一种白细胞分选富集装置及方法与流程

本发明属于医疗器械技术领域，尤其是血液成分分离和收集装置，具体涉及一种白细胞分选富集装置及方法。

背景技术：

近年来，伴随着血液学、科学技术的快速进步，分离对于治疗而言必要的血液级分并给予患者，从而进一步提高治疗效果、抑制副作用的治疗方式得到广泛普及。例如，近年来，面向白血病、实体癌治疗的造血干细胞移植日益盛行，逐渐形成分离出治疗所必须的白细胞来给予的模式。然而，根据目前存在的分选白细胞状况，期望用于对来自相同来源的红细胞、白细胞、血小板进行分离的不需要复杂操作，并能够迅速实现的分离富集白细胞技术。

技术实现要素：

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种白细胞分选富集装置及方法，以实现方便快捷、高效可靠地对白细胞富含层的分离收集。

为达到上述目的，本发明是通过以下技术方案来实现的：

本发明提供一种白细胞分选富集装置及方法，包括管体和位于管体两端的盖帽，所述管体内设有中空的哑铃式腔体，所述中空的哑铃式腔体由细直段、粗直段、锥形段、延伸段组成，粗直段为两个，呈对称布置于细直段的两侧，并分别通过锥形段与细直段连通，任意一个粗直段背离细直段的背离端延长设置有延伸段，所述延伸段内设有与之保持气密性并可沿其轴向移动的被收容的封口件。

进一步，所述锥形段分别与细直段和粗直段的连接处设置圆滑过渡。

进一步，所述管体与盖帽之间螺纹连接。

进一步，所述封口件由固定部件、密封部件组成，所述密封部件与固定部件相结合，紧贴于延伸段的内周面。

进一步，所述细直段的直径为1～4毫米，细直段长度大于5毫米，粗直段直径和长度不受限制，锥形段倾斜角度不受限制。

本发明提供了一种白细胞分选富集方法，采用上述的富集装置，所述富集方法包括：

1)、将延伸段内设置的封口件沿下部粗直段推至下部锥形段的顶部，并从上部粗直段加入血液样本；

2)、实施一次离心，使血液样本分层形成自上而下的血清层、白细胞层和红细胞层；

3)、将封口件下拉，使白细胞层下降至上部锥形段的1/3～2/3位置；

4)、再实施二次离心，待血液样本分层清晰后用移液枪吸出上部锥形段和上部粗直段中的全部血液样本。

本发明还提供一种白细胞分选富集方法，采用上述的富集装置，所述富集方法包括：

1)、将延伸段内设置的封口件至于下部粗直段的底部，并从上部粗直段加入血液样本；

2)、实施一次离心，使血液样本分层形成自上而下的血清层、白细胞层和红细胞层；

3)、将封口件上推，使白细胞层上升至上部锥形段的1/3～2/3位置；

4)、再实施二次离心，待血液样本分层清晰后用移液枪吸出上部锥形段和上部粗直段中的全部血液样本。

优选的，所述的一次离心的时间为8～10min，所述的二次离心的时间为2～3min。。

与现有技术相比，本发明的优点在于：

1、本发明构思巧妙，设计合理，结构简单，操作方便；

2、本发明可迅速且简便地从含有各血细胞成分的体液中分离出白细胞富集级分；

3、本发明通过哑铃式腔体设计，使得到的白细胞富集具有较高的浓度。

本发明的其他优点、目标和特征在某种程度上将在随后的说明书中进行阐述，并且在某种程度上，基于对下文的考察研究对本领域技术人员而言将是显而易见的，或者可以从本发明的实践中得到教导。本发明的目标和其他优点可以通过下面的说明书来实现和获得。

附图说明

为了使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合附图对本发明作进一步的详细描述，其中：

图1为本发明白细胞分选富集装置的结构示意图；

图2为本发明白细胞分选富集装置的封口件结构示意图；

图3为本发明白细胞分选富集装置的拉杆式分离全白细胞试验展示图；

图4为本发明白细胞分选富集装置的推杆式分离全白细胞试验展示图；

附图标记：1-管体，2-腔体，3-封口件，4-盖帽；其中，2a-细直段，2b-粗直段，2c-锥形段，2d-延伸段；31-固定部件，32-密封部件。

具体实施方式

以下将对本发明的优选实施例进行详细的描述；应当理解，优选实施例仅为了说明本发明，而不是为了限制本发明的保护范围。

如图1所示，本实施例中的一种白细胞分选富集装置及方法，包括管体1和位于管体1两端的盖帽4，所述管体1内设有中空的哑铃式腔体2，所述中空的哑铃式腔体2由细直段2a、粗直段2b、锥形段2c、延伸段2d组成，粗直段为两个，呈对称布置于细直段的两侧，并分别通过锥形段与细直段连通，任意一个粗直段背离细直段的背离端延长设置有延伸段，所述延伸段内设有与之保持气密性并可沿其轴向移动的被收容的封口件3。通过采用上述方案，放置于该管体1的腔体2内的血液首先经过离心分离机后，接着静置得到包含在血液中的红细胞、白细胞、血小板、血清等成分由于各自的固有比重差从下至上由重到轻的顺序叠层；通过推动封口件4，使得腔体2内的上层血清和需要收集的白细胞富集层均可停留在上部锥形段以上，并通过移液枪吸出。本发明构思巧妙，设计合理，结构简单，操作方便；本发明结构合理，管体与哑铃式腔体采用一体结构，能够实现血液成分的分离，具有较精准的分离白细胞效果。

本实施例中的锥形段2c分别与细直段2a和粗直段2b的连接处设置圆滑过渡，便于血液分层和流动；管体1与盖帽4之间螺纹连接，便于其做离心操作；细直段的直径为1～4毫米，细直段长度大于0.5厘米；粗直段直径和长度不受限制；锥形段倾斜角度不受限制。

如图2所示，本实施例中的封口件3由固定部件31、密封部件32组成，所述密封部件31与固定部件32相结合，紧贴于延伸段2d的内周面。

本实施例中的富集装置还包括气囊(未画出)，位于底部盖帽4与封口件3的固定部件31之间；所述底部盖帽4侧壁留有呈长条形的开口(未画出)，所述开口与所述气囊的充放口(未画出)相通，通过充气放气装置(未画出)对气囊充气使得气囊膨胀顶起封口件3沿哑铃式腔体2的粗直段2b自下而上运动。能有效避免分离过程中对管体内血液的晃动，利于提高白细胞分离的精准性，具有稳定、可靠的特点。所述气囊为柱形。所述充气放气装置采用带有皮管的充气皮囊或充气筒。

本实施例白细胞分选富集装置及方法的操作方式为：

如图3所示。拉杆式分离全白细胞方法：组装白细胞分选富集装置(3a)，通过螺旋杆将封口件推至下部锥形段的顶部，抽取1ml～2ml抗凝血加入到白细胞分选富集装置，一次离心10分钟(2500g，4℃),血液样本在白细胞分选富集装置中自动分层(3b)，与此同时缓慢拉动螺旋抽吸红细胞层，使得白细胞层跟随下降至白细胞分选富集装置上部锥形段约1/3～2/3位置，并残留少量红细胞，此时血液分层界面略显浑浊(3c)，继续二次离心2～3分钟(2500g，4℃)，待血液分层清晰后观察，白细胞层位于白细胞分选富集装置上锥形段约1/3～2/3位置(3d)。将分选后的血样送至血细胞计数仪中分析，计算白细胞回收率和红细胞去除率。

如图4所示，推杆式分离全白细胞方法：组装白细胞分选富集装置(4a)，通过螺旋杆将封口件推至延伸段底部，抽取1ml～2ml抗凝血加入到白细胞分选富集装置上层，一次离心10分钟(2500g，4℃)后,血液样本在白细胞分选富集装置中自动分层(4b),与此同时缓慢推动螺旋杆并使之向上推血液样，使得白细胞层跟随上升至白细胞分选富集装置上部锥形段中约1/3～2/3位置，并残留少量红细胞，此时血液分层界面略显浑浊(4c)，继续二次离心2～3min(2500g，4℃)，待血液分层再次清晰后观察，白细胞层位于白细胞分选富集装置上部锥形段约1/3～2/3位置(4d)。将白细胞分选富集装置上锥形段中的血浆层、白细胞层和残留少量红细胞用移液枪精准移至抗凝管中。此时把白细胞分选富集装置手动上下颠倒5～10次，红细胞层将混匀。将分选后的血样送至血细胞计数仪中分析，计算白细胞回收率和红细胞去除率。

数据分析：

白细胞回收率(％)公式为nup/nt＝nup/(nup+ndown)；nup表示为白细胞分选富集装置上部锥形段中白细胞的数量，nt表示血样中所有的白细胞数量,红细胞去除率计算方法类似。所有实验数据均通过spss21.0统计学软件进行统计、分析。

白细胞分选富集装置枪吸过程：

实验目的：将白细胞分选富集装置上部锥形段1/3～2/3位置中的白细胞层全部移至抗凝管中，进行血常规检测。

实验过程：用移液枪将白细胞分选富集装置上部锥形段中血浆层、白细胞层和少量的红细胞层全部移至抗凝管中，由于移液枪在枪吸白细胞过程中，白细胞层会发生扩散，所以要将上锥形段中所有液体都移至抗凝管中。

最后说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本技术方案的宗旨和范围，其均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。