一种具有抗耐药性功能的抗肿瘤四价铂配合物及制备方法与流程

本发明属于医药领域，具体涉及一种具有抗耐药性功能的抗肿瘤四价铂配合物及制备方法。
背景技术：
：铂类配合物是临床使用最广泛的抗肿瘤药物种类之一，尤其是第一代铂类抗肿瘤药顺铂，它对生殖系统癌症和头颈癌等非常有效，自从1978年被美国fda批准治疗癌症以来，已使睾丸癌患者的死亡率从几乎100％降到10％以下，对早期发现的患者治愈率可达100％，因而成为抗肿瘤药物的杰出代表。继顺铂之后，1989年fda批准第二代铂类抗肿瘤药卡铂上市，其抗癌谱与顺铂相似，但毒副反应较轻。2002年fda又批准第三代铂类抗肿瘤药奥沙利铂进入临床治疗结肠癌，其抗癌谱有别于顺铂且与之无交叉耐药性，毒副反应较顺铂轻。目前在临床中使用的铂类抗肿瘤药物还有奈达铂和乐铂，另外还有约10种铂类化合物正处在不同阶段的临床试验中，据统计，在临床肿瘤治疗方案中，大约50％都含有铂类药物。尽管如此，铂类药物也遇到了一些困难和问题，主要包括毒副作用和耐药性，这极大地限制它们更广泛的临床使用。这些问题也促使人们继续寻求新的铂类抗肿瘤药物来弥补传统铂类药物的缺陷。技术实现要素：本发明的目的是提供一种具有抗耐药性功能的抗肿瘤四价铂配合物及制备方法，它对肿瘤细胞具有优异的细胞毒活性，尤其是对顺铂耐药的肿瘤细胞，并且在活体上表现出优异的抑瘤效果和较低的毒性。本发明提供了如下的技术方案：一种具有抗肿瘤活性的四价铂配合物，结构式如式i或式ii：其中：为下述结构中的一种：一种具有抗肿瘤活性的四价铂配合物的制备方法，包括如下步骤：s1、将二价铂配合物与双氧水h2o2反应，得到四价铂配合物；其中，所述二价铂配合物为以下结构中的一种：s2、将s1中所得的四价铂配合物与o-苯并三氮唑-n,n,n',n'-四甲基脲四氟硼酸(tbtu)、三乙胺(tea)混合在dmf溶液中，搅拌混合均匀；s3、待反应结束后，过滤去除沉淀物，减压浓缩，然后加入水和乙醇的混合液，离心收集后沉淀，然后用甲醇、乙醚洗涤沉淀，真空干燥即可获得目标产品。；本发明的四价铂配合物可在抗肿瘤以及克服顺铂耐药性中应用，衍生物还包括立体异构体或其药学上可以接受的盐，以及所述衍生物为活性成分或主要活性成分，辅以药学上可接受的辅料所得的制剂。本发明的有益效果：传统的二价铂类药物已经在临床上广泛地使用并取得了巨大成功，然而严重的毒副作用以及耐药性严重阻碍了铂类药物更广泛地使用。四价铂配合物是一类新颖的铂类前药分子，在肿瘤组织中能够还原成具有活性的二价铂物种，由于其独特的性能，被认为是最具潜力的下一代铂类抗肿瘤药物。本发明中所设计的这类四价铂配合物对肿瘤细胞具有优异的细胞毒活性，尤其是对顺铂耐药的肿瘤细胞，并且在活体上表现出优异的抑瘤效果和较低的毒性；本发明的制备方法简单易行，故这类四价铂配合物在抗肿瘤以及克服顺铂耐药性方面具有较大的应用前景。附图说明附图用来提供对本发明的进一步理解，并且构成说明书的一部分，与本发明的实施例一起用于解释本发明，并不构成对本发明的限制。在附图中：图1为本发明实施例1制备化合物1的1h-nmr谱图(dmso-d6，400mhz)；图2为本发明实施例1制备化合物1的13c-nmr谱图(dmso-d6，400mhz)；图3为本发明实施例1制备化合物1的195pt-nmr谱图(dmso-d6，400mhz)；图4为本发明实施例1制备化合物2的1h-nmr谱图(dmso-d6，400mhz)；图5为本发明实施例1制备化合物2的13c-nmr谱图(dmso-d6，400mhz)；图6为本发明实施例1制备化合物2的195pt-nmr谱图(dmso-d6，400mhz)；图7为本发明实施例1制备化合物1和2以及顺铂对荷瘤小鼠的肿瘤抑制曲线以及小鼠体重变化图；图8为本发明实施例1制备化合物1和2以及顺铂对荷瘤小鼠治疗过程中体重变化图。具体实施方式实施例1四价铂配合物1和2的合成s1、将顺铂(cisplatin)1g置于烧瓶中，再滴加30％双氧水60ml，加热到75℃避光搅拌6h后，室温放置两天，4℃冰箱放置两天，过滤、真空干燥即可得到四价的oxoplatin黄色粉末；s2、取100mgoxoplatin，191mg(或204mg)，125μl三乙胺(tea)和290mgo-苯并三氮唑-n,n,n',n'-四甲基脲四氟硼酸(tbtu)溶解于10ml的干燥dmf中，室温避光搅拌48h；s3、反应结束后，过滤除去沉淀物，反应液减压浓缩至5ml，加入20ml乙醇和水1:1混合物，沉出淡黄色固体，分别用甲醇和乙醚各洗两遍，得到纯净的固体，产率约为80％。实施例2化合物1和2的细胞毒活测试对本发明实施例1制备的化合物1和2进行细胞毒活性测试，分别以a549/ddp、a549、a2780/ddp、a2780、mcf-7、caov3和l-02细胞为模型，以实施例1中合成的化合物1、2和顺铂为待检测物，将所述待检测物作用于细胞后，观察细胞的存活情况，以噻唑蓝(mtt)方法测试细胞存活率，具体操作步骤如下：s1、收集上述对数期细胞，调整细胞悬液的浓度，加入96孔板中，每孔细胞数约5000；s2、将上述实验细胞置于co2浓度为5％的细胞培养箱中，37℃培养12h；s3、将化合物1、2和顺铂按一定梯度倍数用含10％fbs的培养基稀释，加入上述植入细胞的96孔板中，每个浓度设3个复孔，孵化72h；s4、每孔加入20μl的mtt溶液(5mg/ml)，继续孵化4h，吸取培养基，每孔加150μl的dmso，摇床低速震荡10min；s5、酶标仪570nm处检测每个孔的吸光度值；s6、同时设置调零孔和对照组(培养基、dmso)，按以下公式计算细胞存活率：其中，abs(sample)为样品组细胞的吸光度值；abs(blank)为空白对照组中液体的吸光度值；abs(control)为未经过药物处理的对照组细胞的吸光度值；s7、作出细胞存活率-浓度曲线，计算化合物的半抑制浓度(ic50)，结果见表1。表1为本发明实施例1制备化合物1和2以及顺铂对不同细胞的ic50值(72h)化合物a549a549/ddpa2780a2780/ddpcaov3mcf-7l-0211.5±0.31.4±0.40.8±0.20.7±0.21.6±0.11.0±0.18.7±1.620.9±0.10.8±0.10.6±0.30.4±0.10.9±0.40.9±0.210.9±3.9cddp5.1±0.325.7±2.93.4±1.024.4±3.725.3±3.35.6±0.715.0±6.0实施例3化合物1和2的活体抑瘤测试向裸鼠皮下种植人非小细胞肺癌a549细胞并成瘤后，将老鼠分笼分组，每组5只老鼠；用尾静脉注射的方法给老鼠给药，顺铂2mg/kg，化合物1和2都是4mg/kg，每三天给药一次并测量瘤体积及老鼠的体重，结果如图7和8所示。四价铂配合物与传统二价铂配合物相比，在轴向上多了两个配体，空间上形成八面体结构，因而具有动力学惰性，具有较低的反应活性，较小的毒副作用。一般认为四价铂配合物在血浆以及正常组织中保持稳定，在肿瘤乏氧和高还原环境中会被还原成二价铂配合物，进而发挥药效，因此四价铂配合物被认为是一种潜在的抗肿瘤前药。到目前为止，最具有代表性的四价铂药为satraplatin，其可以口服给药。该药于1992年进入临床试验，现已进入临床iii期。本发明的四价铂配合物可以在抗肿瘤以及克服顺铂耐药性中应用，衍生物还包括立体异构体或其药学上可以接受的盐，以所述衍生物为活性成分或主要活性成分，辅以药学上可接受的辅料所制成的其它剂型。以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。当前第1页12