一种不易开伞的黄色金针菇菌种农金49及其分子标记鉴定方法与流程

文档序号:21817578发布日期:2020-08-11 21:30阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种黄色金针菇‘农金49’菌株,其特征在于:所述金针菇‘农金49’菌株,其分类命名为:金针菇(flammulinafiliformis)农金49,已于2019年12月5日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号cctccno:m20191019。

2.一种如权利要求1所述的黄色金针菇‘农金49’菌株的分子标记鉴定方法,其特征在于:包括菌丝的培养与收集、基因组dna的提取、特异性片段pcr扩增、pcr产物的电泳检测与dna测序;

特异性片段pcr扩增引物为f49p1~f49p6,具体核苷酸序列为:

引物f49p1正向序列为5’-agagcttcttgccggaacag-3’,f49p1反向序列为5’-gagctcacctcacggatatg-3’;

引物f49p2正向序列为5’-tccagtgtcgcgtctgaatc-3’,f49p2反向序列为5’-tgggccaggcaatccacatc-3’;

引物f49p3正向序列为5’-gtgcctagcggcaacagaag-3’,f49p3反向序列为5’-tgtctcgccataatcaccag-3’;

引物f49p4正向序列为5’-ggccggctcaacctatttac-3’,f49p4反向序列为5’-gccgcccacattatgggtag-3’;

引物f49p5正向序列为5’-cgattgtgcgcatcttaacg-3’,f49p5反向序列为5’-ggattccgcgccgatattcc-3’;

引物f49p6正向序列为5’-ccaggctgcgcacttgtatc-3’,f49p6反向序列为5’-agcgagaccttctgtcattc-3’;

引物f49p1产生一条1336bp的条带,其dna序列如seqidno.1所示;引物f49p2产生一条1076bp的条带,其dna序列如seqidno.2所示;引物f49p3产生一条1206bp的条带,其dna序列如seqidno.3所示;引物f49p4产生一条1621bp的条带,其dna序列如seqidno.4所示;引物f49p5产生一条1036bp的条带,其dna序列如seqidno.5所示;引物f49p6产生一条951bp的条带,其dna序列如seqidno.6所示;6个引物同时检测得到对应大小的dna标记条带,是金针菇(flammulinafiliformis)‘农金49’菌株的标记。

3.根据权利要求2所述的黄色金针菇(flammulinafiliformis)‘农金49’菌株的分子标记鉴定方法,其特征在于:所述pcr扩增的反应体系:1~1.5μl含量80~150ng的dna,12.5μlpremixtaq,1μl浓度为10μmol/l的正向引物,1μl浓度为10μmol/l的反向引物,9~9.5μlddh2o,总体积25μl;

pcr扩增反应程序:94℃预变性5min;98℃变性10sec,57℃退火30sec,72℃延伸x,35个循环;72℃延伸10min;其中引物f49p1、f49p3、f49p4的72℃延伸时间x为1min45sec;引物f49p2、f49p5、f49p6的72℃延伸时间x为1min10sec。


技术总结
本发明提供了一种不易开伞的黄色金针菇菌种‘农金49’及其分子标记鉴定方法,属于金针菇技术领域。本发明以白色金针菇‘农金7号’和黄色金针菇‘G‑20’为亲本进行杂交选育出稳定性好,菌盖浅黄色、不易开伞,单根子实体间不易粘连,菌柄长、整齐度好,产量高,具有很好地开发应用前景的黄色金针菇‘农金49’菌株。该菌株已于2019年12月5日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号CCTCC NO:M20191019。同时提供了该菌株专一性强、操作简便的分子标记鉴定方法。

技术研发人员:刘新锐;江玉姬;邓优锦;谢宝贵;吴小平
受保护的技术使用者:福建农林大学
技术研发日:2020.06.15
技术公布日:2020.08.11
当前第2页1 2 
网友询问留言 已有0条留言
  • 还没有人留言评论。精彩留言会获得点赞!
1