本发明涉及玉米肽制备技术领域，特别是涉及一种玉米肽的制备方法。
背景技术：
玉米肽是从玉米中提取的蛋白质，经过定向酶切及特定小肽分离技术获得的小分子多肽物质。通用的方法是对玉米蛋白进行酶水解而获得玉米活性肽。实际生产中玉米蛋白常以玉米蛋白粉(cgm)的形式存在，玉米蛋白按溶解性不同可分为4类，即醇溶蛋白、谷蛋白、球蛋白和白蛋白，其中醇溶蛋白含量最多，约40％。醇溶蛋白中又以α-醇溶蛋白为主，占75％-85％。
通常直接以玉米蛋白粉作为酶解底物，有时为了产物纯净或序列特殊，也采用α-醇溶蛋白为底物。该方法的主要不足在于玉米蛋白中的醇溶蛋白组分不能溶解于水中，蛋白酶不能对醇溶蛋白进行酶解，大部分的玉米蛋白没有酶解。
技术实现要素：
发明目的：针对上述现有技术，提供一种玉米肽的制备方法，以玉米蛋白粉为基质，应用醋酸杆菌种子液发酵法制备玉米肽，开发出玉米蛋白粉水解度高的方法。
为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
一种玉米肽的制备方法，包括如下步骤：
步骤1：向玉米蛋白粉中加入乙醇水溶液配置底液，水浸泡20-24h后，100-120℃蒸煮10-20min，取出冷却至一定温度，即得玉米蛋白粉质量分数为5％的发酵原料，备用；
步骤2：取步骤1得到的质量分数为5％的发酵原料，接种醋酸杆菌种子液，置于培养箱中发酵水解，取出置100-120℃水浴中加热10-20min灭酶，然后迅速冷却至室温，4000-6000r/min离心10-15min得上清液，即蛋白水解液；
步骤3：将步骤2所得蛋白水解液进行凝胶层析分离，收集洗脱液；
步骤4：冷冻干燥洗脱液，得到玉米肽。
优选的，所述底液的浓度为0.05-0.1kg/l。
优选的，步骤2中，所述醋酸杆菌种子液的接种量为乙醇水溶液体积的8-10％。
优选的，步骤2中，所述发酵水解的温度为40-60℃，时间为12-24h。
优选的，步骤3中，所述凝胶层析分离具体步骤为：将蛋白水解液过凝胶层析柱，去离子水洗脱，收集洗脱液。
优选的，所述去离子水洗脱的流速为1-2ml/min。
有益效果：以玉米蛋白粉为基质，应用醋酸杆菌种子液发酵制备玉米肽，在此条件下发酵，玉米蛋白粉的水解度可达到11.17％，该方法工艺操作简单，成本低，市场前景良好，适于推广应用。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有付出创造性劳动的前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1：
本发明提供一种玉米肽的制备方法，包括如下步骤：
步骤1：向玉米蛋白粉中加入乙醇水溶液配置底液，水浸泡20:后，100℃蒸煮10min，取出冷却至一定温度，即得玉米蛋白粉质量分数为5％的发酵原料，备用；
步骤2：取步骤1得到的质量分数为5％的发酵原料，接种醋酸杆菌种子液，置于培养箱中发酵水解，取出置100℃水浴中加热10min灭酶，然后迅速冷却至室温，4000r/min离心10min得上清液，即蛋白水解液；
步骤3：将步骤2所得蛋白水解液进行凝胶层析分离，收集洗脱液；
步骤4：冷冻干燥洗脱液，得到玉米肽。
其中，所述底液的浓度为0.05kg/l。所述醋酸杆菌种子液的接种量为乙醇水溶液体积的8％。所述发酵水解的温度为40℃，时间为12h。所述凝胶层析分离具体步骤为：将蛋白水解液过凝胶层析柱，去离子水洗脱，收集洗脱液。所述去离子水洗脱的流速为1ml/min。
实施例2：
本发明提供一种玉米肽的制备方法，包括如下步骤：
步骤1：向玉米蛋白粉中加入乙醇水溶液配置底液，水浸泡24h后，120℃蒸煮20min，取出冷却至一定温度，即得玉米蛋白粉质量分数为5％的发酵原料，备用；
步骤2：取步骤1得到的质量分数为5％的发酵原料，接种醋酸杆菌种子液，置于培养箱中发酵水解，取出置120℃水浴中加热20min灭酶，然后迅速冷却至室温，6000r/min离心115min得上清液，即蛋白水解液；
步骤3：将步骤2所得蛋白水解液进行凝胶层析分离，收集洗脱液；
步骤4：冷冻干燥洗脱液，得到玉米肽。
优选的，所述底液的浓度为0.1kg/l。
其中，所述醋酸杆菌种子液的接种量为乙醇水溶液体积的10％。步骤2中，所述发酵水解的温度为60℃，时间为24h。所述凝胶层析分离具体步骤为：将蛋白水解液过凝胶层析柱，去离子水洗脱，收集洗脱液。所述去离子水洗脱的流速为2ml/min。
在本发明上述各实施例中，实施例的序号和/或先后顺序仅仅便于描述，不代表实施例的优劣。对各个实施例的描述都各有侧重，某个实施例中没有详述的部分，可以参见其他实施例的相关描述。
应该强调，术语“包括/包含”在本文使用时指特征、要素、步骤或组件的存在，但并不排除一个或更多个其它特征、要素、步骤或组件的存在或附加。
最后应说明的是：虽然以上已经详细说明了本发明及其优点，但是应当理解在不超出由所附的权利要求所限定的本发明的精神和范围的情况下可以进行各种改变、替代和变换。而且，本发明的范围不仅限于说明书所描述的过程、设备、手段、方法和步骤的具体实施例。本领域内的普通技术人员从本发明的公开内容将容易理解，根据本发明可以使用执行与在此所述的相应实施例基本相同的功能或者获得与其基本相同的结果的、现有和将来要被开发的过程、设备、手段、方法或者步骤。因此，所附的权利要求旨在它们的范围内包括这样的过程、设备、手段、方法或者步骤。