石胆酸类似物及其在口服多肽药物中的用途的制作方法

本发明涉及新型glp-1类似物及石胆酸类似物的结构式，及其在口服多肽药物中的用途。

背景技术：

glp-1作为ii型糖尿病患者治疗用药，具有葡萄糖依赖性降血糖作用，能够实现平稳降血糖，降低糖化血红蛋白（hba1c），而且基本无低血糖风险，同时能够通过抑制患者食欲，实现患者体重减轻，降低患者舒张压，对心血获益等多种生理功能。然而，多肽类药物对胃肠道酶系统非常敏感，绝大多数蛋白质或者多肽经过胃肠道被水解，从而丧失生理活性。同时，多肽药物由于脂溶性差，难于实现肠道吸收。

目前，glp-1类似物上市药物主要以皮下注射为主，患者顺应性较差，急需开发口服制剂满足患者需求，为患者提供更多的选择。一方面，可以通过改变氨基酸残基减少胃肠道系统蛋白水解酶酶切位点，降低多肽药物在胃肠道系统中被水解的风险；另一方面，利用非共价修饰的传输介质介导技术制备口服制剂。

本技术：
中在利拉鲁肽的基础上进行设计，把第8位的丙氨酸突变成氨基异丁酸（aib），并将此glp-1类似物命名为类似物1，研究发现石胆酸可赋予类似,1抵抗糜蛋白酶、胰蛋白酶降解的能力，使得口服glp-1类似物具有很高的可行性，口服剂型易被患者接受，势必成为glp-1类似物剂型的研发方向。

技术实现要素：

类似物1的结构式如下：

石胆酸类似物的结构式如下：

石胆酸由上海阿拉丁公司生产，结构式中的r基团可为氢原子、甲基、乙基、乙酰基等。

本发明提供一种石胆酸作为glp-1类似物口服辅助剂的方法，通过将石胆酸包裹类似物1，分别在糜蛋白酶、胰蛋白酶中水解2h、4h、6h、12h、24h，质谱鉴定类似物1未被糜蛋白酶、胰蛋白酶降解，仍有大量存在。石胆酸解决了glp-1类似物易被胃肠道蛋白酶降解的缺点，并且石胆酸属于人体内天然代谢产物，生物相容性好，易于获取，有望实现glp-1类似物的口服给药。

为了实现上述目的，本发明提供下述方案：

a）糜蛋白酶水解石胆酸包裹的类似物1

b）胰蛋白酶水解石胆酸包裹的类似物1

作为本发明的进一步改进，所述步骤a）和b）中，水解时间为2h、4h、6h、12h、24h，石胆酸所选浓度为2.0-10mm，优选10mm。

说明书附图

图1为糜蛋白酶水解石胆酸包裹的类似物1的质谱图。

图2为胰蛋白酶水解石胆酸包裹的类似物1的质谱图。

图1类似物1在糜蛋白酶中水解质谱结果（a）阳性对照24h；（b）糜蛋白酶水解2h；（c）10mm石胆酸水解2h；（d）100mmsnac水解2h；（e）10mm石胆酸水解4h；（f）10mm石胆酸水解6h；（g）10mm石胆酸水解12h；（h）10mm石胆酸水解24h。

图2类似物1在胰蛋白酶中水解质谱结果（a）阳性对照24h；（b）胰蛋白酶水解2h；（c）10mm石胆酸水解2h；（d）100mmsnac水解2h；（e）10mm石胆酸水解4h；（f）10mm石胆酸水解6h；（g）10mm石胆酸水解12h；（h）10mm石胆酸水解24h

具体实施方式

下面结合附图和实施例对本发明做进一步详细说明。

实施例一糜蛋白酶水解石胆酸包裹的类似物1

分别称取4mg冻干的类似物1，用100mm碳酸氢钠（ph7.5）溶液10ml溶解，每管500μl分装。不加酶和辅助剂的作为阳性对照，加酶但不加辅助剂的作为阴性对照，实验组加10mm的石胆酸，同时按类似物：酶（100:1）比例分别加入糜蛋白酶。混匀后放在37℃温育，分别在2、4、6、12、24h取样。取样后煮沸5～10min终止反应。在10mm石胆酸包裹下，类似物1在糜蛋白酶中水解24h仍有大部分存在。

实施例二胰蛋白酶水解石胆酸包裹的类似物1

分别称取4mg冻干的类似物1，用100mm碳酸氢钠（ph7.5）溶液10ml溶解，每管500μl分装。不加酶和辅助剂的作为阳性对照，加酶但不加辅助剂的作为阴性对照，实验组加10mm的石胆酸，同时按类似物：酶（100:1）比例分别加入胰蛋白酶。混匀后放在37℃温育，分别在2、4、6、12、24h取样。取样后煮沸5～10min终止反应。在10mm石胆酸包裹下，类似物1在胰蛋白酶中水解24h仍有大部分存在。

以上内容是结合优选的实施方式进行的具体说明，对于本发明所属技术领域的技术人员，在本发明的技术思路上还可以做出若干推演，都应当视为本发明的保护范围。

技术特征：

1.一种glp-1类似物，其包括序列所示氨基酸的组成。

2.石胆酸类似物的结构，结构式中r基团可为氢原子、甲基、乙基、乙酰基等。

3.一种药物组合物，包括有效成分以及药学上可接受的载体，所述有效成分含有如权利要求1所述多肽。

4.如权利要求2所述石胆酸及石胆酸类似物在抵抗糜蛋白酶及胰蛋白酶降解的用途。

技术总结
本发明涉及新型GLP‑1类似物及石胆酸类似物的结构式以及石胆酸在口服多肽药物中的用途，属于生物医学领域。新型GLP‑1类似物在利拉鲁肽的基础上进行设计，把第8位的丙氨酸突变成氨基异丁酸（Aib），研究发现石胆酸可赋予其抵抗糜蛋白酶、胰蛋白酶降解的能力，解决了GLP‑1类似物易被胃肠道蛋白酶降解的缺点，石胆酸有望实现GLP‑1类似物等多肽类药物的口服给药。

技术研发人员：张云霄;刘宇
受保护的技术使用者：湖南理工学院
技术研发日：2020.10.20
技术公布日：2021.01.08