一种精液优选培养皿及其使用方法与流程

本发明涉及辅助生殖技术领域，尤其涉及一种精液优选培养皿及其使用方法。

背景技术：

精液的优选在人类辅助生殖技术(art)中非常重要，因为精液的质量会影响最终的临床结果；精浆中内源性活性氧的主要来源是白细胞，活性氧的产生也会导致膜多不饱和脂肪酸的过氧化，尤其是每个分子有六个双键的二十二碳六酸，这种脂质过氧化会导致精子活力和细胞膜流动性的丧失，从而破坏与卵母卵黄膜的融合。因此，从精液中去除白细胞和为成熟精子可以提高精子活力，帮助维持细胞膜和染色质的完整性，最终提高男性的生育能力。

对精子进行体外优化处理，不可避免的要进行吹吸、洗涤、离心和孵育等步骤，然而这些操作本身可能会导致精子受到氧化应激的损伤。目前临床应用较为普遍的是不连续的密度梯度离心、上游法及梯度离心联合上游等方法，传统的精液优选方法缺少人体内的天然屏障及不可避免的需要离心处理导致精子的dna损伤，这些会导致胚胎发育的远期影响。

目前临场常用精液优选技术有模拟女性生殖道的新型培养皿、upstream方法、macs精液优选方法以及基于微流控系统等，常用的精液优选技术存在难以实现大体积上样优选、难以避免离心等物理损伤、人工操作繁琐且耗时的问题。

技术实现要素：

本发明的目的在于提供一种精液优选培养皿及其使用方法，该培养皿实现大体积上样优选，避免离心等物理损伤精子，简化人工操作，提高了精液优选的效率。

为实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

一种精液优选培养皿，包括皿底及皿盖，所述皿底开设有一开口朝上的培养槽，所述皿盖盖设在皿底上；所述培养槽从外向内设有第一优选件、第二优选件、第三优选件及收集件；所述第一优选件与皿底之间具有一用于加入精液及优选液的第一空槽，所述第二优选件的高度低于第一优选件和第三优选件，所述第一优选件与第三优选件之间设有一用于取样或加样的第二空槽；所述第一优选件设有若干组连通第一空槽与第二空槽的三联通道，所述三联通道具有一定倾斜度；所述第三优选件设有若干个连通第二空槽与收集件的单通道；所述第三优选件开设有一开口朝上用于取样的第三空槽，所述收集件设置在第三空槽内。

进一步地，所述三联通道从上到下分别设有第一通道、第二通道及第三通道，所述第一通道、第二通道及第三通道均设有与第一空槽相连通的第一开口；所述第一通道、第二通道及第三通道通过一第二开口与第二空槽相连通。

进一步地，所述第一开口的高度低于第二开口的高度，所述第一通道、第二通道及第三通道具有0°-90°的倾斜度。

进一步地，所述第一空槽侧壁设有若干个用于引导精液中精子游动方向的引流板，所述引流板设置在2组三联通道之间，2个所述引流板形成一引流槽。

进一步地，所述单通道一端设有与第二空槽相连通的第三开口，另一端设有与收集件相连通的第四开口；所述第三开口的大小大于第四开口的大小，所述第三开口的高度高于第四开口的高度；所述收集件的高度低于第三优选件，所述第三优选件沿第三空槽设有一环形凸块。

进一步地，所述收集件开设有一开口朝上的收集槽，所述收集槽为锥形槽结构；所述收集槽侧壁开设有若干个与第四开口相连通的收集孔。

进一步地，所述皿底、第一优选件、第二优选件、第三优选件及收集件为一体化结构。

一种精液优选培养皿的使用方法，包括以下步骤：

s1、在引流槽或第二空槽内加入液化后的精液及优选液，优选液覆盖在精液上，精液中的精子在优选液内自由游动；

s2、在第二空槽、三联通道、单通道及收集槽内加入优选液，排出第二空槽、三联通道、单通道及收集槽内的空气；

s3、在第二空槽进行取样得到初级优选的精子；

s4、在收集槽内进行取样得到二级优选的精子。

进一步地，所述步骤s1中液化后的精液包括正常精液与异常精液，正常精液加入引流槽，异常精液加入第二空槽内，加入正常精液或异常精液后，不再加入另外一种精液。

进一步地，所述步骤s1中精液加入引流槽后加入优选液的高度不超过第一通道、第二通道及第三通道的第一开口。

采用上述技术方案后，本发明与背景技术相比，具有如下优点：

1、本发明通过皿盖盖住皿底，在第一空槽内加入精液与优选液，优选液充满三联通道、第二空槽、单通道及收集件，精液中的精子通过三联通道进行初级优选，在第二空槽内取样得到初级优选后的精子，初级优选后的精子通过单通道进入收集件，在第三空槽内的收集件得到二级优选的精子；对于异常精液，第一空槽不加精液，在第二空槽内加入精液与优选液，单通道和收集件充满优选液，在收集件中取样得到优选后的精液；能够实现大体积上样优选，避免离心等物理损伤，简化人工操作，提高了精液优选的效率。

2、本发明通过在第一空槽内设有若干个引流板，2个引流板之间形成一个引流槽，通过引流板限制精液中精子的游动范围，提高了精液中的精子游入三联通道的第一开口的概率；三联通道的第一通道、第二通道及第三通道具有倾斜度，精子基于自身活力游入第二开口进入第二空槽，第二开口小于第一开口减少游入第二空槽的精子回游。

3、本发明利用单通道的第三开口的高度大于第四开口的高度，游入单通道的精子基于自身活力及重力进入收集件的收集槽中，结构简单，操作方便，为经过初级优选的精子节省能量，从第二空槽加入的异常精液中的异常精子无法游入单通道，同时有效减少游入收集槽内的精子回游。

附图说明

图1为本发明皿底的整体结构示意图；

图2为本发明皿底的俯视结构示意图；

图3为本发明皿底的分解结构示意图；

图4为本发明皿盖的整体结构示意图；

图5为本发明皿底正面剖视结构示意图；

图6为图5中a的局部放大示意图；

图7为本发明精液优选培养皿使用流程图。

附图标记说明：

皿底.1、皿盖.2；

培养槽.11、第一优选件.12、第二优选件.13、第三优选件.14、收集件.15、第一空槽.16、第二空槽.17、三联通道.18、单通道.19；

第三空槽.141、环形凸块.142、收集槽.151、收集孔.152；

引流板.161、引流槽.162；

第一通道.181、第二通道.182、第三通道.183、第一开口.184、第二开口.185；

第三开口.191、第四开口.192。

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图及实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。

在本发明中需要说明的是，术语“上”“下”“左”“右”“竖直”“水平”“内”“外”等均为基于附图所示的方位或位置关系，仅仅是为了便于描述本发明和简化描述，而不是指示或暗示本发明的装置或元件必须具有特定的方位，因此不能理解为对本发明的限制。

实施例

配合图1至图7所示，本发明公开了一种精液优选培养皿，包括皿底1及皿盖2，皿底1开设有一开口朝上的培养槽11，皿盖2盖设在皿底1上；培养槽11从外向内设有第一优选件12、第二优选件13、第三优选件14及收集件15；第一优选件12与皿底1之间具有一用于加入精液及优选液的第一空槽16，优选液采用临床或实验室常用的优选液，优选sydneyivffertilizationmedium和vitrolifeivfplus，第二优选件13的高度低于第一优选件12和第三优选件14，第一优选件12与第三优选件14之间设有一用于取样或加样的第二空槽17；第一优选件12设有若干组连通第一空槽16与第二空槽17的三联通道18，三联通道18具有一定倾斜度；第三优选件14设有若干个连通第二空槽与收集件的单通道19；第三优选件14开设有一开口朝上用于取样的第三空槽141，收集件15设置在第三空槽141内。

三联通道18从上到下分别设有第一通道181、第二通道182及第三通道183，第一通道181、第二通道182及第三通道183均设有与第一空槽16相连通的第一开口184；第一通道181、第二通道182及第三通道183通过一第二开口185与第二空槽17相连通；第一开口184的高度低于第二开口185的高度，第一通道181、第二通道182及第三通道183具有0°-90°的倾斜度。

第一空槽16侧壁设有若干个用于引导精液中精子游动方向的引流板161，引流板161设置在2组三联通道18之间，2个引流板形成一引流槽162。

本实施例通过在第一空槽16内设有若干个引流板161，2个引流板161之间形成一个引流槽162，第一空槽16被引流板分隔成多个引流槽162，通过引流板161限制精液中精子的游动范围，提高了精液中的精子游入三联通道18的第一开口184的概率；三联通道18的第一通道181、第二通道182及第三通道183具有倾斜度，精子基于自身活力游入第二开口185进入第二空槽17，第二开口185小于第一开口184减少游入第二空槽17的精子回游。

单通道19一端设有与第二空槽17相连通的第三开口191，另一端设有与收集件15相连通的第四开口192；第三开口191的大小大于第四开口192的大小，第三开口191的高度高于第四开口192的高度，单通道19具有向下的倾斜度；收集件15的高度低于第三优选件14，第三优选件14沿第三空槽141设有一环形凸块142；收集件15开设有一开口朝上的收集槽151，收集槽141为锥形槽结构；收集槽151侧壁开设有若干个与第四开口192相连通的收集孔152。

本实施例的单通道的第三开口191的高度大于第四开口192的高度，游入单通道19的精子基于自身活力及重力进入收集件15的收集槽151中，结构简单，操作方便，为经过初级优选的精子节省能量，从第二空槽17加入的异常精液中的异常精子无法游入单通道18，同时有效减少游入收集槽151内的精子回游。

皿底1、第一优选件12、第二优选件13、第三优选件14及收集件15为一体化结构。

一种精液优选培养皿的使用方法，包括以下步骤：

s1、在引流槽162或第二空槽17内加入液化后的精液及优选液，优选液覆盖在精液上，精液中的精子在优选液内自由游动。

s2、在第二空槽17、三联通道18、单通道19及收集槽151内加入优选液，排出第二空槽17、三联通道18、单通道19及收集槽151内的空气。

s3、在第二空槽17进行取样得到初级优选的精子。

s4、在收集槽151内进行取样得到二级优选的精子。

步骤s1中液化后的精液包括正常精液与异常精液，正常精液加入引流槽162，异常精液加入第二空槽17内，加入正常精液或异常精液后，不再加入另外一种精液；当异常精液加入第二空槽17后，三联通道18及引流槽162不加入优选液，减少精液中的精子游入引流槽162中。

步骤s1中精液加入引流槽162后加入优选液的高度不超过第一通道181、第二通道182及第三通道183的第一开口184，防止造成第一通道181、第二通道182及第三通道183内部气体堵塞。

异常精液包括严重的少、弱、畸精症，分别为(1)极度少精症：一次性射出精液中精子浓度≤1×10⁶/ml；(2)极度弱精子症：向前运动精子≤1％；(3)极度畸精子症：正常形态精子率≤1％；其中影响活力的畸形精子被去除，如短尾的畸形精子。

本实施例通过皿盖2盖住皿底1，在第一空槽16内加入精液与优选液，优选液充满三联通道18、第二空槽17、单通道19及收集件15，精液中的精子通过三联通道18进行初级优选，在第二空槽17内取样得到初级优选后的精子；初级优选后的精子通过单通道19进入收集件15，在第三空槽内的收集件得到二级优选的精子；第一空槽16不加精液，在第二空槽17内加入精液与优选液，单通道19和收集件15充满优选液，在收集件15中取样得到优选后的精液；能够实现大体积上样优选，避免离心等物理损伤，简化人工操作，提高了精液优选的效率。

以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到的变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。因此，本发明的保护范围应该以权利要求的保护范围为准。