细胞的制作方法

文档序号:21697847发布日期:2020-07-31 22:48阅读:来源:国知局

技术特征:

1.细胞,其包含:

(i)嵌合抗原受体(car)或转基因t细胞受体(tcr);和

(ii)嵌合tnf受体(tnfr),其包含(a)能够结合tnfr配体的结合结构域;和(b)tnfr信号传导结构域。

2.根据权利要求1的细胞,其中所述抗原结合结构域包含tnfr的配体结合结构域。

3.根据权利要求1或2的细胞,其中所述抗原结合结构域包含d3r、hvem、cd27、cd40、rank或fn14的配体结合结构域。

4.根据前述权利要求中任一项的细胞,其中所述信号传导结构域是激活信号传导结构域,如能够经由tnfr相关因子(traf)进行信号传导的信号传导结构域。

5.根据前述权利要求中任一项的细胞,其中所述信号传导结构域包含4-1bb、ox40或gitr胞内域的信号传导部分。

6.根据前述权利要求中任一项的细胞,其中所述信号传导结构域包含4-1bb胞内域的信号传导部分。

7.根据前述权利要求中任一项的细胞,其中所述信号传导结构域不能在所述细胞中产生信号1。

8.根据权利要求7的细胞,其中所述信号传导结构域不包含cd3胞内域。

9.根据权利要求8的细胞,所述信号传导结构域不包含cd3zeta胞内域。

10.根据前述权利要求中任一项的细胞,其中所述嵌合tnfr选自d3r-4-1bb(seqidno:1)、hvem-4-1bb(seqidno:2)、cd27-4-1bb(seqidno:3)、rank-4-1bb(seqidno:4)、fn14-4-1bb(seqidno:5)和cd27-d3r(seqidno:6),或与seqidno:1-6的任一项具有至少80%序列一致性的变体。

11.细胞,其包含:

(i)嵌合抗原受体(car)或转基因t细胞受体(tcr);和

(ii)表达tnf受体(tnfr)的外源多核苷酸,所述tnf受体(tnfr)能够在配体与tnfr配体结合结构域结合后向所述细胞提供共刺激。

12.根据权利要求11的细胞,其中所述外源多核苷酸表达cd27或cd40。

13.根据前述权利要求中任一项的细胞,其中所述细胞是alpha-betat细胞、nk细胞、gamma-deltat细胞或细胞因子诱导的杀伤细胞。

14.嵌合tnf受体(tnfr),其包含(a)能够结合tnfr配体的结合结构域;和(b)不能产生信号1的tnfr信号传导结构域。

15.根据权利要求14的嵌合tnfr,其中所述信号传导结构域不包含cd3胞内域。

16.根据权利要求14的嵌合tnfr,其中所述信号传导结构域不包含cd3zeta胞内域。

17.根据权利要求13至15中任一项的嵌合tnfr,其中所述抗原结合结构域不能结合cd70。

18.核酸构建体,其包含:

(i)第一核酸序列,其编码i)嵌合抗原受体(car)或转基因t细胞受体(tcr);和

(ii)第二核酸序列,其编码嵌合tnf受体(tnfr),所述嵌合tnf受体(tnfr)包含(a)能够结合tnfr配体的结合结构域;和(b)tnfr信号传导结构域。

19.根据权利要求17的核酸构建体,其中所述第二核酸序列编码如权利要求1至16中任一项所定义的嵌合tnfr。

20.根据权利要求18的核酸构建体,其中所述第一和第二核酸序列由共表达位点分开。

21.核酸序列,其编码根据权利要求13至16中任一项的嵌合tnf受体(tnfr)。

22.核酸序列的试剂盒,其包含:

(i)第一核酸序列,其编码i)嵌合抗原受体(car)或转基因t细胞受体(tcr);和

(ii)第二核酸序列,其编码嵌合tnf受体(tnfr),所述嵌合tnf受体(tnfr)包含(a)能够结合tnfr配体的结合结构域;和(b)如权利要求1至17中任一项所定义的tnfr信号传导结构域。

23.载体,其包含根据权利要求18至20中任一项的核酸构建体。

24.载体的试剂盒,其包含:

(i)第一载体,其包含编码i)嵌合抗原受体(car)或转基因t细胞受体(tcr)的核酸序列;和

(ii)第二载体,其包含编码嵌合tnf受体(tnfr)的核酸序列,所述嵌合tnf受体(tnfr)包含(a)能够结合tnfr配体的结合结构域;和(b)如权利要求1至17中任一项所定义的tnfr信号传导结构域。

25.药物组合物,其包含多个根据权利要求1至13中任一项的细胞,根据权利要求18至21中任一项的核酸构建体,如权利要求22中所定义的第一核酸序列和第二核酸序列;根据权利要求23的载体或如权利要求24中所定义的第一和第二载体。

26.根据权利要求25的药物组合物,其用于治疗和/或预防疾病。

27.治疗和/或预防疾病的方法,其包括将根据权利要求25的药物组合物施用于有此需要的受试者的步骤。

28.根据权利要求27的方法,其包括以下步骤:

(i)分离含有细胞的样品;

(ii)用如权利要求18至20中任一项所定义的核酸构建体,根据权利要求23的载体或如权利要求24中所定义的第一和第二载体对所述细胞进行转导或转染;和

(iii)将来自(ii)的细胞施用于受试者。

29.根据权利要求28的方法,其中所述细胞是自体的。

30.根据权利要求28的方法,其中所述细胞是同种异体的。

31.根据权利要求25的药物组合物在制备用于治疗和/或预防疾病的药物中的用途。

32.根据权利要求26使用的药物组合物,根据权利要求27至30中任一项的方法,或根据权利要求31的用途,其中所述疾病是癌症。

33.用于制备根据权利要求1至13中任一项的细胞的方法,其包括将以下引入到所述细胞中的步骤:根据权利要求18至20中任一项的核酸构建体,如权利要求22中所定义的第一核酸序列和第二核酸序列,根据权利要求23的载体或如权利要求24中所定义的第一和第二载体。

34.根据权利要求33的方法,其中所述细胞来自从受试者分离的样品。


技术总结
本发明涉及细胞,其包含:(i)嵌合抗原受体(CAR)或转基因T细胞受体(TCR);和(ii)嵌合TNF受体(TNFR),其包含(a)能够结合TNFR配体的结合结构域;和(b)TNFR信号传导结构域。

技术研发人员:M.普勒;M.D.佩鲁塔
受保护的技术使用者:奥托路斯有限公司
技术研发日:2018.12.14
技术公布日:2020.07.31
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