本发明提供了4-(4-(甲磺酰基)苯基-1-丙基-3-(对甲苯基)-1h-吡咯-2-醇(式c化合物)及制备方法、用途。
背景技术：
：非甾体抗炎药(nsaids)是治疗急慢性疼痛的常用药物，其抗炎、镇痛、解热作用是通过抑制环氧化酶(cox)实现的。传统nsaids的镇痛、抗炎作用是抑制cox-2的结果。选择性cox-2抑制剂是一类新型nsaids，因其选择性地抑制cox-2活性，对cox-1影响较小，不良反应较少较轻，目前广泛用于类风湿关节炎和骨关节炎的抗炎、镇痛治疗。目前上市的选择性cox-2抑制剂有：尼美舒利(nimesulide)、美洛昔康(meloxicam)、塞来昔布(celecoxib)。us7112605公开了一种新的抑制cox-2抑制剂n-正丙基-3-对甲基苯基-4-对甲磺酰基苯基-3-吡咯烷-2-酮，已作为非甾体抗炎药物上市。在新药研究和开发过程中，药物的质量是衡量药物品质的重要标准，药物的质量首先取决于药物自身的疗效和毒副作用，其次是药物的有效成分的含量。而药物的有关物质(或杂质含量)直接影响到药物的疗效并可能导致毒副作用，同时，为了安全有效的用药，需要严格控制药物有效成分的纯度、杂质的限度，提供高质量标准的药物。为此，在药物的生产、储存以及运输过程中必须严格可控制药物杂质的产生。技术实现要素：本发明提供了一种4-(4-(甲磺酰基)苯基-1-丙基-3-(对甲苯基)-1h-吡咯-2-醇(式c化合物)或其可药用盐，“吡咯-2-醇”中羟基pka值偏低，溶液中酸性较高。该结构化合物可能易于与dna分子相结合，致突变，产生基因毒性。同时，原料药质量控制越来越重视对遗传毒性(或称基因毒性)杂质的研究。为此，对具有该结构的化合物需要深入的基因毒性研究，以保证含有或可能含有该结构杂质的原料药或制剂的用药安全性。本发明还提供了制备式c化合物的方法，该方法包括：式b化合物转化为式c化合物的步骤，其中，r1为羟基保护基。进一步地，所述式b化合物转化式c化合物的反应溶剂选自水、乙腈或其组合，优选为乙腈/水，其中乙腈/水中乙腈含量为20至60％(体积/体积，v/v)，可以为20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60％(v/v)。进一步地，所述式b化合物转化式c化合物的反应温度不高于0℃，优选为-10至-40℃，可以为-10、-12、-14、-16、-18、-20、-22、-24、-26、-28、-30、-32、-34、-36、-38、-40℃。在可选实施方案中，制备式c化合物的方法还包括式c化合物经结晶、过滤的步骤。在可选实施方案中，制备式c化合物的方法还包括式a化合物转化为式b化合物的步骤，其中，r1如前所述。进一步地，式a化合物转化为式b化合物反应在碱性条件下进行，所述碱为有机碱或无机碱，选自但不限于碳酸钾、碳酸钠、氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸铯、三乙胺中的至少一种，优选为三乙胺；反应溶剂选自乙腈、二氯甲烷、氯仿、四氢呋喃、n,n-二甲基甲酰胺、n,n-二甲基乙酰胺中的至少一种。在可选实施方案中，制备式c化合物的方法，包括：其中，r1如前所述。在优选实施方案中，制备式c化合物的方法：在一些实施方案中，在碱性条件，式a化合物与三氟乙酰三甲基硅(tmsotf)反应得式b-1化合物，随后式b-1化合物在乙腈/水溶液中水解得式c化合物。为了有效提高式a化合物的转变，式a化合物与三氟乙酰三甲基硅的用量比(摩尔)为1:1.2～1:2，优选为1:1.4～1:1.8，可以为1:1.4、1:1.5、1:1.6、1:1.7、1:1.8，过高用量比(摩尔)不利于后续的处理和水解反应，同时会引入“吡咯-2-醇”结构的聚合或缩合。进一步地，所述碱包括但不限于无机碱(如碳酸钾、碳酸铯)或有机碱(如三乙胺)。有机碱更便于后续处理，同时保证反应的有效性。所述碱优选自三乙胺。在另一些实施方案中，式a化合物转化为式b化合物所用碱的种类选择与式b化合物中r1相关。参见文献(“protectivegroupsinorganicsynthesis”，5th.ed.t.w.greene&p.g.m.wuts)中的羟基保护基团。作为示例，该羟基保护基连同与之结合的氧原子一起，形成酯、醚、硅烷醚。所述羟基保护基可以为乙酰基、甲酰基、苯甲酰基或新戊酰基、苄基(bn)等，上保护基的方式也可参照(“protectivegroupsinorganicsynthesis”，5th.ed.t.w.greene&p.g.m.wuts)，并将相关内容引入本说明书中。在一些实施方案中，式b-1化合物的水解需要严格控制乙腈/水溶液中的水含量，避免过快或“过度”的水解。过高水含量会导致“过度”水解，过低水含量会导致水解的不彻底，收率和质量偏低。优选腈/水中乙腈含量为20至60％(体积/体积，v/v)，可以为20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60％(v/v)。为了获得(分离)目标产物，本发明制备方法进一步任选包括淬灭、分液、水洗、浓缩、过滤或干燥的步骤。本发明还提供式c化合物在1-正丙基-3-(4-甲基苯基)-4-(4-甲磺酰基苯基)-2,5-二氢-1h-2-吡咯酮(化合物a)或其盐原料药、制剂有关物质检测时作为杂质对照品的用途，式c化合物作为对照品配制系统适用性试验溶液进行定位的检测方法为：精密称取供试品10mg，置50ml量瓶中，加乙腈或流动相2ml溶解，加流动相稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；精密量取1ml，置100ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液；另取化合物a对照品和式c化合物对照品适量，加流动相溶解并稀释制成每ml含化合物a0.2mg、式c化合物1μg的混合溶液，作为系统适用性试验溶液；精密量取上述溶液各20μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主峰保留时间的4倍；系统适用性色谱图中，化合物a与式c化合物峰之间的分离度不小于1.5，理论板数按化合物a峰计算不低于2000；供试品溶液的色谱图中如有杂质峰，式c化合物峰面积不得大于对照溶液主峰面积的0.5倍(0.5％)，其他单个杂质的峰面积不得大于对照溶液主峰面积的0.1倍(0.1％)，各杂质峰面积的和不得大于对照溶液的主峰面积(1.0％)。进一步地，所述流动相为水/乙腈，两者的体积比为3:1、2:1、3:2、1:1、1:2。本发明提供了一种供药用的原料药，其中1-正丙基-3-(4-甲基苯基)-4-(4-甲磺酰基苯基)-2,5-二氢-1h-2-吡咯酮(化合物a)或其盐纯度大于99.00％、大于99.40％、或大于99.50％。在非限制性实施例中，化合物a纯度可为99.00％、99.02％、99.04％、99.06％、99.08％、99.10％、99.12％、99.14％、99.16％、99.18％、99.20％、99.22％、99.24％、99.26％、99.28％、99.30％、99.32％、99.34％、99.36％、99.38％、99.40％、99.42％、99.44％、99.46％、99.48％、99.50％、99.52％、99.54％、99.56％、99.58％、99.60％、99.62％、99.64％、99.66％、99.68％、99.70％、99.72％、99.74％、99.76％、99.78％、99.80％、99.82％、99.84％、99.86％、99.88％、99.90％、99.92％、99.94％、99.96％、99.98％、100.00％。进一步地，所述原料药中含有式c化合物，式c化合物的含量低于0.50％、低于0.40％、或低于0.35％。在非限制性实施例中，式c化合物的含量可以为0.50％、0.48％、0.46％、0.44％、0.42％、0.40％、0.38％、0.36％、0.34％、0.32％、0.30％、0.28％、0.26％、0.24％、0.22％、0.20％、0.18％、0.16％、0.14％、0.12％、0.10％、0.08％、0.06％、0.04％、0.02％、0.01％或更低。本发明还提供一种药物组合物，其含有前述原料药及药学上可接受的赋形剂。在非限制实施例中，本发明所述的药物组合物可以中间制剂进一步制备成注射液或固体制剂，所述固体制剂选自但不限于片剂、丸剂、颗粒剂、冻干粉针剂或胶囊剂。进一步地，所述固体制剂中赋形剂为本领域技术人员所熟知或可以确定的，选自但不限于崩解剂、填充剂、粘合剂、润滑剂中的至少一种；所述注射液赋形剂选自但不限于无毒性的生理学可接受的液体载体，如生理盐水、注射用水、5％葡萄糖注射液、葡萄糖氯化钠注射液，ph调节剂或防腐剂中的至少一种。本发明所述“羟基保护基”是本领域已知的可适当的用于羟基保护的基团，参见文献(“protectivegroupsinorganicsynthesis”，5th.ed.t.w.greene&p.g.m.wuts)中的羟基保护基团。作为示例，该羟基保护基连同与之结合的氧原子一起，形成酯、醚、硅烷醚。所述羟基保护基可以为乙酰基、甲酰基、苯甲酰基或新戊酰基、苄基(bn)、甲氧基乙氧基甲基醚(mem)、对甲氧基苄基、三苯甲基(tr)、二甲氧基三苯甲基(dmt)、甲氧基甲基醚(mom)、三甲基硅基(tms)、叔丁基二甲基硅基(tbdms，tbs)、叔丁基二苯基硅基(tbdps)、三异丙基甲硅烷基氧基甲基(tom)或三异丙基甲硅烷基(tips)；优选为叔丁基二甲基硅基、三甲基硅基(tms)、叔丁基二苯基硅基、对甲氧基苄基、苄基或乙酰基，更优选为三甲硅基。本发明式c化合物可药用盐包括但不限于钠、钾、钙等盐。本发明有关物质或杂质含量通过hplc来确定，所用hplc条件为十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，水/乙腈为流动相，检测波长228nm。本发明化合物结构通过核磁共振(nmr)或/和质谱(ms)来确定。nmr位移(δ)以10-6(ppm)的单位给出。nmr的测定是用varianmercury-400核磁仪共振仪，测定溶剂为氘代二甲基亚砜(dmso-d6)，内标为四甲基硅烷(tms)；ms的测定用synaptq-tof质谱仪(生产商：waters公司)。本发明所述用试剂可通过商业途径获得，所用中间体可参考cn102206178b制备获得。具体实施方式以下将结合实施例或实验例更详细地解释本发明，本发明的实施例或实验例仅用于说明本发明的技术方案，并非限定本发明的实质和范围。实施例1：制备化合物c步骤1：化合物a4g(10mmol)溶于60ml二氯甲烷中，加入4g三乙胺(40mmol)，室温下滴入3.3g三氟乙酰基三甲基硅(tmsotf)(15mmol)，搅拌反应，加水淬灭反应，分液、水洗，浓缩得油状物。步骤2：将步骤1所得油状物用20ml40％乙腈/水溶解，冷却至-20℃过夜，过滤得含式c化合物的湿品。步骤3：将步骤2所得湿品使用制备型(p-hplc)液相系统制备，分离得到式c化合物450mg：色谱条件：为十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，水/乙腈(60:40)为流动相，检测波长228nm。[m+h]+＝370.1459；1hnmr(varianmercury-400mhz,dmso-d6):0.88(t,j＝7.03h),1.62(m,2h),2.20(s,3h),3.10(s,3h),3.45(m,5h),4.80(s,h),7.08(br,4),7.45(d,j＝8.3hz,2h),7.45(d,j＝8.3hz,2h),7.70(d,j＝8.3hz,2h),7.85(s,h)；13cnmr(varianmercury-100mhz,dmso-d6):11.1,20.7,21.8,43.3,43.6,52.5,119.3,124.6,124.7,127.3,128.0,129.6,133.4,133.7,136.6,137.3,138.5,177.1.实施例2：制备1-正丙基-3-(4-甲基苯基)-4-(4-甲磺酰基苯基)-2,5-二氢-1h-2-吡咯酮在200l反应釜中依次加入50kg乙醇，化合物m，氮气保护，加入30kg正丙胺，升温反应，tlc检测至反应完全。浓缩反应液至无明显液滴滴下后。向反应釜加入100kg醋酸，加热回流反应，降温后加入活性炭1.0kg，搅拌，压滤，向其中加入200kg纯化水，搅拌析晶，甩滤，洗涤，得黄色固体19.1kg，收率85.5％。向300l反应釜中依次加入160kg乙醇，上步所得黄色固体。加热回流后压滤进精烘包中的反应釜后缓慢降温析晶，甩滤，洗涤，甩滤所得淡黄色固体15.0kg，收率82.4％。向反应釜中加入95kg二氯甲烷和上步所得淡黄色固体，搅拌溶解后，经8kg硅藻土层过滤，加入70kg正已烷，搅拌控温析晶，甩滤，干燥，得白色固体化合物a(批号：s120801)11.25kg，收率75％。原料药化合物a有关物质检测方法，采用式c化合物对照品配制系统适用性试验溶液进行定位。色谱条件：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以水-乙腈(60:40)为流动相等度洗脱；检测波长为228nm。精密称取供试品(批号：s120801)10mg，置50ml量瓶中，加乙腈2ml溶解，加流动相稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；精密量取1ml，置100ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。另取化合物a对照品和式c化合物对照品适量，加流动相溶解并稀释制成每ml含化合物a0.2mg、式c化合物1μg的混合溶液，作为系统适用性试验溶液。精密量取上述溶液各20μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主峰保留时间的4倍。系统适用性色谱图中，化合物a与式c化合物峰之间的分离度不小于1.5，理论板数按化合物a峰计算不低于2000。供试品溶液的色谱图中如有杂质峰，式c化合物峰面积不得大于对照溶液主峰面积的0.5倍(0.5％)，其他单个杂质的峰面积不得大于对照溶液主峰面积的0.1倍(0.1％)，各杂质峰面积的和不得大于对照溶液的主峰面积(1.0％)。实施例3：原料药化合物a长期稳定性和加速稳定性加速稳定性将化合物a(批号：s120801)置于拟上市的包装材料(内层无色聚乙烯塑料袋密封，外层黑色聚乙烯塑料袋)中，与40℃、相对湿度75％条件下放置6个月，于1、2、3和6个月分别取样分析，测定结果见表1。表1长期稳定性将化合物a(批号：s120801)置于拟上市包装材料(内层聚乙烯塑料袋密封，外层黑色聚乙烯塑料袋)中，与室温(25±2℃，rh60％)长期放置，于第3、6、9、12、18和24月分别取样分析，测定结果见表2。表2结论：原料药化合物a在密封条件长期放置时，稳定性较好，已知单杂或未知单杂都未有明显增长。实施例4：化合物a溶液的稳定性取化合物a(批号：s120801)作为对照品约25mg，精密称定，置于50mg量瓶中，加水/乙腈溶液，并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。分别测定室温放置0、4、8、12、24、48小时后的归一化纯度大小，测定结果见表3。表3根据实施例4的结果可知，化合物a的原料药在特定条件下杂质c含量会以较快的速度增加。实施例5：色谱条件的选择根据化合物a的结构特点与溶解度情况，选择反相色谱柱系统，以十八烷基硅烷键合硅胶为色谱柱填料，以不同体积比的水/乙腈，检测波长为228nm，优化检测条件，数据见表4表4序号流动相比例结论1水-乙腈(30:70)出峰较快2水-乙腈(50:50)峰形较好，分离好，出峰稍快可接受3水-乙腈(60:40)峰形好，样品保留时间合适，分离好4水-甲醇(45:55)峰形不好，分离不好5水-乙腈(70:30)出峰较晚当前第1页12