技术特征：
1.一种高效液相色谱技术纯化制备胰岛素的方法，具体步骤如下：(1)样品预处理：将胰岛素样品用缓冲盐水溶液或有机溶剂与缓冲盐水溶液的混合溶液溶解，完全溶解后过滤；(2)工艺条件的优化：采用非线性色谱方法学进行胰岛素的高效液相色谱法纯化条件的优化，具体为：对(1)中胰岛素样品进行高效液相制备色谱条件摸索及峰展宽的比较，筛选出色谱柱填料、载样量、流动相包括缓冲盐水溶液种类及浓度，ph值，有机相、流动相梯度、流速的工艺参数范围，得出优化的工艺条件；(3)纯化制备：采用(2)中优化的工艺条件对(1)中预处理后的胰岛素样品进行纯化分离制备，收集色谱峰馏分，对馏分进行相关蛋白与高分子蛋白分析检测，合并合格馏分；(4)馏分后处理：对(3)得到的合格馏分进行后处理，即得到高纯度的胰岛素产品。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(1)中胰岛素样品的状态为固体粉末或液体；胰岛素样品的色谱纯度为35-98％；胰岛素蛋白的浓度为0.1-100mg/ml；胰岛素样品的种类为人胰岛素、动物胰岛素、甘精胰岛素、门冬胰岛素、赖脯胰岛素、谷赖胰岛素、地特胰岛素或德谷胰岛素或者为它们类似物。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(2)中优化的工艺参数中有机相种类为有机溶剂选自甲醇、乙醇、乙腈或者异丙醇；所述缓冲盐水溶液为na
+
、k
+
、li
+
、h
+
、et3nh
+
、nh
4+
之一种或两种以上为阳离子，po
43-、hpo
42-、h2po
43-、ch3coo-、hcoo-、cl-、clo
4-、hco
3-、so
32-之一种或两种以上为阴离子的盐溶液；所述缓冲盐水溶液浓度为1-1000mm，缓冲盐水溶液ph值为2.0-11.0。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(2)中胰岛素色谱纯化的优化条件中色谱柱的载样量为固定相重量的0.01-30％；色谱柱的上样和洗脱流速为20-350cm/h；起始有机溶剂的含量为5-40％；梯度洗脱为流动相中有机相与缓冲盐水溶液的体积比(v/v)范围由5:95-80:20在20-200min内变为40:60-95:5，所述洗脱的方式为等度洗脱和梯度洗脱，或是两种方式联合的洗脱方案。5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(2)中高效反相色谱柱的填料基质为硅胶或高分子聚合物中的一种；填料配基的碳原子数为4-30的正链烷基中的一种或两种以上；填料粒径为5-100μm，孔径为比表面积为100～500m2/g；色谱柱内径为4.6-1600mm，柱床高度为50-1000mm。6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(3)中根据非线性色谱方法学优化得到的胰岛素反相色谱纯化分离工艺参数包括流动相中有机相种类优选乙腈及乙醇，浓度优选为45-55％；缓冲盐水溶液种类优选乙酸铵和磷酸二氢钠体系，浓度优选50-75mm，ph值优选为4.5-10.0。7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，不同种类胰岛素样品的ph选择不同：人胰岛素、赖脯胰岛素、谷赖胰岛素、猪胰岛素优选ph4.5或6.5；门冬胰岛素优选ph5.9-6.0；甘精胰岛素优选ph5.2或10.0；地特胰岛素、德谷胰岛素优选ph3.5-4.0。8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(3)中胰岛素色谱纯化优化工艺参数包括填料基质优选硅胶，配基优选为c8和c4，填料粒径优选7-15μm，孔径为线性流速优选为50-100cm/h。
9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(3)中胰岛素纯化制备的温度条件为4-50℃；检测波长为210-280nm；馏分接取的方式为紫外峰或体积指导收集。10.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(4)中后处理方式为溶液中加入浓度为10-30％的醋酸锌溶液(v/v)调节ph值或低温真空浓缩沉淀，通过离心和冻干方式得到胰岛素纯品粉末。