1.一种在生物反应器中培养细胞的方法,其包括提供进入/来自生物反应器的气体的质量转移,而不在所述生物反应器内部生成气泡。
2.权利要求1的方法,其中所述生物反应器是灌注生物反应器。
3.权利要求1的方法,其中所述生物反应器是分批补料生物反应器。
4.权利要求1的方法,其中所述进入/来自生物反应器的气体的质量转移由气体转移模块提供。
5.权利要求4的方法,其中所述气体转移模块包括无孔膜。
6.权利要求5的方法,其中所述无孔膜是聚合物、金属或陶瓷。
7.权利要求6的方法,其中所述聚合物包含硅酮橡胶均聚物、聚二甲基硅氧烷(pdms)或硅酮-聚碳酸酯共聚物。权利要求5的方法,其中所述无孔膜包括多根中空纤维。
8.权利要求8的方法,其中所述气体转移模块包括穿过所述中空纤维、用于一种或多种气体的通过的第一流动路径,以及围绕所述中空纤维、用于细胞培养基和/或细胞的流动的第二流动路径。
9.权利要求8的方法,其中所述气体转移模块位于所述生物反应器的外部。
10.权利要求8的方法,其中所述多根中空纤维提供用于培养基和细胞行进穿过分开所述中空纤维的空间的流动路径。
11.权利要求12的方法,其中所述空间是同质的或异质的。
12.权利要求10的方法,其中所述空间具有足够的尺寸,以允许细胞通过而不对细胞引起剪切力。
13.权利要求10的方法,其中所述空间包含约15μm至约2000μm的距离。
14.权利要求13的方法,其中所述空间包含15-30μm、20-40μm、30-60μm、40-80μm、60-120μm、80-160μm、100-200μm、150-300μm、200-400μm、200-500μm、200-600μm、200-700μm、200-800μm、200-900μm、200-1000μm、或500-2000μm或其组合的距离。
15.权利要求9的方法,其中所述细胞培养基和/或细胞的流动包括切向流动、轴向流动或其组合。
16.权利要求9的方法,其中所述细胞培养基和/或细胞的流动是这样的速率,其足以维持培养物同质性而不对细胞引起剪切力。
17.权利要求1的方法,其中所述气体是空气、二氧化碳、氧和/或氮、或其混合物。
18.权利要求1的方法,其中所述生物反应器包含以下的细胞密度:约20x106个细胞/ml、约30x106个细胞/ml、约40x106个细胞/ml、约50x106个细胞/ml、约60x106个细胞/ml、约70x106个细胞/ml、约80x106个细胞/ml、约90x106个细胞/ml、约100x106个细胞/ml、约110x106个细胞/ml、约120x106个细胞/ml、约130x106个细胞/ml、约140x106个细胞/ml、约150x106个细胞/ml、约160x106个细胞/ml、约170x106个细胞/ml、或约180x106个细胞/ml。
19.权利要求1的方法,其中所述方法避免了泡沫的产生。
20.权利要求1的方法,其中所述生物反应器不包含顶部空间或基本上不包含顶部空间。权利要求1的方法,其中所述方法在细胞培养期间不需要消泡剂。
21.权利要求4的方法,其中所述生物反应器包括两个或更多个气体转移模块。
22.权利要求21的方法,其中所述两个或更多个气体转移模块提供不同气体的质量转移,所述不同气体包括空气、氧、二氧化碳或氮气。
23.一种用于高密度细胞培养的生物反应器系统,其包括用于在细胞培养基中生长细胞的生物反应器器皿、以及与所述生物反应器器皿流体连通的液体流动路径,其中所述液体流动路径形成所述生物反应器器皿外部的回路,用于通过第一膜气体转移模块和第二膜气体转移模块将细胞培养基易位。
24.权利要求23的生物反应器系统,其中所述第一膜气体转移模块用于将氧加入所述细胞培养基中。
25.权利要求23的生物反应器系统,其中所述第二膜气体转移模块用于从所述细胞培养基中脱除二氧化碳。
26.权利要求24的生物反应器系统,其中所述第一膜气体转移模块包括氧流动路径和细胞培养基流动路径,其中所述气体流动路径和细胞培养物流动路径通过透气膜分开。
27.权利要求25的生物反应器系统,其中所述第一膜气体转移模块包括空气/二氧化碳流动路径和细胞培养基流动路径,其中所述空气/二氧化碳流动路径和细胞培养物流动路径通过透气膜分开。
28.权利要求23的生物反应器系统,其中形成回路的所述液体流动路径进一步包括一个或多个另外元件。
29.权利要求28的生物反应器系统,其中所述一个或多个另外元件是细胞收获过滤器。
30.权利要求28的生物反应器系统,其中所述一个或多个另外元件是灌注泵。
31.权利要求23的生物反应器系统,其进一步包括氧源。
32.权利要求23的生物反应器系统,其进一步包括空气/二氧化碳混合物源。
33.权利要求24的生物反应器系统,其进一步包括氧传感器,所述氧传感器调控通过所述第一膜气体转移模块引入细胞培养基内的氧水平。
34.权利要求25的生物反应器系统,其进一步包括ph传感器,所述ph传感器调控通过所述第二膜气体转移模块引入细胞培养基内的二氧化碳水平。
35.权利要求23的生物反应器系统,其中所述高密度细胞培养的细胞为以下的密度:约20x106个细胞/ml、约30x106个细胞/ml、约40x106个细胞/ml、约50x106个细胞/ml、约60x106个细胞/ml、约70x106个细胞/ml、约80x106个细胞/ml、约90x106个细胞/ml、约100x106个细胞/ml、约110x106个细胞/ml、约120x106个细胞/ml、约130x106个细胞/ml、约140x106个细胞/ml、约150x106个细胞/ml、约160x106个细胞/ml、约170x106个细胞/ml、或约180x106个细胞/ml。
36.权利要求23的生物反应器系统,其中所述第一膜气体转移模块和第二膜气体转移模块向细胞培养基添加气体和/或去除来自细胞培养基的气体,而不形成气泡。