本发明涉及茶叶提取技术，具体为一种茶叶多酚的提取方法。
背景技术：
茶多酚是茶叶中多酚类化合物的总称。研究表明，茶多酚具有抗氧化、防癌、抗辐射、抗衰老、预防心血管疾病、降低血糖和血脂等多种生理活性。因此，茶多酚在油脂、食品、医药、化妆品及饮料等领域具有广泛的应用前景。目前国内外茶多酚粗品的提取的方法主要有溶剂萃取法、树脂吸附分离法、超临界流体萃取法、超声波浸提法、微波浸提法等，这些方法存在使用较多的有机溶剂，对环境污染大，大孔吸附树脂纯化效率慢等不足，为此，开发一种茶叶多酚的绿色提取方法具有重要的意义。技术实现要素：为了解决茶多酚提取时使用较多的有机溶剂，对环境污染大，大孔吸附树脂纯化效率慢等问题，本发明提供了一种茶叶多酚的提取方法。为了实现上述发明目的，本发明提供如下技术方案：（1）将新鲜茶叶洗净，自然晾干后，粉碎过60目筛，得到茶叶粉末；（2）将氯化胆碱与氢键给体按1：2的摩尔比混合后，在80℃条件下加热1-1.5h制备低共熔试剂；（3）将茶叶粉末经微波处理后，与低共熔试剂的水溶液按1：8-10的质量体积比混合后，经球磨机械提取后，收集上清液；（4）将上清液中加入1：1体积比的k2hpo4水溶液，涡旋离心分向后，取出上相，将上相减压浓缩后，加入0.5倍的体积的超分子溶剂，涡旋离心除去上清液，沉淀部分置于超临界流体装置中，经萃取纯化后，将沉淀部分冷冻干燥，既得天然茶多酚，利用福林酚法对天然茶多酚的多酚含量进行测量。优选的，步骤（2）中所述的氢键给体为尿素、乙二醇、甘油中的一种。优选的，步骤（3）中所述的微波处理条件为：处理温度为30-40℃，处理时间为5-10min。优选的，步骤（3）中所述的低共熔试剂水溶液中低共熔试剂的体积分数为55-75%。优选的，步骤（3）中所述的球磨机械提取条件为：球与茶叶粉末的质量比为1：8-10；转速为600-800rpm/min;萃取时间为5-10min。优选的，步骤（4）中所述的k2hpo4水溶液浓度为0.25-0.35g/ml。优选的，步骤（4）中所述的减压浓缩后，浓缩液的密度为1.15-1.2g/ml。优选的，步骤（4）中所述的超分子溶剂为：四氢呋喃-正辛醇-水、四氢呋喃-正己醇-水、四氢呋喃-正辛酸-水超分子溶剂中的一种；所述超分子溶剂的含有粒径为200-400nm的聚集体。优选的，步骤（4）中所述的超临界流体萃取条件为:萃取压力为25-28mpa；co2流速为18-20l/h;萃取时间为15-20min。优选的，步骤（4）中所述的福林酚法的具体操作为：将所得的茶多酚提取物配成2mg/ml的茶多酚水溶液，取1ml的茶多酚提取液于试管中，再向试管中加入5ml10％福林酚试剂，静置5min后加4ml7.5％碳酸钠溶液，摇匀，室温下反应60min后，用紫外可见分光光度计测定其765nm处的吸光度，最后将吸光度值与2mg/ml没食子酸对照品水溶液经上述步骤处理后在765m处测定吸光度进行对比，得到茶多酚的含量。与现有技术相比，本发明所述一种茶叶多酚的提取方法具有以下有益效果：本发明采用微波处理破坏茶叶中植物细胞壁使得多糖化合物能快速浸出，提高提取效率；采用磨球机械辅助提取法，不仅提高了提取效率同时缩短提取时间，进一步提高了提取效率；采用天然绿色的低共熔试剂作为提取剂，显著的减少了有机溶剂是使用，此外，本发明采用超临界流体以及绿色的超分子溶剂除去杂质，避免使用含氯的有机溶剂，更为环保。具体实施方式【实施例1】（1）将新鲜茶叶洗净，自然晾干后，粉碎过60目筛，得到茶叶粉末；（2）将氯化胆碱与甘油按1：2的摩尔比混合后，在80℃条件下加热1.5h制备低共熔试剂；（3）将在35℃条件下，经微波处理8min后，与60%的低共熔试剂的水溶液按1：8的质量体积比混合后，在球与茶粉末的质量比为1：8，转速为650rpm/min条件下经球磨机械提取6min后，收集上清液；（4）将上清液中加入1：1体积比的0.3g/ml的k2hpo4水溶液，涡旋离心分向后，取出上相，将上相减压浓缩为1.15-1.2g/ml后，加入0.5倍的四氢呋喃-正辛醇-水超分子溶剂，涡旋离心除去上清液，沉淀部分置于超临界流体装置萃取中在在25mpa；co2流速为20l/h条件下萃取15min后纯化，将剩余沉淀部分冷冻干燥，既得天然茶多酚。【实施例2】（1）将新鲜茶叶洗净，自然晾干后，粉碎过60目筛，得到茶叶粉末；（2）将氯化胆碱与尿素按1：2的摩尔比混合后，在80℃条件下加热1.0h制备低共熔试剂；（3）将在35℃条件下，经微波处理5min后，与65%的低共熔试剂的水溶液按1：8的质量体积比混合后，在球与茶粉末的质量比为1：10，转速为650rpm/min条件下经球磨机械提取5min后，收集上清液；（4）将上清液中加入1：1体积比的0.3g/ml的k2hpo4水溶液，涡旋离心分向后，取出上相，将上相减压浓缩为1.15-1.2g/ml后，加入0.5倍的四氢呋喃-正己醇-水超分子溶剂，涡旋离心除去上清液，沉淀部分置于超临界流体装置萃取中在在27mpa；co2流速为18l/h条件下萃取16min后纯化，将剩余沉淀部分冷冻干燥，既得天然茶多酚。【实施例3】（1）将新鲜茶叶洗净，自然晾干后，粉碎过60目筛，得到茶叶粉末；（2）将氯化胆碱与乙二醇按1：2的摩尔比混合后，在80℃条件下加热1.0h制备低共熔试剂；（3）将在35℃条件下，经微波处理5min后，与70%的低共熔试剂的水溶液按1：9的质量体积比混合后，在球与茶粉末的质量比为1：9，转速为700rpm/min条件下经球磨机械提取6min后，收集上清液；（4）将上清液中加入1：1体积比的0.3g/ml的k2hpo4水溶液，涡旋离心分向后，取出上相，将上相减压浓缩为1.15-1.2g/ml后，加入0.5倍的四氢呋喃-正辛酸-水超分子，涡旋离心除去上清液，沉淀部分置于超临界流体装置萃取中在在27mpa；co2流速为20l/h条件下萃取15min后纯化，将剩余沉淀部分冷冻干燥，既得天然茶多酚。实施例1-3中茶多酚提取物中总多酚含量的测定将实施例1-3中所得的茶多酚提取物配成2mg/ml的茶多酚水溶液，取1．ml的茶多酚提取液于试管中，再试管中加入5．00ml10％福林酚试剂，静置5min后加4ml7.5％碳酸钠溶液，摇匀。室温下反应60min后，用紫外可见分光光度计测定其765nm处的吸光度，最后将吸光度值与2mg/mld.l无没食子酸对照品水溶液经上述步骤处理后在765m处测定吸光度进行对比，得到茶多酚的含量，如表所示。实施例1-3中多酚提取物中总多酚含量实施例1实施例2实施例3多酚含量（%）90.0%89.2%88.8%对于本领域的普通技术人员而言，具体实施例只是对本发明进行了示例性描述，显然本发明具体实现并不受上述方式的限制，只要采用了本发明的方法构思和技术方案进行的各种非实质性的改进，或未经改进将本发明的构思和技术方案直接应用于其它场合的，均在本发明的保护范围之内。当前第1页12