1.一种从干燥种子获得植物线粒体的方法,所述方法包括:
a.获得多个干燥种子;
b.将所述多个干燥种子磨成粉末;
c.从步骤(b)的粉末中取样品,并使所述样品与均化缓冲液接触,并任选地将接触的样品孵育;
d.离心步骤(c)的接触的样品,离心速度足以使细胞核和细胞碎片沉淀,从而获得包含植物线粒体的上清液;并且
e.用一定浓度的dna酶处理步骤(d)的上清液;
其中包含植物线粒体的上清液适合用于下游过程。
2.如权利要求1所述的方法,其中所述线粒体用于线粒体dna(“mtdna”)提取。
3.如权利要求1所述的方法,其中所述干燥种子是小麦、大麦、玉米、稻、向日葵或其他农作物种子。
4.如权利要求1所述的方法,其中所述下游过程是基因分型或基因纯度测试。
5.如权利要求1所述的方法,其中所述植物线粒体是小麦线粒体。
6.一种用于从多个成批干燥种子中获得植物线粒体的高通量方法,所述方法包括:
a.获得多个干燥种子批;
b.将所述多个干燥种子批磨成分开的粉末;
c.从步骤(b)的分开的粉末中的每一个中取样品,并将每个样品放入采样板的单独孔中;
d.将均化缓冲液添加至所述采样板的每个孔中的样品里;
e.离心所述采样板,离心速度足以使细胞核和细胞碎片沉淀,从而获得包含植物线粒体的上清液;
f.将所述上清液转移到新的采样板上;并且
g.用一定浓度的dna酶处理步骤(f)的上清液。
7.如权利要求6所述的方法,其中所述均化缓冲液包含tris和蔗糖。
8.如权利要求7所述的方法,其中所述均化缓冲液包含50mmtris-hclph7.5和0.5m蔗糖。
9.如权利要求6所述的方法,其中步骤(e)的离心在2000xg和4000xg之间。
10.如权利要求6所述的方法,其中所述采样板是24孔板、或48孔板或96孔板。
11.一种从干燥种子的相同样品中获得植物基因组dna和植物线粒体dna的方法,所述方法包括:
a.获得多个干燥种子;
b.将所述多个干燥种子磨成粉末;
c.从步骤(b)的粉末中选择样品,并使所述样品与均化缓冲液接触;
d.离心步骤(c)的接触的样品,离心速度足以使细胞核和细胞碎片沉淀,从而获得包含亚细胞器的上清液;
e.去除步骤(d)的上清液;
f.用合适浓度的dna酶处理步骤(d)的上清液;
g.从步骤(f)的经处理的上清液中提取细胞器dna;并且
h.重悬浮步骤(d)的沉淀的细胞核和细胞碎片,从而获得包含重悬浮的细胞核dna的溶液;
其中步骤(f)的经dna酶处理的上清液包含适用于细胞器基因分型的亚细胞植物细胞器,并且其中步骤(h)的包含重悬浮的细胞核dna的溶液适用于细胞核基因分型。