植物生产人霍乱毒素B亚基(CTB)与胰岛素原的融合蛋白速效口服降糖胶囊的应用的制作方法

文档序号:18733778发布日期:2019-09-21 00:53阅读:来源:国知局

技术特征:

1.人霍乱毒素B亚基与Humalog胰岛素原的融合蛋白,其特征在于,其具有:

(Ⅰ)、如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列;或

(Ⅱ)、如(Ⅰ)所述的氨基酸序列经取代、缺失或添加一个或多个氨基酸获得的氨基酸序列,且与(Ⅰ)所示的氨基酸序列功能相同或相似的氨基酸序列;或

(III)、与(Ⅰ)或(Ⅱ)所述序列至少有80%同源性的氨基酸序列。

2.编码如权利要求1所述融合蛋白的核苷酸,其特征在于,具有

(Ⅰ)、如SEQ ID No.2所示的核苷酸序列;或

(Ⅱ)、如SEQ ID 2所示的核苷酸序列的互补核苷酸序列;或

(Ⅲ)、与(Ⅰ)或(Ⅱ)的核苷酸序列编码相同蛋白质,但因遗传密码的简并性而与(Ⅰ)或(Ⅱ)的核苷酸序列不同的核苷酸序列;或

(Ⅳ)、与(Ⅰ)、(Ⅱ)或(Ⅲ)所示的核苷酸序列经取代、缺失或添加一个或多个核苷酸序列获得的核苷酸序列,且与(Ⅰ)、(Ⅱ)或(Ⅲ)所示的核苷酸序列功能相同或相似的核苷酸序列;或

(V)、与(Ⅰ)、(Ⅱ)、(Ⅲ)或(Ⅳ)所述核苷酸序列至少有80%同源性的核苷酸序列。

3.表达载体,其特征在于,包括如权利要求2所述的核苷酸以及待转化载体。

4.如权利要求3所述的表达载体,其特征在于,所述待转化载体为叶绿体表达载体。

5.如权利要求3或4所述的表达载体的构建方法,其特征在于,包括如下步骤:

步骤1:分别将所述人霍乱毒素B亚基与Humalog胰岛素原的融合蛋白的密码子优化为植物偏好的密码子,其核苷酸序列如SEQ ID No.2所示;

步骤2:将所述核苷酸序列克隆到pUC57载体中,获得pHuma。

6.如权利要求3或4所述的表达载体或植物在表达人霍乱毒素B亚基与Humalog胰岛素原的融合蛋白或制备包含所述融合蛋白的药物中的应用;所述植物选自生菜、菠菜、番茄、萝卜、白菜、玉米、大豆、小麦或烟草;所述植物的器官选自种子、叶、根茎或整株植物。

7.如权利要求6所述的应用,其特征在于,所述药物为降糖的口服制剂。

8.宿主,其特征在于,转化有如权利要求3或4所述表达载体的植物或微生物;所述植物选自生菜、菠菜、番茄、萝卜、白菜、玉米、大豆、小麦或烟草;所述植物的器官选自种子、叶、根茎或整株植物。

9.药物,其特征在于,包括如权利要求1所述的融合蛋白以及药学上可接受的辅料。

10.如权利要求9所述的药物,其特征在于,所述药物为降糖的口服制剂。

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