病原菌药敏指示工具、病原菌药敏检测培养皿、病原菌药敏检测卡、药敏检测试剂盒的制作方法

本实用新型涉及药敏检测
技术领域：
，尤其涉及病原菌药敏检测工具。
背景技术：
：抗生素是治疗细菌性传染病的最主要的方法。开发新抗生素，难度大，耗资高，周期长，投入使用不久就不可避免地产生抗药性。这些抗药性由染色体和质粒介导，在一定条件下又可以逆转和消失；有的抗性菌在抗生素去除后，失去了因抗生素选择带来的抗药性生长优势，反而因为抗药性基因的表达负担，造成生长劣势，而被淘汰，敏感菌重新成为优势菌。因此在人医和兽医防治中分离到病原菌时，先进行多种药物的药敏试验，然后选择用药是很必要的。纸片扩散法是应用最广泛的药敏测试方法。该法是将含有定量抗菌药物的滤纸片贴在已接种了测试菌的培养基表面上，纸片中的药物在培养基中扩散，随着扩散距离的增加，抗菌药物的浓度逐渐降低，从而在药敏片周围形成浓度梯度，药敏片周围细菌依据对药物的不同敏感性而在药敏片周围形成不同大小的透明抑菌圈，高敏感的药敏片周围会形成较大的抑菌圈，耐药药敏片周围则形成较小抑菌圈或无抑菌圈，所以可以根据抑菌圈的直径值来判断是敏感、中度敏感、耐药。通过药敏试验，筛选针对于特定微生物的的敏感药物，从而对临床治疗提供指导。美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)的“抗微生物药物敏感性试验执行标准”，为临床试验和相关医疗问题提供指南，受到全世界的公认和采用。但通常纸片法药敏检测结果首先需要用尺子测量抑菌圈直径，再查找标准数据进行比对，才能得到正确的结果。这样的不仅操作麻烦、测量不准、耗时。技术实现要素：有鉴于此，本实用新型要解决的技术问题在于提供病原菌药敏检测工具，便于药敏检测结果的判读。本实用新型提供的病原菌药敏指示工具，在基底表面设置指示环；所述指示环由2～3个同心圆及其圆心组成。本实用新型所述基底为培养皿底部或卡片。作为优选，所述基底的直径为10cm。作为优选，所述指示环的个数为4个。作为优选，所述同心圆直径分别为1.5cm、2.4cm。作为优选，所述指示环互相不重叠。本实用新型还提供了一种病原菌药敏检测培养皿，包括设置有指示环的底部和皿盖；所述培养皿的直径为10cm；所述指示环的个数为4个；所述指示环由2～3个同心圆及其圆心组成。所述指示环互相不重叠。所述病原菌为金黄葡萄球菌、肺炎链球菌、流感杆菌、克雷伯菌、淋球菌、绿脓杆菌；同心圆直径分别为1.5cm、2.4cm。本实用新型还提供了一种病原菌药敏检测卡，所述检测卡为圆形，直径为10cm；所述检测卡的表面设置指示环；所述指示环的个数为4个；所述指示环由2个同心圆及其圆心组成。所述指示环互相不重叠。所述病原菌为金黄葡萄球菌、肺炎链球菌、流感杆菌、克雷伯菌、淋球菌、绿脓杆菌；同心圆直径分别为1.5cm、2.4cm。本实用新型还提供了一种药敏检测试剂盒，包括所述的药敏指示工具和待测菌种的培养基。本实用新型提供的病原菌药敏指示工具，在基底表面设置指示环。根据抑菌圈同指示环的比对，确认相关幽门螺杆菌对特定药敏片荷载药物的敏感程度，比如敏感、中度敏感和耐药。采用本实用新型提供的指示工具，操作简便快速，直观可靠，准确性可达100％。附图说明图1实施例1的耐药检测卡。具体实施方式本实用新型提供了病原菌药敏检测工具，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本实用新型。本实用新型的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本
实用新型内容、精神和范围内对本文的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本实用新型技术。本实用新型提供的病原菌药敏指示工具，在基底表面设置指示环；所述指示环由2～3个同心圆及其圆心组成。作为优选，所述基底的直径为10cm。作为优选，所述指示环的个数为4个。作为优选，所述指示环互相不重叠。作为优选，所述同心圆直径分别为1.5cm、2.4cm。本实用新型所述基底为培养皿底部或卡片。将指示环直接设置在培养皿皿体的底部，可以方便检测工作的进行。倒板后，在培养基表面涂布待测菌株的菌悬液，然后在指示环圆心对应的位置放置药敏片。所述药敏片的直径为0.6cm。培养后，根据抑菌圈与指示环比对的结果，判断药敏情况。所述判断具体为：抑菌圈大于外部同心圆为敏感；抑菌圈小于外部同心圆而大于内部同心圆为中度敏感，抑菌圈小于内部同心圆为耐药。本实用新型还提供了一种病原菌药敏检测培养皿，包括设置有指示环的底部和皿盖；所述培养皿的直径为10cm；所述指示环的个数为4个；所述指示环由2个同心圆及其圆心组成。所述指示环互相不重叠。所述病原菌为金黄葡萄球菌、肺炎链球菌、流感杆菌、克雷伯菌、淋球菌、绿脓杆菌；同心圆直径分别为1.5cm、2.4cm。作为优选，指示环设置在培养皿底部的外侧，以免对培养产生影响。为了方便以现有培养基进行药敏检测，本实用新型提供的检测工具可以为卡片形式，倒板并涂布菌悬液后，根据检测卡片上指示环的分布，在培养基对应位置放置药敏片。多个培养皿可共用同一个检测卡，也可以每个培养皿配置一个检测卡。本实用新型还提供了一种病原菌药敏检测卡，所述检测卡为圆形，直径为10cm；所述检测卡的表面设置指示环；所述指示环的个数为4个；所述指示环由2～3个同心圆及其圆心组成。所述指示环互相不重叠。所述病原菌为金黄葡萄球菌、肺炎链球菌、流感杆菌、克雷伯菌、淋球菌、绿脓杆菌；同心圆直径分别为1.5cm、2.4cm。本实用新型还提供了一种药敏检测试剂盒，包括所述的药敏指示工具和待测菌种的培养基。本实用新型提供的病原菌药敏指示工具，在基底表面设置指示环。根据抑菌圈同指示环的比对，确认相关病原菌对特定药敏片荷载药物的敏感程度，比如敏感、中度敏感和耐药。采用本实用新型提供的指示工具，操作简便快速，直观可靠，准确性可达100％。下面结合实施例，进一步阐述本实用新型：实施例1耐药检测卡检测卡的基底为圆形卡片，卡片表面设置指示环；卡片直径10cm，设置4个指示环，4个指示环不相互重叠。每个指示环由2个同心圆及其圆心组成，同心圆的直径分别为1.5cm、2.4cm。同心圆中的小圆记为M圈，大圆记为S圈。实施例2耐药检测培养皿检测工具的基底为圆形培养皿底部，表面设置指示环；培养皿直径10cm，设置4个指示环，4个指示环不相互重叠。每个指示环由2个同心圆及其圆心组成，同心圆的直径分别为1.5cm、2.4cm。同心圆中的小圆记为M圈，大圆记为S圈。实施例3培养基按照表1配方配制培养基：表1培养基配方组1组2组3牛心浸出物250mL/L；250mL/L；250mL/L；牛脑浸出物200mL/L；200mL/L；200mL/L；半胱氨酸1g/L；5g/L；2g/L；Na2HPO412g/L；10g/L；10g/L；蛋白胨4g/L；8g/L；5g/L；NaCl3g/L；0.5g/L；1g/L；琼脂粉20g/L。30g/L。25g/L。按配方将牛心浸出物、牛脑浸出物、半胱氨酸、Na2HPO4、蛋白胨、NaCl、加蒸馏水至1000mL混合之后，加热溶解，然后用滤纸过滤，调整pH值到7.2±0.1，分装800mL/瓶，于高压蒸汽灭菌锅内高压灭菌，121℃灭菌20min，冷却至室温后密封，4℃保存备用。取一定量以上4℃保存的营养液，按每1L加入25g琼脂粉的量加入琼脂粉，然后121℃，高压灭菌20min；按每1L培养基加100mL新鲜绵羊血的量加入新鲜绵羊血；充分混匀之后倒平板；(每个平板需要30mL培养基，注意避免产生气泡，倒好之后将平板水平放置，动作迅速，以免液体培养基凝固无法倒平板。)待平板冷却凝固之后，装入无菌密封袋，密封，4℃存放。本实施例采用的平板为实施例2所述的培养皿，若采用普通市售平板，则以实施例1所述的检测卡作为检测的指示标志。药敏检测随机选取10株幽门螺杆菌，现有技术鉴定其耐药情况。1、涂布菌液制备：用灭菌的生理盐水分别将上述菌样从HP分离培养基稀释至浓度为1×105CFU/mL，涂布1ml样本至实施例1中组1制备的药敏检测培养基。2.待样本涂布均匀后，用无菌镊子按上下左右的顺序依次放入四种药敏片(药敏片上)，药敏片放置的位置对应检测工具上的圆心，轻压，使药敏片紧贴培养基，待测药物为甲硝唑、阿莫西林、克拉霉素、左旋氧氟沙星；其药敏片上的含量依次为5μg、10μg、15μg、5μg。3.培养基放入装有85％N2、5％O2和10％CO2混合气体的密封罐里，37℃培养4天。四天后，根据抑菌圈大小，判断耐药性。所述判断具体为：抑菌圈大于S圈为敏感；抑菌圈小于S圈而大于M圈为中度敏感，抑菌圈小于M圈为耐药。对10株菌的检测结果如表2：表2药敏检测结果备注：表格中S为敏感；M为中度敏感；R为耐药。检测结果表明，在组1培养基与检测卡的配合下，对药物敏感性的检测准确性可达100％，完全符合预期。同时对实施例1中组2和组3培养基的准确性进行检测，其中，组2培养的准确性为90％，组3培养基的准确性为80％。分析认为导致准确性降低的原因可能与营养成分不当，菌株自身生长不佳有关。以上仅是本实用新型的优选实施方式，应当指出，对于本
技术领域：
的普通技术人员来说，在不脱离本实用新型原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本实用新型的保护范围。当前第1页1 2 3