,11.8hz33-ha),3.72(1h,dd,j＝3.7,11.8hz33-hb),4.16(1h,m,j＝6.4,5.4hz34-h),3.96(1h,ddd,j＝6.1,3.7,6.4hz35-ha),5.35(1h,m36-ha),5.39(1h,m38-ha)。13c-nmr(400mhz,meod):14.0(c-1),14.4(c-2),19.6(c-33),23.6(c-4),23.7(c-5),25.6(c-6),25.9(c-7),26.0(c-8),27.7(c-9),27.8(c-10),27.9(c-11),28.1(c-12),28.1(c-13),29.6(c-14),29.7(c-15),29.8(c-16),29.9(c-17),30.2(c-18),30.2(c-19),30.3(c-20),30.3(c-21),30.3(c-22),30.4(c-23),30.5(c-24),30.6(c-25),30.7(c-26),32.7(c-27),34.8(c-28),34.9(c-29),35.1(c-30),37.3(c-31),39.7(c-32),64.1(c-33),65.4(c-34),71.1(c-35),129.0(c-36),129.1(c-37),130.7(c-38),130.8(c-39),175.3(c-40),175.5(c-41)。其他类化合物谱图数据：d-aromadendrane-4β,10α-diol(m-6-3)：1h-nmr(400mhz,pyridine-d5):δh2.05(1h,m,1-h),1.42-1.90(5h,m2,3,8,9-h),1.25(1h,t,j＝9.5hz,5-h),0.38(1h,t,j＝9.50hz,6-h),056(1h,m,7-h),0.98(1h,s,12-h),1.01(1h,s,13-h),1.17(1h,s,14-h),1.08(1h,s,15-h),3.41(1h,brs,-oh)。13c-nmr(400mhz,pyridine-d5):δ53.9(c-1),25.3(c-2),37.3(c-3),79.7(c-4),48.9(c-5),26.0(c-6),29.7(c-7),19.9(c-8),38.6(c-9),74.2(c-10),18.9(c-11),29.1(c-12),17.0(c-13),25.3(c-14),29.9(c-15)。酪醇(tyrosol，e2-1)：1h-nmr(400mhz,methanol-d4)δh7.31(d,j＝8.3hz,h-4,8),7.16(d,j＝8.4hz,h-5,7),4.08(t,j＝7.0hz,h-1),3.02(t,j＝7.0hz,h-2)。13c-nmr(400mhz,meod):64.0(c-1),39.2(c-2),130.6(c-3),130.7(c-4),116.0(c-5),156.5(c-6),116.0(c-7),130.8(c-8)。上述数据表明这22种化合物为：nuzhenide、isooleonuezhenide、jaspolyoleosideb、safghanosidea、excelsideb、lucidumosidea、safghanosideg、oleopolynuzhenidea、gi-3、jaspolyanoside、(8e)-ligstroside、nicotiflorine、oleuricinea、sclerosteroidj、3β,28-dihydroxyoleana-11,13(18)-diene、熊果酸、秦皮醇、茴香内酯、(+)-8-hydroxypinoresinol、al072、d-aromadendrane-4β,10α-diol、酪醇。其中，22种化合物的结构式如下：实施例2为探索本发明提取分离的水曲柳种子中22种化合物的作用，做如下实验：1、酪氨酸酶抑制活性测定方法：将50μl浓度为1mg/ml的各化合物样品溶液与80μlpbs溶液(ph＝6.8)和50μl酪氨酸酶溶液(120units/ml)加入96孔板中，最后向每个孔中加入20μl底物(l-酪氨酸)触发反应。96孔板在37℃下继续孵育30min，然后用酶标仪测定各孔在475nm处的吸光度值。表1各组实验条件组别反应体系空白组80μlpbs、50μl溶剂、50μl酶+20μl底物背景组130μlpbs、50μl溶剂+20μl底物实验组80μlpbs、50μl酶、50μl样品+20μl底物背景组130μlpbs、50μl样品+20μl底物溶剂：为溶解样品的溶剂(甲醇或dmso)抑制率％＝[1-(c-d)/(a-b)]×100结果如表2：表2酪氨酸酶抑制活性皮肤白不白，主要取决于黑色素细胞合成黑色素的能力，酪氨酸酶具有独特的双重催化功能，是生物体内黑色素合成的关键酶，与人的衰老有密切关系。酪氨酸酶抑制剂可以治疗目前常见的色素沉着性皮肤病如雀斑、黄褐斑、老年斑，主要是通过抑制酪氨酸酶的活性而达到抑制黑色素合成，进而发挥美白的作用。从表2酶活性实验结果来看，化合物m-6-2-1、m-6-89、s3-1、m-m-6-2、m-3、s2-1-2有良好的酪氨酸酶抑制活性，水曲柳种子中化合物在皮肤增白方面具有一定的应用价值。2、乙酰胆碱酯酶抑制活性测定方法：将实施例1各提取物溶于dmso配成浓度为1.0mg/ml的溶液，在96孔板中，1、2、3列24孔中均加入140μl0.1mol/l磷酸缓冲液(ph为7.4)、20μl待测样品和20μl乙酰胆碱酯酶，作为样品组；4、5、6列24孔中均加入160μl0.1mol/l磷酸缓冲液(ph为7.4)和20μl待测样品，作为控制组；7、8、9列3孔中均加入160μl0.1mol/l磷酸缓冲液(ph为7.4)和20μl乙酰胆碱酯酶，作为空白组；在4℃下培养20min后，每孔加入10μl15mmacti和10μl2mmdtnb，再在37℃下培养20min后，用酶标仪测定在412nm波长处的吸光值大小。用石杉碱甲作为阳性对照。抑制率％＝[1-(od样品-od控制)/od空白]×100％，结果如表3：表3乙酰胆碱酯酶抑制活性编号抑制率％ic50(μg/ml)m-6-2-1107.52465.01±0.01m-6-89116.62428.73±0.01s3-144.971111.77±0.01m-m-6-261.17817.41±0.01m-6-2-2109.83455.24±0.01m-385.66583.67±0.01ea-6-767.05745.72±0.01s2-1-242.061188.79±0.01s2-2-3122.02409.78±0.01乙酰胆碱酯酶，简称ache，是生物神经传导中的一种关键性酶，在胆碱能突触间，该酶能降解乙酰胆碱，终止神经递质对突触后膜的兴奋作用，保证神经信号在生物体内的正常传递。乙酰胆碱酯酶参与细胞的发育和成熟，能促进神经元发育和神经再生。从表3酶活性实验结果来看，化合物m-6-2-1、m-6-89、s3-1、m-m-6-2、m-6-2-2、m-3、ea-6-7、s2-1-2、s2-2-3有良好的乙酰胆碱酯酶抑制活性，水曲柳种子中化合物在益智健脑方面具有一定的应用价值。3、α-葡萄糖苷酶抑制活性测定方法：将实施例1提取物溶于dmso配成浓度为1.0mg/ml的溶液，在96孔板中，1、2、3列24孔中均加入20μl0.1mol/l磷酸缓冲液(ph为6.8)、20μl待测样品和20μlα-葡萄糖苷酶，作为样品组；4、5、6列24孔中均加入40μl0.1mol/l磷酸缓冲液(ph为6.8)和20μl待测样品，作为控制组；7、8、9列3孔中均加入40μl0.1mol/l磷酸缓冲液(ph为6.8)和20μlα-葡萄糖苷酶作为空白组；在37℃下培养15min后，每孔加入20μl2.5mmol/lpnpg糖苷，再在37℃下培养15min后，每孔加入80μl0.2mol/lna2co3溶液终止反应。用酶标仪测定在405nm波长处的吸光值大小。用阿卡波糖作为阳性对照。抑制率％＝[1-(od样品-od控制)/od空白]×100％，结果如表4：表4α-葡萄糖苷酶抑制活性葡萄糖苷酶是生物体内糖代谢途径中的重要成员，α-葡萄糖苷酶更是直接参与淀粉及糖原的代谢途径，通过抑制α-葡萄糖苷酶，可以降低唐化学代谢，从而达到降血糖的功效。从酶活性实验结果来看，化合物m-6-2-1、m-6-89、s3-1、m-m-6-2、m-6-2-2、s2-2-2、m-3、ea-6-7、s2-1-2、s2-2-3有良好的α-葡萄糖苷酶抑制活性，水曲柳种子中化合物在降血糖方面具有一定的应用价值。需要说明的是，本发明权利要求书中采用的步骤方法与上述实施例相同，为了防止赘述，本发明的描述了优选的实施例，但本领域内的技术人员一旦得知了基本创造性概念，则可对这些实施例做出另外的变更和修改。所以，所附权利要求意欲解释为包括优选实施例以及落入本发明范围的所有变更和修改。显然，本领域的技术人员可以对本发明进行各种改动和变型而不脱离本发明的精神和范围。这样，倘若本发明的这些修改和变型属于本发明权利要求及其等同技术的范围之内，则本发明也意图包含这些改动和变型在内。当前第1页12