一种耐高氨氮HN-AD的菌株分离方法与流程

文档序号:19813828发布日期:2020-01-31 18:48阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种耐高氨氮hn-ad的菌株分离方法,其特征在于,有以下步骤:

1)取垃圾渗滤液作为菌种,富集,得到富集菌种;

2)菌种驯化

2.1低氨氮浓度驯化

富集菌种接入反应器的模拟废水中,设置初始氨氮浓度为100mg/l开始驯化,待模拟废水中的氨氮低于10mg/l后,更换模拟废水,提高模拟废水氨氮浓度至200mg/l,重复,至菌种氨氮耐受浓度为300mg/l,氨氮去除率≥90%,得到低氨氮浓度驯化的菌液;

2.2中氨氮浓度驯化

取步骤2.1所述的低氨氮浓度驯化的菌液,至新的反应器中,将所述菌液的氨氮浓度从300mg/l逐级提高到700mg/l,氨氮去除率≥80%,得到中氨氮浓度驯化的菌液;

2.3高氨氮浓度驯化

取中氨氮浓度驯化的菌液,至新的反应器中,将所述菌液的氨氮浓度从700mg/l逐级提高到1100mg/l,氨氮去除率≥70%,驯化结束,得到耐高氨氮hn-ad的混合菌液;

3)梯度稀释

取步骤2.3所述的混合菌液按10-1-10-7进行梯度稀释,涂布在固体培养基上,于25-35℃培养,待菌落长成后,挑选不同形态的菌落在另一固体培养基上,分区,分别于25-35℃培养,至生成的菌落为不同形态的单一菌落,得到耐高氨氮hn-ad的菌株。

2.根据权利要求1所述的分离方法,其特征在于:步骤1)所述垃圾渗滤液的初始氨氮浓度为1800-2000mg/l。

3.根据权利要求1所述的分离方法,其特征在于:步骤1)所述富集的方法是,取垃圾渗滤液接种于异养硝化培养基,充分摇匀,30℃、170r/min条件下培养,2d后4℃保存,按接种量为5%,将富集菌液接种于异养硝化培养基上,相同条件富集传代3次。

4.根据权利要求1所述的分离方法,其特征在于:步骤2)低氨氮浓度驯化中去除氨氮的时间为2~3天;中氨氮浓度驯化中去除氨氮的时间为4~5天;高氨氮浓度驯化中去除氨氮的时间为6~7天。

5.根据权利要求1所述的分离方法,其特征在于:步骤2.1所述模拟废水的碳氮比为10-20:1,ph为7.0-11.0。

6.根据权利要求1所述的分离方法,其特征在于:步骤2.1所述反应器由恒温加热搅拌器、容器、气泵组成。

7.根据权利要求1所述的分离方法,其特征在于:所述分离培养基由c6h5o7na311.47-45.87g/l,(nh4)2so43.77-7.54g/l,微量元素50ml/l组成;加水混合灭菌溶解制得,碳氮比为10-20:1。

8.根据权利要求1所述的分离方法,其特征在于:所述固体培养基由c6h5o7na311.47-45.87g/l,(nh4)2so43.77-7.54g/l,15-20g/l琼脂粉,微量元素50ml/l组成;加水混合灭菌溶解制得,碳氮比为10-20:1。

9.根据权利要求3所述的分离方法,其特征在于:所述异养硝化培养基由c6h5o7na31.43-31.53g/l,(nh4)2so40.47-5.19g/l,微量元素50.0ml/l,加水混合灭菌溶解制得,碳氮比为10-20:1。

10.根据权利要求7-9任一所述的分离方法,其特征在于:所述微量元素组成为:mgso4.7h2o2g/l,mnso4.h2o0.1g/l,cacl21.5g/l,feso4.7h2o0.1g/l,k2hpo45.0g/l。

当前第2页1 2 3 
网友询问留言 已有0条留言
  • 还没有人留言评论。精彩留言会获得点赞!
1