一种磷丙替诺福韦有关物质的制备方法与流程

本发明涉及医药合成领域，更具体公开了一种磷丙替诺福韦有关物质的制备方法。
背景技术：
磷丙替诺福韦(tenofoviralafenamidefumarate，taf，gs-7340)是rna依赖性的dna多聚酶抑制剂，是替诺福韦(tenofovir，tfv)的口服前药。于2016年在美国获批上市，适应症为乙肝，其结构式如下：cn201510943798中报道了磷丙替诺福韦(taf)三个杂质：taf异丙酯杂质(taf-impurityh)，taf二苯酯杂质(taf-impurityi)，taf二酰胺杂质(taf-impurityj)的杂质以及其合成方法。cn201610140535.8中报道了taf的分离检测方法，其中可以有效的分离检测3对非对映异构体和1个对映异构体杂质以及其它四种结构杂质。但是以上文献中均未对taf的降解杂质进行研究，根据vijayamadhyanapugolla.etal，2016，stabilitybehaviorofantiretroviraldrugsandtheircombinations.4:characterizationofdegradationproductsoftenofoviralafenamidefumarateandcomparisonofitsdegradationandstabilitybehaviourwithtenofovirdisoproxilfumarate.journalofpharmaceuticalandbiomedicalanalysis.中的报道，其中公开了taf的四种降解杂质，其结果分别如下：文献中虽然公开了上述四个可能的降解杂质，但是并未公开二聚体杂质iv的制备方法。技术实现要素：本发明的目的在于提供一种磷丙替诺福韦降解杂质iv(cas:1607007-18-0)，化学名称为双((r(1)-(6-氨基-9-嘌呤-9-基)丙基-2-氧基)甲基)二膦酸(又名为pmpa二聚物杂质)的制备方法。本发明的磷丙替诺福韦二聚物杂质iv的制备，可以通过以下方法获得：双((r(1)-(6-氨基-9-嘌呤-9-基)丙基-2-氧基)甲基)二膦酸(又名为pmpa二聚物杂质)的具体制备方法如下：将9-[(r)-2-(磷酰甲氧基)丙基]腺嘌呤(gs3)溶于非质子型极性溶剂中，在非亲核性有机碱的条件下，加入缩合剂发生缩合反应。其中所述的非质子型极性溶剂为一类不易给出质子，但介电常数和分子极性都很大，分子的负电荷端大多露在外部，正电荷端包在内部，对负离子很少溶剂化的溶剂。因此非质子极性溶剂对sn2反应是有利的，而且也适用于强碱参与的反应。这样的溶剂包括氯仿、乙腈、二甲基亚砜、n,n-二甲基甲酰胺、六甲基磷酰胺、四氢呋喃、1,4-二氧六环等，其中优选氯仿、乙腈、n,n-二甲基甲酰胺(dmf)、二甲基亚砜(dmso)中的一种，更优选dmf。其中，所述非亲核性有机碱是指一些不是良好亲核体的碱，这样的溶剂包括叔丁醇钾(t-buok)、二乙胺、三乙胺、n，n-二异丙基乙基胺(dipea)，1，8-二氮杂二环十一碳-7-烯(dbu)等。其中，优选1，8-二氮杂二环十一碳-7-烯(dbu)、三乙胺、n，n-二异丙基乙基胺(dipea)中的一种，其中更优选dipea。其中，所述缩合剂是指缩合反应中所加的反应辅助剂。这样的溶剂包括n,n'-羰基二咪唑、4，5-二氰基咪唑、n，n'-二环己基碳二亚胺(dcc)、二异丙基碳二亚胺(dic)、1-(3-二甲胺基丙基)-3乙基碳二亚胺(edci)、1-对甲基苯磺酰咪唑等溶剂。其中优选n，n'-二环己基碳二亚胺(dcc)、二异丙基碳二亚胺(dic)、1-(3-二甲胺基丙基)-3乙基碳二亚胺(edci)中的一种，更优选dcc。其中，起始物料9-[(r)-2-(磷酰甲氧基)丙基]腺嘌呤与非质子型极性有机溶剂的重量体积比为0.05～1：1，优选为0.1～1：1，更优选0.1：1。其中，起始物料9-[(r)-2-(磷酰甲氧基)丙基]腺嘌呤与非亲核性有机碱的摩尔比为1：5～10，优选为1：5～6。其中，起始物料9-[(r)-2-(磷酰甲氧基)丙基]腺嘌呤与缩合剂的摩尔比1：1～3，优选为1：1～1.5。其中，缩合反应温度为50-100℃，优选90-100℃。其中，缩合反应时长为15-24h，优选20-24h。优选的，其具体制备步骤如下：a.将9-[(r)-2-(磷酰甲氧基)丙基]腺嘌呤(gs3)溶于非质子型极性有机溶剂中，在非亲核性有机碱的条件下，加入缩合剂发生缩合反应；b.反应毕，浓缩干燥反应液得粗品；c.将粗品用制备柱纯化，冷冻干燥。得成品。其中，制备柱纯化的条件如下：色谱柱：汉邦dac-hb，50*650mm，10um；流动相a：0.05％甲酸水溶液；流动相b：乙腈；检测波长：260nm；检测器：紫外检测器；大概出峰时间：约9min；柱温：室温，梯度洗脱。更优选的，其具体制备步骤如下：a.将gs3溶于非质子型极性溶剂中，在非亲核性有机碱的条件下，加入缩合剂发生缩合反应；b.反应毕，浓缩干燥反应液得粗品；c.将粗品用制备柱纯化，冷冻干燥，得成品。其中步骤a所述的非质子型有机溶剂为n，n-二甲基甲酰胺，非亲核性有机碱为n，n-二异丙基乙基胺，缩合试剂为n,n'-二环己基碳二亚胺，gs3与非质子型极性有机溶剂的重量体积比0.1：1，gs3与非亲核性有机碱的摩尔比为1：5～6；gs3与缩合剂的摩尔比为1：1～1.5；缩合反应的反应温度为90-100℃，缩合反应的反应时长为20-24h；所述步骤c的制备柱纯化的具体反应条件如下：色谱柱：汉邦dac-hb，50*650mm，10um；流动相a：0.05％甲酸水溶液；流动相b：乙腈；检测波长：260nm；检测器：紫外检测器；柱温：室温；梯度洗脱。其中，梯度洗脱条件如下：时间(分钟)流速(ml/min)流动相a％流动相b％0.080901020.080752521.080901030.0809010表中所述a％、b％为两者的体积百分比。本发明的起始物料由赛富乐医药化工有限公司提供，也可以依据包括但不限于cn01813161中公开的方法进行制备。本发明的优点在于，本发明公开了pmpa二聚物杂质的制备方法，该制备方法反应条件简单、收率好，纯度高，通过该方法可以快速获得纯度高的pmpa的杂质标准对照品，从而解决pmpa二聚物杂质难获得的问题。说明书附图图1实施例1pmpa二聚物的hplc图；图2实施例1pmpa二聚物的1h-nmr图谱；图3实施例1pmpa二聚物的13c-nmr图谱；图4实施例1pmpa二聚物的esi-图谱。具体实施方式通过下面的实施例可对本发明进行进一步的描述，然而，本发明的范围并不限于下述实施例。pmpa二聚物杂质的纯度检测的hplc条件如下：照高效液相色谱法(中国药典2015版四部通则0512)试验。用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂[watersxbridgec18(150*4.6mm，3.5um)]；以[20mm磷酸氢二钠缓冲液(ph6.0)：乙腈](99:1)为流动相a，以[20mm磷酸氢二钠缓冲液(ph6.0)：乙腈](50:50)为流动相b，梯度洗脱；检测波长为260nm；流速为每分钟1.0ml；进样盘温度为4℃；柱温为30℃。精密量取供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，记录色谱图，按峰面积归一化法计算纯度。实施例1工艺描述：将5.0g9-[(r)-2-(磷酰甲氧基)丙基]腺嘌呤加入50mldmf中搅拌，再依次将11.3gdipea和4.3gdcc依次加入体系，90～100℃反应24h。反应结束，将反应液浓缩干得到二聚体的粗品。将粗品用制备柱纯化，制备的色谱条件：色谱柱：汉邦dac-hb50*650mm10um；流动相a：0.05％甲酸水；流动相b：乙腈；检测波长：260nm；检测器：紫外检测器；大概出峰时间：约9min；柱温：室温梯度洗脱条件：时间(分钟)流速(ml/min)流动相a％流动相b％0.080901020.080752521.080901030.0809010其中，表中所述a％、b％为两者的体积百分比。得到的制备液冷冻干燥，得到pmpa二聚物杂质。收率41.3％、纯度93.74％(详见图1)。核磁和质谱数据：1h-nmr(400mhz，d2o)δ0.98(d，j＝6.4hz，6h)，3.45～3.51(m，2h)，3.62～3.67(m，2h)，3.74～3.78(m，2h)，3.99(m，2h)，4.15(m，2h)7.96(d，j＝13.2hz，4h)，8.32(s，4h)(详见图2)。13c-nmr(400mhz，d2o)δ15.83，47.58，66.75，63.94，75.55，117.23，143.65，149.40，153.04，170.35(详见图3)。ms：555，[m-h]-(详见图4)。实施例2工艺描述：将5.0g9-[(r)-2-(磷酰甲氧基)丙基]腺嘌呤加入50mldmf中搅拌，再依次将8.1g三乙胺和3.3gdic依次加入体系，90～100℃反应22h。反应结束，将反应液浓缩干得到二聚体的粗品。将粗品用制备柱纯化，制备条件同实施例1，得到的制备液冷冻干燥，得到pmpa二聚物杂质。收率45.5％、纯度94.61％。实施例3工艺描述：将5.0g9-[(r)-2-(磷酰甲氧基)丙基]腺嘌呤加入25mldmf和25ml乙腈中搅拌，再依次将12g三乙胺和4gedci依次加入体系，90～100℃反应24h。反应结束，将反应液浓缩干得到二聚体的粗品。将粗品用制备柱纯化，制备条件同实施例1，得到的制备液冷冻干燥，得到pmpa二聚物杂质。收率43.3％、纯度93.52％。实施例4工艺描述：将5.0g9-[(r)-2-(磷酰甲氧基)丙基]腺嘌呤加入50mldmf中搅拌，再依次将11.3gdipea和4.3gdcc依次加入体系，50～60℃反应24h。反应结束，将反应液浓缩干得到二聚体的粗品。将粗品用制备柱纯化，制备条件同实施例1，得到的制备液冷冻干燥，得到pmpa二聚物杂质。收率40.3％、纯度92.12％。实施例5工艺描述：将5.0g9-[(r)-2-(磷酰甲氧基)丙基]腺嘌呤加入50mldmf中搅拌，再依次将11.3g二乙胺和4.3gdcc依次加入体系，90～100℃反应24h。反应结束，将反应液浓缩干得到二聚体的粗品。将粗品用制备柱纯化，制备条件同实施例1，得到的制备液冷冻干燥，得到pmpa二聚物杂质。收率34.3％、纯度89.01％。实施例6工艺描述：将5.0g9-[(r)-2-(磷酰甲氧基)丙基]腺嘌呤加入50mldmf中搅拌，再依次将11.3gdipea和4.3gdcc依次加入体系，90～100℃反应30h。反应结束，将反应液浓缩干得到二聚体的粗品。将粗品用制备柱纯化，制备条件同实施例1，得到的制备液冷冻干燥，得到pmpa二聚物杂质。收率20.3％、纯度93.12％。当前第1页12