控制玉米株高和穗位高基因ZmCOL14及其应用的制作方法

文档序号：24287108发布日期：2021-03-17 00:34阅读：76来源：国知局

本发明属于分子遗传学领域。具体涉及控制玉米株高和穗位高的基因zmcol14及其在调控玉米株高和穗位高性状方面的应用。本发明提供了一个控制玉米株高和穗位高基因zmcol14，公开了利用基因工程手段操作zmcol14基因以提早玉米开花期并降低玉米株高和穗位高的方法，且提供了一种在长日照条件下延迟玉米开花期并提高玉米株高和穗位高的突变基因。

背景技术：

在玉米的主要农艺性状中，株高和穗位高影响到玉米的抗倒性、光合效能、收获指数，与玉米产量密切相关。因此，在玉米育种实践与种质资源改良工作中，株高和穗位高性状具有重要的价值。此外，玉米的株高和穗位高性状也与机械化收割效率紧密相关。理解株高和穗位高性状的调控机制，并能够灵活调控玉米品种的株高和穗位高对于玉米种植和收获都具有重要作用。

由于株高和穗位高受主效基因和微效多基因的共同控制，表现为典型的数量性状遗传。尽管有一些调控玉米株高和穗位高的基因被定位与克隆(华南农业大学.玉米zmpif3s突变型蛋白、其编码基因及其在育种上的应用：cn201910273522.1[p].2019-08-02.；杭州瑞丰生物科技有限公司.cyp78a基因在增加玉米株高和增强植株长势中的应用：cn201510230547.5[p].2016-12-07.；中国农业大学.与玉米株高相关基因及其编码蛋白与应用：cn200410037404.4[p].2005-01-26.；中国农业科学院作物科学研究所.利用基因编辑技术创制玉米矮化材料的方法：cn201910371358.8[p].2019-08-16.)，更多的株高和穗位高性状相关基因有待进一步克隆。

开花期是作物进化和适应过程中的重要性状，理解作物开花期性状的遗传基础、克隆候选基因可以提高作物的环境适应能力和可塑性，这对培育适应不同生态区的优良作物品种具有重要的意义，同时也将促进产量等与开花期密切相关的重要生产性状的遗传改良进程。

能够同时对株高和花期性状进行调控，有助于玉米适应特定的生态环境和收获方式。

技术实现要素：

本发明的目的之一在于提供一种控制玉米株高和/或穗位高的基因zmcol14及其在调控玉米株高和穗位高性状中的应用。

本发明的目的之二在于公开一种提早玉米开花期并降低玉米株高和穗位高的方法。

本发明的目的之二在于公开一种玉米突变基因在长日照条件下延迟玉米开花期并提高玉米株高和穗位高中的应用。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

本发明提供了一种控制玉米株高和/或穗位高的基因zmcol14及其在调控玉米株高和/或穗位高性状中的应用，其特征在于，所述基因的核酸序列如seqidno.1所示。

本发明还提供了一种可以用来降低玉米株高和/或穗位高的蛋白，其特征在于，所述蛋白的氨基酸序列如seqidno.3所示。

本发明还提供了一种可以用来降低玉米株高和/或穗位高的核酸，其特征在于，所述的核酸编码上述的蛋白；在一些实施方案中，上述的核酸序列如seqidno.2所示。

本发明还提供了一种可以用来降低玉米株高和/或穗位高的基因表达盒，其特征在于，所述表达盒含有上述的核酸序列。

在一些实施方案中，上述核酸与pzmubi启动子、3×flag标签和nos终止子可操作地连接。

在一些实施方案中，上述基因表达盒的序列如seqidno.4所示。

本发明还提供了一种可以用来降低玉米株高和/或穗位高的表达载体，其特征在于，含有上述的表达盒。

本发明还提供了一种可以用来降低玉米株高和/或穗位高的宿主细胞，其特征在于，包含上述的表达载体。

在一些实施方案中，上述宿主细胞为农杆菌细胞。

本发明还提供了一种提早玉米开花期并降低玉米株高和穗位高的方法，其特征在于，用上述的表达载体或上述的宿主细胞转化玉米，得到转基因玉米；筛选抽雄期、吐丝期、散粉期均提早且株高和穗位高均降低的材料。

本发明还提供了一种玉米突变基因在长日照条件下延迟玉米开花期并提高玉米株高和穗位高中的应用，其特征在于：所述突变基因序列如seqidno.5或seqidno.6任意一个所示。

本发明的优点及有益效果如下：zmcol14基因能够控制玉米的株高和穗位高性状是之前没有报道过的。本发明通过超表达和编辑zmcol14基因，确认了基因对玉米开花期的调控功能并确定了具体调控方式(抑制抽雄、吐丝和散粉)，同时意外发现zmcol14基因也控制着玉米株高和穗位高性状，控制的方式为抑制株高和穗位高性状。通常，玉米晚花会导致营养生长期延长，株高和穗位高会相应增加。然而，由于zmcol14基因的特殊作用，利用pzmubi启动子和nos终止子与zmcol14基因编码序列连接构建的表达盒，可以在延迟玉米开花期的同时降低玉米株高和穗位高，从而用来培育晚花半矮秆玉米品种。此外，利用crispr/cas9基因编辑后的两个优选的突变基因，可以在长日照条件下有效提早玉米开花期并提高玉米株高和穗位高，从而用来培育早花高秆玉米品种。

附图说明

图1zmcol14基因超表达载体图。各元件英文及缩写含义列举如下：

图2超表达玉米zmcol14基因后的株高和花期表现。左边是超表达植株，右边是对照植株。

具体实施方式

提供以下定义和方法用以更好地界定本申请以及在本申请实践中指导本领域普通技术人员。除非另作说明，术语按照相关领域普通技术人员的常规用法理解。本文所引用的所有专利文献、学术论文、行业标准及其他公开出版物等，其中的全部内容整体并入本文作为参考。

如本文所用，“玉米”是任何玉米植物并包括可以与玉米育种的所有植物品种，包括整株植物、植物细胞、植物器官、植物原生质体、植物可以从中再生的植物细胞组织培养物、植物愈伤组织、植物或植物部分中完整的植物细胞，所述植物部分例如胚、花粉、胚珠、种子、叶、花、枝、果实、茎杆、根、根尖、花药等。除非另有所指，核酸以5’至3’方向从左向右书写；氨基酸序列以氨基至羧基方向从左向右书写。氨基酸在本文可以用其通常所知的三字母符号或iupac-iub生物化学命名委员会推荐的单字母符号来表示。同样地，可以用通常接受的单字母码表示核苷酸。数字范围包括限定该范围的数字。如本文所用，“核酸”包括涉及单链或双链形式的脱氧核糖核苷酸或核糖核苷酸多聚物，并且除非另有限制，包括具有天然核苷酸基本性质的已知类似物(例如，肽核酸)，所述类似物以与天然存在的核苷酸类似的方式与单链核酸杂交。如本文所用，术语“编码”或“所编码的”用于特定核酸的上下文时，指该核酸包含指导该核苷酸序列翻译成特定蛋白的必需信息。使用密码子表示编码蛋白的信息。如本文所用，涉及特定多核苷酸或其所编码的蛋白的“全长序列”指具有天然(非合成)内源序列的整个核酸序列或整个氨基酸序列。全长多核苷酸编码该特定蛋白的全长、催化活性形式。本文可互换地使用术语“多肽”和“蛋白”，以指氨基酸残基的多聚物。该术语用于氨基酸多聚物，其中一个或多个氨基酸残基是相应天然存在的氨基酸的人工化学类似物。该术语还用于天然存在的氨基酸多聚物。本文可互换地使用术语“残基”或“氨基酸残基”或“氨基酸”，以指被并入蛋白、多肽或肽(统称“蛋白”)的氨基酸。氨基酸可以是天然存在的氨基酸，并且除非另有限制，可以包括天然氨基酸的已知类似物，所述类似物可以与天然存在的氨基酸相似的方式起作用。

如本文所用，可以互换地使用术语“分离的”和“纯化的”，以涉及核酸或多肽或其生物学活性部分，其基本上或本质上不含如在其天然存在的环境中所发现的通常伴随或反应于该核酸或多肽的组分。因而，用重组技术产生分离的或纯化的核酸或多肽时，分离的或纯化的核酸或多肽基本上不含其它细胞物质或培养基，或者化学合成分离的或纯化的核酸或多肽时，基本上不含化学前体或其它化学品。“分离的”核酸通常不含在该核酸所衍生自的生物体的基因组dna中天然侧翼于该核酸(即位于该核酸5’和3’端的序列)的序列(诸如，编码蛋白的序列)。例如，在各种实施方案中，所分离的核酸可以包含在该核酸所衍生自的细胞的基因组dna中天然侧翼于该核酸的少于约0.5kb的核苷酸序列。

在本申请中，将词语“包括”、“包含”或其变体应理解为除所描述的元素、数或步骤外，还包含其它元素、数或步骤。“受试植物”或“受试植物细胞”是指遗传改造已经生效的植物或植物细胞，或者如此改造的植物或细胞的子代细胞，该子代细胞包含所述改造。“对照”或“对照植物”或“对照植物细胞”提供用于测量受试植物或植物细胞表型改变的参考点。对照植物或植物细胞可以包括，例如：(a)野生型植物或细胞，即与遗传改造起始材料具有相同基因型的植物或细胞，所述遗传改造产生受试植物或细胞；(b)与所述起始材料具有相同基因型但已用空构建体(即用对目的性状无已知效果的构建体，诸如包含标物基因的构建体)转化的植物或植物细胞；(c)是受试植物或植物细胞的非转化分离子的植物或植物细胞；(d)与所述受试植物或植物细胞在遗传上一致但未暴露于会诱导目的基因表达的条件或刺激物的植物或植物细胞；或(e)受试植物或植物细胞自身，其处于目的基因不被表达的条件下。

本领域技术人员会容易地认同，诸如位点特异性诱变和随机诱变、聚合酶链式反应方法和蛋白工程化技术的分子生物学领域的进步提供了广泛的适当的工具和操作步骤，以用于改造或者工程化农业上感兴趣的蛋白的氨基酸序列和潜在的基因序列。

在一些实施方案中，可以对本申请的核苷酸序列进行改变，以进行保守氨基酸替换。保守氨基酸替换的原则和实例在下文中进一步描述。在某些实施方案中，可以依照公开的单子叶密码子偏好性对本申请的核苷酸序列进行不改变氨基酸序列的替换，例如可以用单子叶植物偏好的密码子替换编码同一氨基酸序列的密码子，而不改变该核苷酸序列所编码的氨基酸序列。在一些实施方案中，以编码同一氨基酸序列的不同密码子替换本申请中的部分核苷酸序列，从而在改变核苷酸序列的同时不改变其编码的氨基酸序列。保守变体包括由于遗传密码子简并性而编码实施方案的蛋白中的一种的氨基酸序列的那些序列。在一些实施方案中，根据单子叶植物偏好密码子替换本申请中的部分核苷酸序列。本领域技术人员会认识到氨基酸添加和/或取代通常基于氨基酸侧链取代基的相对相似性，例如，所述取代基的疏水性、电荷、大小等等。具有各种前述所考虑性质的示例性氨基酸取代基团为本领域技术人员所公知，并且包括精氨酸与赖氨酸；谷氨酸和天门冬氨酸；丝氨酸和苏氨酸；谷氨酰胺和天冬酰胺；以及缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸。关于不影响目的蛋白生物学活性的适当氨基酸取代的指南可以在dayhoff等人(1978)atlasofproteinsequenceandstructure(蛋白序列和结构图集)(natl.biomed.res.found.,washington,d.c)(通过引用并入本文)的模型中找到。可以进行诸如将一个氨基酸换作具有相似性质的另一个氨基酸的保守性取代。序列一致性的鉴定包括杂交技术。例如，将已知核苷酸序列的全部或部分用作与其它相应核苷酸序列选择性杂交的探针，所述其它相应核苷酸序列存在于来自所选生物体的已克隆基因组dna片段或cdna片段群(即基因组文库或cdna文库)。

在一些实施方案中，还包括核苷酸序列及其编码的氨基酸序列的片段。如本文所用，术语“片段”指实施方案的多核苷酸的核苷酸序列的一部分或者多肽的氨基酸序列的一部分。核苷酸序列的片段可以编码蛋白片段，所述蛋白片段保留天然或相应全长蛋白的生物学活性，并因而具有蛋白活性。突变体蛋白包括天然蛋白的生物活性片段，其包含保留天然蛋白生物学活性的连续氨基酸残基。一些实施方案还包括转化的植物细胞或转基因植物，其包含至少一种实施方案的核苷酸序列。在一些实施方案中，使用表达载体转化植物，所述表达载体包含至少一种实施方案的核苷酸序列以及与其可操作地连接的在植物细胞中驱动表达的启动子。转化的植物细胞和转基因植物表示基因组内包含异源多核苷酸的植物细胞或植物。一般来说，所述异源多核苷酸在转化的植物细胞或转基因植物的基因组内稳定地整合，以致将所述多核苷酸传递给后代。可以将所述异源多核苷酸单独地或作为表达载体的一部分整合进基因组。在一些实施方案中，本申请涉及的植物包括植物细胞、植物原生质体、可以再生出植物的植物细胞组织培养物、植物愈伤组织、植物团块和植物细胞，其为完整的植物或者植物的部分，诸如胚胎，花粉，胚珠，种子，叶，花，枝，果实，果仁，穗，穗轴，壳，秸秆，根，根尖，花药等等。本申请还包括源于本申请的转基因植物或其子代、并因而至少部分地包含本申请的核苷酸序列的植物细胞、原生质体、组织、愈伤组织、胚胎以及花、茎、果实、叶以及根。

以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。在不背离本发明精神和实质的情况下，对本发明方法、步骤或条件所作的修改或替换，均属于本申请的范围。若无特别指明，实施例按照常规实验条件，如sambrook等人的分子克隆实验手册(sambrookj&russelldw,molecularcloning:alaboratorymanual,2001)，或按照制造厂商说明书建议的条件。若未特别指明，实施例中所用的化学试剂均为常规市售试剂，实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段。

实施例

实施例1超表达玉米zmcol14基因

经maizegdb数据库(https://www.maizegdb.org/)的查询，zmcol14基因(grmzm2g042198)位于玉米第4染色体162885359-162891594位置，基因功能注释为zinc-fingerproteinconstans-like11。基因组序列如seqidno.1所示，cds序列如seqidno.2所示，编码的氨基酸序列如seqidno.3所示。通常constans-like蛋白在植物中与光周期和开花期性状相关，然而，由于玉米中对开花基因的研究尚浅，具有constans-like功能注释的基因数量也很多，因此并不能完全确定zmcol14基因的具体功能(是否会影响开花性状)以及对玉米开花的具体影响方式(是促进还是抑制)。本发明为了明确zmcol14基因的具体功能，利用超表达技术对zmcol14基因的表达进行了人工操作，并调查了表达改变后的玉米植株表型。具体过程如下：

1、超表达载体构建。

本发明以pcambia3301-pzmubi-flag-ngfp作为骨架载体构建zmcol14基因超表达载体pcambia3301-pzmubi-flag-zmcol14。具体步骤为：取玉米4叶期叶片，提取mrna，反转录获得cdna，pcr克隆zmcol14基因cds序列(seqidno.2)。bamhi和bsteii双酶切去掉骨架载体gfp序列，连接zmcol14cdna序列得到超表达载体为pcambia3301-pzmubi-flag-zmcol14。该载体以pzmubi作为启动子，驱动zmcol14基因超量表达。同时，基因的n端融合3×flag蛋白标签以方便进行蛋白功能研究。此外，载体携带ltp-dsred表达盒以方便转化后的玉米进行颜色筛选，携带camv35s-bar表达盒以用于遗传转化时的筛选标记。超表达载体图见图1。pzmubi-3×flag-zmcol14-nos表达盒序列如seqidno.4所示。

2、玉米遗传转化。

将载体通过电击法转入农杆菌菌株eha105中，pcr鉴定筛选阳性克隆。以新鲜剥离的1mm左右的玉米自交系kn5585的幼胚为材料，将剥取的玉米胚放入含有1.8ml悬浮液的2ml塑料离心管中，30min内大约处理未成熟幼胚150个；吸去悬浮液，余下玉米胚在管中然后加入1.0ml农杆菌悬浮液，放置5min。将离心管中的幼胚悬浮后倒入共培养基上，并用移液器吸去表面多余的农杆菌菌液，于23℃黑暗共培养3天。共培养后，将幼胚转移到休息培养基中，于28℃黑暗培养6天后，放至含5mg/lbialaphos的筛选培养基上，开始筛选培养2周，然后转到含8mg/lbialaphos筛选培养基上筛选培养2周。将抗性愈伤组织转移至分化培养基1中，25℃，5000lx，光照培养1周。再将愈伤转移至分化培养基2中，光照培养2周；将分化生出的小苗转移至生根培养基上，25℃，5000lx，光照培养直到生根；将小苗转入小盆中生长，一定生长阶段后移栽于温室中，3-4个月后收获后代种子。

3、超表达植株的性状鉴定

将3个t2代超表达转化体1_6#、7_3#和7_6#分别在夏季吉林(长日照环境)和冬季海南(短日照环境)试验地进行表型鉴定。结果如表1和表2所示。在长日照和短日照条件下，zmcol14基因超表达后均造成了玉米花期的改变。其中，在短日照条件下，1_6#和7_3#转化体阳性植株的抽穗期、吐丝期、散粉期均比其阴性对照植株显著延迟；而7_6#转化体阳性植株的抽穗期、吐丝期均比其阴性对照植株显著延迟，而散粉期无变化，这可能是由于外源基因的不同插入位置造成的。在长日照条件下，3个转化体阳性植株的抽穗期、吐丝期、散粉期均比其阴性对照植株显著延迟，而且比短日照条件下延迟的天数更多。

表1各超表达玉米材料在短日照条件下的开花期性状数据

数据以“平均值±标准差”表示；“+”表示阳性样品，“-”表示阴性样品；不同字母表示各组材料阳性样品和阴性样品间在p＝0.05水平的显著性差异。

表2各超表达玉米材料在长日照条件下的开花期性状数据

数据以“平均值±标准差”表示；“+”表示阳性样品，“-”表示阴性样品；不同字母表示各组材料阳性样品和阴性样品间在p＝0.05水平的显著性差异。

以上结果表明，zmcol14基因超量表达可以导致玉米的抽穗期、吐丝期、散粉期延迟。

此外，发明人意外发现，在吉林和海南试验地种植的超表达材料的株高和穗位高均发生了显著变化，3个转化体1_6#、7_3#和7_6#阳性植株的株高和穗位高均比其阴性对照植株降低(表3、表4)。因此，zmcol14基因也具有调控玉米株高和穗位高的功能，控制的方式为抑制株高和穗位高性状。这一功能在之前是没有预料到的。通常，玉米晚花会导致营养生长期延长，株高和穗位高会相应增加。通过超量表达zmcol14基因不仅可以延迟玉米开花，还可以降低玉米的株高和穗位高(图2)，能够用来培育晚花半矮秆的玉米新品种。

表3各超表达玉米材料株高和穗位高性状数据(吉林)

数据以“平均值±标准差”表示；“+”表示阳性样品，“-”表示阴性样品；不同字母表示各组材料阳性样品和阴性样品间在p＝0.05水平的显著性差异。

表4各超表达玉米材料株高和穗位高性状数据(海南)

数据以“平均值±标准差”表示；“+”表示阳性样品，“-”表示阴性样品；不同字母表示各组材料阳性样品和阴性样品间在p＝0.05水平的显著性差异。

1_6#、7_3#两个转化体在长日照和短日照条件下，抽穗期、吐丝期、散粉期均显著延迟，株高和穗位高均降低。可以筛选出来作为晚花半矮秆玉米新种质。

实施例2抑制玉米zmcol14基因表达

本发明进一步通过基因编辑的方式抑制zmcol14基因的表达，以进一步验证基因的功能，并建立合适的技术方案。抑制表达采用crispr-cas9工具对zmcol14基因进行定点突变的方式实现。实施过程包括基因编辑载体的构建、玉米的遗传转化以及编辑效果的功能验证。

具体如下：

1.基因编辑载体的构建。

本发明通过bsai酶切，切去骨架载体pcxb053(未米生物科技(江苏)有限公司构建)中的ccdb序列，把靶标序列(共设计2个靶点，具体见表5)通过t4连接酶连接到u6和grna之间。具体的构建流程如下：

1)合成引物

primertf：attggggctcagagtgaacctcc；primertr:aaacggaggttcactctgagccc。在上海生工合成，用超纯水溶解后混合均匀。

2)配annealingbufferte

tris-clph8.010mm

edta0.1mm

nacl：50mm

3)退火连接

连接体系：

annealingbuffer50μl

mixprimer5μl

连接程序：

95℃3min

0.1℃/s匀速下降

20℃1min

储存在-20℃

4)骨架载体用bsai限制酶酶切

酶切体系：

37度酶切5h后，直接回收(使用quangen回收试剂盒)。

回收产物加水稀释到50ng/μl，加等量的t4buffer稀释，存放于-20℃。

5)t4酶连

酶连体系：

酶连程序：

25℃2h(pcr仪中)

6)转化大肠杆菌

酶连反应液10μl与100μl大肠杆菌5a感受态混合，严格静置冰浴30min，42℃热激35s，冰浴2min，加入500l无抗生素lb，37℃震荡复苏1h。3000g离心1分钟，吸走上清液，留下100μl液体吹打混匀细菌细胞后涂皿(含50mg/l卡那霉素的固体培养基)，37℃倒置培养12h。

挑取阳性克隆测序和抽提质粒。测序验证引物为puv3-r：ctggcgaaagggggatgtgctgcaa。

2.玉米遗传转化

转化受体为kn5585(未米生物科技(江苏)有限公司选育的自交系)，具体操作步骤参照实施例2。

3.基因编辑植株的性状评价

对所有t1代材料提取苗期dna检测基因编辑情况，设计引物扩增靶标编辑区段，扩增体系为：dna：3μl，双向引物各1μl，2×taqmix：7.5μl，ddh2o：2.5μl，总体积10μl。pcr反应条件如下：(1)94℃5分钟，(2)94℃40秒，(3)57℃30秒，(4)72℃60秒，(5)从(2)步－(4)步循环35次，(6)72℃7分钟，(7)4℃保存。pcr产物测序分析编辑类型。经过对各基因编辑材料靶点处的基因型分析，发现zmcol14-1、zmcol14-2、zmcol14-3三个材料的靶点发生了变化，可以导致移码突变(表5)。

表5基因编辑的靶点信息和编辑材料的编辑基因型

下划线标识靶点序列，方框内为pam序列；“-”表示碱基缺失，粗体表示碱基插入。

在海南试验点调查基因编辑材料的花期性状。结果显示3个基因编辑材料的抽雄期、散粉期和吐丝期与未编辑的对照材料相比均没有显著差异(表6)，表明在短日照条件下基因敲除后不会影响玉米的花期。

表6玉米基因编辑材料短日照条件下的开花期性状数据

数据以“平均值±标准差”表示；“+”表示编辑样品，“-”表示未编辑样品；不同字母表示各组材料编辑样品和未编辑样品间在p＝0.05水平的显著性差异。

进一步在吉林试验点调查基因编辑材料的花期性状。zmcol14-1基因编辑材料的抽雄期和散粉期均比其未编辑的对照材料要早，吐丝期变化不显著；zmcol14-2基因编辑材料的抽雄期比其未编辑的对照材料要早，吐丝期和散粉期均变化不显著；zmcol14-3基因编辑材料的散粉期比其未编辑的对照材料要早，吐丝期和抽雄期均变化不显著(表7)。这在一定程度上证明了zmcol14-1基因对玉米花期的抑制作用。由于靶点编辑类型的不同，会造成不同的突变基因对花期影响程度的差异。zmcol14-1材料的突变基因对花期的影响程度最大，其次是zmcol14-2。

表7玉米基因编辑材料长日照条件下的开花期性状数据

进一步调查了基因编辑的株高性状。zmcol14-1和zmcol14-2阳性基因编辑材料的株高和穗位高均比其阴性对照材料要高；zmcol14-3阳性基因编辑材料的株高比其阴性对照材料要高，穗位高变化不显著(表8)。这证明了zmcol14基因对玉米株高和穗位高的抑制作用。由于靶点编辑类型的不同，会造成不同的突变基因对株高和穗位高影响程度的差异。zmcol14-1和zmcol14-2材料的突变基因对株高和穗位高均有较大程度的影响。

表8玉米基因编辑材料的株高和穗位高性状数据(吉林)

综合株高、穗位高和花期性状的数据，zmcol14-1和zmcol14-2基因编辑材料在长日照条件下表现为早花高杆，这两个材料的突变基因序列如seqidno.10-seqidno.11所示。将这两个突变基因的任意一个导入到其他玉米材料中，可以实现在长日照条件下对花期的提早和株高穗位高的增加，从而用于培育适用于长日照条件下种植的早花高杆玉米品种。

虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施方案对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。

序列表

<110>吉林省农业科学院，华中农业大学，未米生物科技（江苏）有限公司

<120>控制玉米株高和穗位高基因zmcol14及其应用

<130>1

<160>6

<170>siposequencelisting1.0

<210>1

<211>6236

<212>dna

<213>zeamays

<400>1

cacgtcctcttccagtctccactctccacgtgttccatcccattctcctccccgcgcccc60

gtccccctcgcctcgcttatcccccggacccggccgacccctgctctgctcgacgtgttg120

gcaaaacctcctcctagtcctctcgcagaaggagcttgttttctttaccggcgcggcaac180

agcgaaagcttctcgatctctctccccgctgctccgccgctgggtacggtggttccgcgc240

ctcggacgcgcccgtgcgggttggttggatccgagctctgtgcagaagcgccgccgcgac300

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cccgtctaattgcttgtatctgcagccagttcatctggaaagggttttatctgttctttt720

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