一种苍白杆菌属Ochrobactrumsp·ZTS-1菌株及其应用的制作方法

本发明涉及生物领域，尤其涉及一种苍白杆菌属ochrobactrumsp.zts-1菌株及其应用。

背景技术：

合成染料是工业废水中常见的一种污染物，对环境的影响极为恶劣，因其色度高，对动物和水生生物的毒害作用较大，分子结构中多含有稳定性极强的苯环，难以在环境中自然降解，使得从工业废水中移除合成染料或使之脱色成为目前染料废水处理过程中面临的主要问题之一。

三苯甲烷类染料是印染工业中应用最为广泛的一类染料，约占所有合成染料中的30-40％。结晶紫是一类典型的三苯甲烷类染料，广泛应用于印染、生物和医学等各个领域。结晶紫分子结构稳定，难降解，具有高残留、高生物毒性和致癌、致畸、致突变作用，因此研究结晶紫等三苯甲烷类染料的脱色降解对于染料废水污染的治理具有重要的理论意义和实用价值。

常见方法有化学还原法、物理沉淀或絮凝、光催化氧化、吸附、电化学处理、反渗透和生物降解等多种处理方法来移除废水中的结晶紫染料，其中生物降解法作为一种高效低耗、环境友好型处理方式越来越受到广泛关注。目前发现藻类、白腐真菌、酵母菌、放线菌、多种细菌均可对结晶紫染料进行降解，但不同的菌株对结晶紫的脱色率不同，并且不同的环境条件对菌株的脱色效率影响较大，根据已有的报道显示，多数菌株对染料进行脱色的最适ph值为中性范围等。

因此，若能从废水中分离筛选得到一株对环境适应性较广的结晶紫高效脱色菌株，将对该菌株对染料废水中结晶紫染料的脱色降解具有较大的应用价值。

技术实现要素：

为了解决上述问题，本发明提供了一种对环境具有较强适应性的结晶紫脱色菌株，该菌株能用于结晶紫染料的脱色降解，且温度和ph值适应范围广。

一种苍白杆菌属ochrobactrumsp.zts-1菌株，该菌株保藏于中国典型培养物保藏中心，地址：中国，武汉，武汉大学；邮编430072，保藏日期为2020年1月10日，保藏编号为：cctccno：m2020034，分类学命名ochrobactrumsp.zts-1。

而且，该菌株的16srdna序列如seqidno.1所示。

以及，所述菌株的应用为用于结晶紫脱色。

而且，在温度为20℃-40℃的条件下用于结晶紫脱色。

而且，用于结晶紫脱色时的最适温度值为37℃。

而且，在ph值为4-10的条件下用于结晶紫脱色。

而且，用于结晶紫脱色时的最适ph值为5。

与现有技术相比，该技术方案的有益效果在于：提供了一种能用于结晶紫染料的脱色降解的苍白杆菌属ochrobactrumsp.zts-1菌株，该菌株在结晶紫染料脱色方面具有能快速对结晶紫进行脱色、温度适应范围广和ph值适应范围广的特性，具有广泛的应用前景。

附图说明

图1为本发明实施例中不同培养时间对zts-1菌株脱色降解结晶紫的影响；

图2为本发明实施例中温度对zts-1菌株脱色降解结晶紫的影响；

图3为本发明实施例中培养基初始ph值对zts-1菌株脱色降解结晶紫的影响。

具体实施方式

下面结合附图和实施例对本发明进行详细具体说明，本发明的内容不局限于以下实施例。

本发明的苍白杆菌属ochrobactrumsp.zts-1菌株的获取和鉴定方法如下：

本实施例中从湖北仙桃某皮革厂废水中分离得到的细菌，将其命名为zts-1，该菌株的形态和生理生化特征为：在牛肉膏蛋白胨培养基上观察菌落呈乳白色，边缘圆整，稍隆起，菌落较小，湿润；镜检观察菌株为杆菌，革兰氏阴性，菌长在0.8-2.5μm左右，宽在0.5μm左右。

将zts-1菌株接种到5ml牛肉膏蛋白胨培养液(3.0g牛肉膏，10.0g蛋白胨，5.0gnacl，蒸馏水1000ml)，30℃、180rpm恒温振荡器中培养12-16h，10000rpm离心2min，收集菌体于1.5ml离心管中，抽提细菌基因组。使用16srdna通用引物(上游引物：5′-agagtttgatcctggctcag-3′；下游引物：5′-aaggaggtgatccagccgca-3′)进行pcr扩增，扩增产物经测序后其16srdna序列如seqidno.1所示，与genbank已登录的16srdna序列进行核苷酸序列同源性比对分析，与ochrobactrumintermediuml3的16srdna序列相似性达到100％,将其鉴定为这个属。该zts-1菌株于2020年1月10日保藏于中国典型培养物保藏中心，地址为：湖北省武汉市武昌区武汉大学，保藏编号为cctccno：m2020034。

菌株的性能研究

以下给出本发明的苍白杆菌属ochrobactrumsp.zts-1菌株的结晶紫脱色一些性能研究结果：

1、不同培养时间下的菌株脱色效果

以牛肉膏蛋白胨为培养基，加入终浓度为20mg/l的结晶紫，结晶紫脱色菌株zts-1的菌液接种量为5％，30℃，180rpm恒温振荡器培养0、1、2、3、4、5、6、7d后，取样测定结晶紫的脱色率，结果如图1所示。可以看出，培养1d后，菌株对结晶紫的脱色率即可达到近50％，随着培养时间的延长，菌株zts-1对结晶紫的脱色率有所增加，测试时间段内，第5d时的脱色率最高，达到了59.32％，即该菌株可以较快的对结晶紫进行脱色。

2、不同培养温度下的菌株脱色效果

将菌株zts-1以5％的接种量，接种到加有终浓度为20mg/l的结晶紫的牛肉膏蛋白胨培养基中，分别放入到培养温度为20，25，30，37，40℃，转速为180rpm的恒温振荡器培养中培养3d后测定脱色率，结果如图2所示。可以看出，在20-37℃之间，脱色率随着温度的升高而升高，20℃时脱色率最低，为46.78％，在37℃达到了最高的脱色率64.54％；当温度继续升高到40℃时，脱色率有所下降，但仍超过了60％，说明该菌株对结晶紫进行脱色时的温度适应性较强。

3、不同培养基初始ph值下菌株的脱色效果

将菌株zts-1以5％的接种量，接种到加有终浓度为20mg/l的结晶紫的牛肉膏蛋白胨培养基中，温度为30℃，恒温振荡器转速为180rpm，用1.0mol/l的hcl或naoh调节培养基的初始ph值至4，5，6，7，8，9，10，培养3d后测定脱色率，结果如图3所示。可以看出，ph从4.0增加到5.0时，脱色率呈上升趋势，在ph5.0时，达到最大值56.90％；之后随着ph值的上升，脱色率略呈下降趋势。结果表明，ph值在5.0-10.0之间时，菌株zts-1对结晶紫均有较好的脱色效果，说明该菌株对结晶紫脱色的ph适应性较强，能够适应在实际废水处理过程中含染料废水偏酸或偏碱的情况，实际应用潜力较大；同时ph值偏酸性的环境下菌株的脱色率较高，最适ph值在为5。

以下内容在序列表中体现

该菌株的16srdna序列：

。

序列表

<110>中南民族大学

<120>一种苍白杆菌属ochrobactrumsp.zts-1菌株及其应用

<160>1

<170>siposequencelisting1.0

<210>1

<211>1369

<212>dna

<213>苍白杆菌属(ochrobactrumsp.ochrobactrumanthropi)

<400>1

cggcttacacatgcagtcgagcgccccgcaaggggagcggcagacgggtgagtaacgcgt60

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