高通量高效细胞转染的方法及装置与流程

文档序号:26003518发布日期:2021-07-23 21:21阅读:来源:国知局

技术特征:

1.将有效载荷导入细胞的方法,所述方法包括:

将细胞从第一培养箱引导至包含多个微流体装置的组件;

将细胞从细胞培养基中驱入电穿孔介质;

以鞘流结构向电穿孔介质中的细胞施加电场,其中电穿孔介质在中央流中流动;

转移或允许有效载荷转移至细胞中。

2.根据权利要求1所述的方法,还包括将含有有效载荷的细胞从电穿孔流体驱动到细胞培养液中。

3.根据权利要求2所述的方法,还包括将含有所述有效载荷的细胞储存在第二培养箱中。

4.根据权利要求1所述的方法,还包括将含有所述有效载荷的细胞施用于需要诊断、预防或治疗的受试者。

5.制备用于免疫疗法的细胞的方法,所述方法包括:

将细胞从第一缓冲液转移到电穿孔缓冲液中,其中第一缓冲液为细胞培养基;

通过电穿孔使细胞透化;

允许有效载荷转移到透化的细胞中;

将含有有效载荷的细胞传送到第二缓冲液中,

其中,所述方法以自动且连续的流动模式进行,并且

其中,吞吐量可以为每分钟至少400万个细胞。

6.用于将货物自动且连续地流动以转移到细胞中的系统,所述系统包括:

用于储存细胞的第一培养箱;

电穿孔组件,包括支撑以平行结构配置的多个微流体通道的层;

第一缓冲液交换器,用于将细胞从细胞培养基驱入电穿孔介质中;

第二缓冲液交换器,用于将细胞从电穿孔介质驱入培养基;和

控制器。

7.根据权利要求6所述的系统,还包括用于将电穿孔缓冲液输送至电穿孔组件、用于将细胞输送至第一缓冲液交换器和/或用于将细胞从第二缓冲液交换器输送至第二培养箱的泵系统。

8.根据权利要求6所述的系统,其中每个微流体通道具有三叉入口和出口。

9.根据权利要求6所述的系统,其中所述电穿孔组件还包括电极层。

10.根据权利要求6所述的系统,其中每个微流体通道被配置为支撑中央流和侧鞘流。

11.一种电穿孔组件,包括:

通道层,包括以平行结构配置的至少两个微流体通道;

电极层,包括用于每个微流体通道的一对电极;

端口层,用于流体连接到微流体通道的三叉入口和出口,

其中,所述层以层压型结构堆叠。

12.根据权利要求11所述的电穿孔组件,还包括窗口层和/或电极框架层。

13.根据权利要求11所述的电穿孔组件,其中所述层彼此粘附。

14.应用权利要求11所述的电穿孔组件将货物转移到细胞中的方法。

15.将货物批量转移到细胞中的系统,包括:

将细胞维持在所需温度的培养箱;

防止细胞在培养箱中沉淀的搅拌设备;

将细胞转移至电穿孔缓冲液中的缓冲液交换器;

对电穿孔缓冲液中的细胞进行电穿孔以转移货物的流式电穿孔装置;和

从流式电穿孔装置中接收细胞的培养箱。

16.根据权利要求15所述的系统,其中,所述搅拌设备包括在细胞贮存器内的叶轮。

17.根据权利要求15所述的系统,还包括在所述培养箱和所述缓冲液交换器之间的泵。

18.根据权利要求17所述的系统,还包括使电穿孔缓冲液流入所述缓冲液交换器的泵。

19.根据权利要求15所述的系统,还包括在所述培养箱和所述缓冲液交换器之间的流体电容器。

20.根据权利要求15所述的系统,还包括声波换能器和声波驱动器,用于驱动所述缓冲液交换器中的缓冲液交换。


技术总结
遗传物质和其他材料向细胞的转移是在无需人工干预、自动化、高通量、连续的过程中进行的。使用微流体动力学鞘流结构的系统包括将细胞从含有细胞培养基的侧流输送至包含电穿孔缓冲液的中央流的装置。电穿孔可以在组件中进行,在该组件中,两个或多个微流体通道以平行结构配置提供,并且在该组件中,各种层可以堆叠在一起以形成层压型结构。

技术研发人员:维沙尔·坦登;查尔斯·A·利桑德罗;詹娜·L·巴列斯特里尼;乔纳森·R·科佩塔;帕特里夏·A·斯维尔克
受保护的技术使用者:查尔斯·斯塔克·德雷珀实验室有限公司
技术研发日:2019.08.30
技术公布日:2021.07.23
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