光调控BK通道的融合蛋白及其制备方法和应用与流程

文档序号:21087790发布日期:2020-06-12 17:00阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种光调控bk通道的融合蛋白,其特征在于包括从n末端到c末端依次连接的细胞膜锚定序列、荧光蛋白、光敏蛋白lov2结构域、以及bk钾离子通道特异性结合蛋白,所述细胞膜锚定序列、所述荧光蛋白、所述光敏蛋白lov2结构域和所述bk钾离子通道特异性结合蛋白的连接方式为直接相连或通过连接肽相连。

2.根据权利要求1所述的融合蛋白,其特征在于,所述细胞膜锚定序列为lck酪氨酸蛋白激酶n末端结构域。

3.根据权利要求1所述的融合蛋白,其特征在于,所述蛋白为cereblon蛋白第81-186位氨基酸。

4.根据权利要求1所述的融合蛋白,其特征在于,所述融合蛋白的氨基酸序列如seqidno.1所示。

5.根据权利要求1所述的融合蛋白,其特征在于,所述细胞膜锚定序列的氨基酸序列如seqidno.2所示。

6.根据权利要求1所述的融合蛋白,其特征在于,所述荧光蛋白的氨基酸序列如seqidno.3所示。

7.根据权利要求1所述的融合蛋白,其特征在于,所述光敏蛋白lov2结构域的氨基酸序列如seqidno.4所示。

8.根据权利要求1所述的融合蛋白,其特征在于,所述bk钾离子通道特异性结合蛋白的氨基酸序列如seqidno.5所示。

9.根据权利要求1至8任一项所述的光调控bk通道的融合蛋白的制备方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:将分别编码细胞膜锚定序列、荧光蛋白、光敏蛋白lov2结构域、以及bk钾离子通道特异性结合蛋白的核苷酸序列,通过序列互补实现同源片段重组连接,将上述四个核苷酸序列连接并插入质粒真核表达载体,得到重组质粒,通过该重组质粒表达所述融合蛋白。

10.根据权利要求1至8任一项所述的光调控bk通道的融合蛋白在使用光调控组织中bk通道方面的应用。


技术总结
本发明提供了一种光调控BK通道的融合蛋白,其包括从N末端到C末端依次连接的细胞膜锚定序列、荧光蛋白、光敏蛋白LOV2结构域、以及BK钾离子通道特异性结合蛋白,所述细胞膜锚定序列、所述荧光蛋白、所述光敏蛋白LOV2结构域和所述BK钾离子通道特异性结合蛋白的连接方式为直接相连或通过连接肽相连。本发明的融合蛋白可在蓝光刺激的条件下,实现对内源性BK通道的功能调控。

技术研发人员:黄潋滟;李勃兴;魏子诚;罗争意;王裴;安芮昕
受保护的技术使用者:中山大学
技术研发日:2020.02.18
技术公布日:2020.06.12
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