一种高效提高微藻甘油三酯含量的代谢工程方法与流程

文档序号:20916384发布日期:2020-05-29 13:34阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种提高微藻甘油三酯含量的方法,在微藻中表达具有下述(i)或(ii)所述氨基酸序列的甘油二酯酰基转移酶:

(i)序列表中的seqidno:1所示氨基酸序列;

(ii)序列表中的seqidno:1所示氨基酸序列经过一至十个氨基酸残基的取代、缺失或添加,且所衍生的蛋白质具有与(i)相同的功能。

2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,通过基因工程方法将所述甘油二酯酰基转移酶的基因导入微藻中,并使该基因在微藻中表达。

3.如权利要求2所述的方法,其特征在于,所述甘油二酯酰基转移酶的基因是来源于三角褐指藻(phaeodactylumtricornutum)的dgat1基因。

4.如权利要求3所述的方法,其特征在于,所述dgat1基因的核苷酸序列如序列表中seqidno:2所示。

5.如权利要求2所述的方法,其特征在于,将所述甘油二酯酰基转移酶的基因构建在表达载体上,然后将所述载体导入微藻中,获得甘油三酯含量提高的工程藻株。

6.如权利要求5所述的方法,其特征在于,所述表达载体是微藻表达载体或植物表达载体,由组成型或诱导型启动子驱动所述甘油二酯酰基转移酶的基因在微藻中表达。

7.如权利要求6所述的方法,其特征在于,所述组成型或诱导型启动子选自下列启动子中的一种:盐藻黄素-叶绿色a/c结合蛋白启动子、内源β-微管蛋白启动子、β-肌动蛋白启动子、核酮糖二磷酸羧化酶-加氧酶启动子、硝酸还原酶启动子。

8.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述微藻是三角褐指藻(phaeodactylumtricornutum)。

9.一种生产甘油三酯的方法,利用权利要求1~8任一所述的方法获得甘油三酯含量提高的微藻,培养繁殖该微藻并以其为原材料进行甘油三酯的提取和纯化。


技术总结
本发明公开了一种高效提高微藻甘油三酯含量的代谢工程方法。本发明发现了一种微藻来源、高活力的甘油二酯酰基转移酶(DGAT),该DGAT在微藻细胞中的高效表达能够提供一种代谢拉力,增强流向甘油三酯(TAG)合成的碳流,从而提高TAG含量。通过代谢工程方法获得的高产油微藻细胞可作为油脂提取纯化的原料,用于生物能源和食品等。

技术研发人员:刘进;张昱;丁巍
受保护的技术使用者:北京大学
技术研发日:2020.02.07
技术公布日:2020.05.29
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