一种用于核酸质谱分析的检测试剂盒的制作方法

本实用新型涉及质谱检测技术领域，特别涉及一种用于核酸质谱分析的检测试剂盒。

背景技术：

MALDI-TOF MS(Matrix Assisted Laser Desorption Ionization Time of Flight mass spectrometry)，即基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪，是20世纪80年代发展起来的一种新型软电离质谱，具有灵敏度高、检测速度快、样本用量少、高通量等特点。MALDI-TOF质谱仪检测的基本原理为分析物样本和基质形成共结晶，当用激光轰击共结晶体的时候，基质吸收能量并将其传递给分析物，辅助分析物分析解吸附并实现离子化，由固态变为气态离子。带电荷的离子，经加速电压通过飞行时间离子分离器，进而被离子检测器所检测。这个过程中，因为离子质量大小不同，飞行到达检测器时间的长短不同，最后将质量不同的离子根据质荷比分离开来，形成质谱图。

MALDI-TOF MS能有效地应用到寡核苷酸的检测上，例如单核苷酸多态性，胞嘧啶甲基化标志物的分析。尤其对于单核苷酸多态性的检测在生物、医学、农学等众多领域发挥着重要作用。相较于其他的研究方法如凝胶电泳、特异性PCR、DNA芯片，MALDI–TOF质谱是一种具备高通量、高精度，又相对简单便捷等优势的一种分析方式。

针对于每一个特定的待测物，最优化的MALDI过程取决于基质的选择和样品制备方法。而在MALDI过程中DNA片段的碎裂化是一种常见的现象，DNA的碎裂化能被碱基的质子化所诱导，导致碱基的丢失，最终导致了完整的DNA片段的信号强度的丢失。而DNA的碎片化主要取决于所使用基质的性质。此外，所有传统有机基质的共同问题是结晶很难均匀，存在“有效点”的问题，导致实验结果重复性很差。同时因为对核酸样品解吸电离作用效果的不够理想，只能检测特定分子量范围内的核酸分子。

所以基于MALDI-TOF质谱的核酸分析，为了解决传统的试剂盒存在的不足，对更高效、更灵敏、重复性更好的检测试剂盒仍有着迫切的需求。

技术实现要素：

本实用新型的目的在于，提供一种用于核酸质谱分析的检测试剂盒。

本实用新型的技术方案：一种用于核酸质谱分析的检测试剂盒，包括盒体以及盒盖，所述盒盖与盒体之间相互铰接，所述盒盖上连接有盒盖卡扣，所述盒体上连接有盒体卡扣，所述盒体为长方体结构，所述盒体上设置有泡沫垫层，所述泡沫垫层上设置有组分Ⅰ放置区、组分Ⅱ放置区和组分Ⅲ放置区，所述组分Ⅰ放置区、组分Ⅱ放置区和组分Ⅲ放置区均开设有试管槽，所述试管槽内放置有试剂管，所述盒盖上设置有海绵垫。

上述的一种用于核酸质谱分析的检测试剂盒中，所述盒盖卡扣为L型结构，所述盒盖卡扣的内壁上固定安装有定位板，所述定位板的上端铰接有限位板，所述限位板与定位板之间连接有弹簧，所述限位板的顶部固定连接有延伸板，所述限位板的外侧壁上固定连接有卡块，所述延伸板嵌设在盒盖卡扣的端面上，且与盒盖卡扣滑动连接。

前述的一种用于核酸质谱分析的检测试剂盒中，所述盒体卡扣内设置有空槽，所述空槽的顶部固定安装有楔块，所述空槽的底部开设有定位槽。

前述的一种用于核酸质谱分析的检测试剂盒中，所述试管槽均为圆柱状结构，所述组分Ⅰ放置区的试管槽和组分Ⅲ放置区的试管槽的直径均为1cm，深度均为2.7cm。

前述的一种用于核酸质谱分析的检测试剂盒中，所述组分Ⅱ放置区上的试管槽直径为1.5cm，深度为4cm。

前述的一种用于核酸质谱分析的检测试剂盒中，所述组分Ⅰ放置区中的试剂管盛装了纯化水，体积在1-1.2mL之间。所述组分Ⅱ放置区中的试剂管盛装了纳米基质材料，所述组分Ⅲ放置区中的试剂管盛装了乙腈，体积1-1.2mL。

前述的一种用于核酸质谱分析的检测试剂盒中，所述海绵垫包括有组分Ⅰ试剂管海绵垫、组分Ⅱ试剂管海绵垫以及组分Ⅲ试剂管海绵垫，所述海绵垫与试管槽的位置相互对应。

与现有技术相比，本实用新型采用创新设计的包装结构，盒盖上加设了海绵垫，有利于试剂的运输稳定，存取方便，试剂盒内作为试剂管放置区进行分区设置，使用过程中，直接使用不同组分放置区试剂管进行震荡混匀，设计合理，使用方便。

本实用新型的盒体与和盒盖之间通过卡扣件连接，安装方便，连接稳定，在运输中可以起到很好的保护作用。

附图说明

图1是本实用新型整体结构的俯视图；

图2是本实用新型整体结构的主视图；

图3是本实用新型盖上盒盖之后的试管槽示意图；

图4是本实用新型盒体卡扣的结构示意图；

图5是本实用新型盒盖卡扣的结构示意图；

图6是利用本实用新型进行质谱检测后所得的效果图。

图中：1-盒体；2-泡沫垫层；3-组分Ⅰ放置区；4-组分Ⅱ放置区；5-Ⅲ放置区；6-组分Ⅰ试剂管海绵垫；7-组分Ⅱ试剂管海绵垫；8-组分Ⅲ试剂管海绵垫；9-盒盖；10-盒盖卡扣；11-盒体卡扣；12-楔块；13-定位槽；14-卡块；15-定位板；16-限位板；17-延伸板。

具体实施方式

下面结合附图和实施例对本实用新型作进一步的说明，但并不作为对本实用新型限制的依据。

实施例：如图1-4所示，本实用新型的一种用于核酸质谱分析的检测试剂盒，包括盒体1和盒盖9，盒盖9和盒体1为翻盖扣合式的连接结构，盒盖9的一侧与盒体1的一侧通过铰链铰接，盒体1和盒盖9均为长方体结构。其中，盒体1的长宽高为12*8*5(单位：cm)，盒盖9的长宽高为12*8*1.5(单位：cm)。盒盖9的一侧固定连接有盒盖卡扣10，盒体1上连接有盒体卡扣11。

盒盖卡扣10为L型结构，盒盖卡扣10的内壁上固定安装有定位板15，定位板15的上端铰接有限位板16，限位板6与定位板15之间设置有弹簧，弹簧的一端与限位板6的底端面固定连接，另一端与定位板的外侧面固定连接。

限位板16的顶部固定连接有延伸板17，限位板16的外侧壁上固定连接有卡块14，延伸板17嵌设在盒盖9卡扣10的端面上，且与盒盖卡扣10本体滑动连接(如图5所示)。

盒体卡扣11内设置有空槽，空槽的顶部固定安装有楔块12，空槽的底部开设有定位槽13。

在实际使用中，盒盖9与盒体1之间通过盒盖卡扣10以及盒体卡扣11进行扣合，两个卡扣进行卡接时，首先下压延伸板17，确保限位板16能够进入到盒体卡扣11的空槽中，并将定位板15置入定位槽13内，最后松开延伸板17，限位板16在弹簧的作用下弹起，其外侧的卡块14弹出至楔块12的两侧，并被空槽的顶壁所限位，两个卡扣完成卡接。

打开盒盖9时，首先下压延伸板17，卡块14向下偏移，再将盒盖卡扣10向上提起即可。

盒体上设置有泡沫垫层2，泡沫垫层2上设置有组分Ⅰ放置区3、组分Ⅱ放置区4和组分Ⅲ放置区5，组分Ⅰ放置区3、组分Ⅱ放置区4以及组分Ⅲ放置区5上均开设有两个试管槽，组分Ⅰ放置区3和组分Ⅲ放置区5试管槽直径为1cm，深度为2.7cm，组分Ⅱ放置区4试管槽直径为1.5cm，深度为4cm。在盒盖上设有六个海绵垫，海绵垫包括有组分Ⅰ试剂管海绵垫6、组分Ⅱ试剂管海绵垫7以及组分Ⅲ试剂管海绵垫8，所述海绵垫与试管槽的位置相互对应，在合上盒盖后，各放置区的海绵垫与分别覆盖在相对应的试管口上，保证试剂管的放置稳定。

在实际运用过程中，在组分Ⅰ放置区3试剂管中盛装了纯化水，体积1-1.2mL。组分Ⅱ放置区4试剂管中盛装了纳米基质材料。组分Ⅲ放置区5试剂管中盛装了乙腈，体积1-1.2mL。

(1)将寡核苷酸标准样品点样于靶板上，自然干燥。寡核苷酸标准样品由生工生物工程(上海)股份有限公司合成。

(2)将组分Ⅱ试剂管置于离心机中，500rpm离心5min，然后移取1mL组分Ⅰ试剂管中的纯化水于组分Ⅱ试剂管中，移取1mL组分Ⅲ试剂管中乙腈于组分Ⅱ试剂管中，初步混匀，超声20分钟，涡旋震荡器震荡1分钟，得到分散均匀的质谱分析试剂。然后取1μL质谱分析试剂点于靶板上干燥的寡核苷酸样品位置，自然干燥。

(3)将靶板放入MALDI-TOF质谱仪，进行质谱检测。

激光解吸电离质谱仪为bruker autoflexTM speed MALDI-TOF(TOF)质谱，采用smartbeam-II激光器，波长为355nm。使用本实用新型检测核酸样品效果图如图6所示(其中横坐标表示质荷比；纵坐标表示质谱强度)。