一种用于液相色谱在线滤芯及单向阀的清洗液的制作方法

本发明属于化学溶液配方领域，涉及一种用于液相色谱在线滤芯及单向阀的清洗液。

背景技术：

液相色谱仪在化学分析领域有着大量的应用，在使用过程中，由于流动相及其进样液中含有痕量难以清除的杂质和/或易于吸附于在线滤芯及其管路的化学分子及其化合物，同时在线滤芯或者单向阀中在测试时，会附着难以去除的蛋白和金属离子，使用常规的清洗液难以清洗干净。

常用的液相色谱管路内径为0.25μm以内，在线滤芯清除或吸附流动相中的痕量物质的能力是保证液相色谱系统压力恒定，尤其是在保证液相色谱柱柱压恒定和分离能力中发挥着重要作用。因此及时、有规律的清洗在线滤芯及单向阀是非常有必要的。目前市面上没有单向阀的清洗液，当在线滤芯和（或）单向阀污染后目前主要进行以下两个方面的处理：1.进行简单的甲醇和(或)纯水超声后，此操作无法解决痕量物质的吸附问题，特别是吸附较多时；2.直接更换新的单向阀，此办法可以解决单向阀污染问题，成本较高且单向阀均依赖进口，存在卡脖子问题。

因此，高效液相色谱仪在线滤芯和单向阀的清洗液有待进一步开发和改进。

技术实现要素：

为了解决上述问题，本发明提供了一种用于液相色谱在线滤芯和单向阀的清洗液，该清洗液可以有效清除单向阀的杂质残留，而且不会产生新的污染。

本发明是通过以下技术方案实现的：

一种用于液相色谱在线滤芯和单向阀的清洗液，清洗液配方组成为六部分：（1）甲醇（色谱纯）与超纯水的体积比为1：1；（2）甲醇（色谱纯）；（3）磷酸与三丁基焦磷酸铵质量比为95:5；（4）磷酸与聚氧乙烯烷基醚（glaurin）质量比为98:2；（5）超纯水；（6）磷酸（色谱纯）与超纯水的体积比为30：70。

上述所述的液相色谱在线滤芯和单向阀的清洗方法，包括以下步骤：第一步：将在线滤芯/单向阀先放入（1）液中，超声；第二步：将在线滤芯移入（6）液中，继续超声；第三步：将在线滤芯/单向阀置于（3）液中超声；第四步，将在线滤芯/单向阀放入（2）液中超声；第五步，将在线滤芯/单向阀放入（4）液中超声；第六步，将在线滤芯/单向阀放入（5）液中超声，直至水溶液ph值为7.0；第七步：将在线滤芯/单向阀移入（1）液中超声，取出在线滤芯/单向阀即可清洗干净。

优选地，所述的第一步至第七步中的超声的条件为时间为20-30min，超声功率为3000-4000w。

在清洗时，先用甲醇与纯水清洗，可以保持单向阀或者在线滤芯的效率，如果直接用有机相清洗，会使其微环境中高有机相、低水相，这会使单向阀或者在线滤芯效率下降。在本申请中先采用甲醇和超纯水清洗，可以先使保持稳定的环境，再使用磷酸与超纯水清洗，产生一个弱酸性环境，在磷酸与三丁基焦磷酸铵的环境下，可以清除微量的蛋白并能够螯合金属离子，磷酸与聚氧乙烯烷基醚（glaurin）既可以清除蛋白，而且不会产生残留，同时可以提高清洗的效率。在多种清洗液的联合使用下，可以提高溶液中蛋白质的浓度，防止其的分解和非特异性吸附，溶液中的蛋白能够不易与容器表面结合，能防止蛋白质吸附到管壁而产生残留，减轻不利环境因素如加热，表面张力及化学因素引起的残留。而且在本申请中没有使用强酸或者强碱性的物质，避免了对于单向阀或者在线滤芯的腐蚀，延长了使用寿命。

有益效果：

1.该清洗液通过三丁基焦磷酸铵在磷酸的弱酸性环境中可以有效将微量蛋白及金属离子清除，而且通过加入聚氧乙烯烷基醚进行超声清洗，在线滤芯和单向阀中不会残留三丁基焦磷酸铵。

2、经清洗液配方流程清洗后，在线滤芯和单向阀吸附的痕量物质可以完全清除，且对其无损伤，经多次清洗后，经试验单向阀经重复清洗50次后，无损伤，性能如初。

3、经清洗液清洗可以提高利用率，节省费用，减少对国外技术的依赖，为国内科研攻关留出时间，突破技术壁垒。

附图说明

图1是采用实施例1的清洗液和清洗方法清洗后的检测峰形图；

图2为未采用实施例1清洗液之前的检测峰形图；

图3为采用对比例1的清洗液和清洗方法清洗后的检测峰形图；

图4为采用对比例2的清洗液和清洗方法清洗后的检测峰形图；

图5采用对比例3的清洗液和清洗方法清洗后的检测峰形图；

图6采用实施例1方法50次后检测峰形图。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明进行进一步说明：

实施例1

一种用于液相色谱在线滤芯的清洗液，清洗液配方组成为六部分：（1）甲醇（色谱纯）与超纯水的体积比为1：1；（2）甲醇（色谱纯）；（3）磷酸与三丁基焦磷酸铵质量比为95:5；（4）磷酸与聚氧乙烯烷基醚质量比为98:2；（5）超纯水；（6）磷酸（色谱纯）与超纯水的体积比为30：70。

在线滤芯清洗方法为：

第一步：将分析防腐剂、氨基酸后污染的在线滤芯先放入适量（1）液中，超声；第二步：将在线滤芯移入（6）液中，继续超声；第三步：将在线滤芯置于（3）液中超声；第四步，将在线滤芯放入（2）液中超声；第五步，将在线滤芯放入（4）液中超声；第六步，将在线滤芯放入（5）液中超声，直至水溶液ph值为7.0；第七步：将在线滤芯移入（1）液中超声，取出在线滤芯即可清洗干净；第一步至第七步中的超声的条件为：时间为30min，超声功率为4000w。

实施例2

一种用于液相色谱单向阀的清洗液，清洗液配方组成为六部分：（1）甲醇（色谱纯）与超纯水的体积比为1：1；（2）甲醇（色谱纯）；（3）磷酸与三丁基焦磷酸铵质量比为95:5；（4）磷酸与聚氧乙烯烷基醚质量比为98:2；（5）超纯水；（6）磷酸（色谱纯）与超纯水的体积比为30：70。

单向阀清洗方法为：

第一步：将分析防腐剂、氨基酸后污染的单向阀先放入适量（1）液中，超声；第二步：将单向阀移入（6）液中，继续超声；第三步：将单向阀置于（3）液中超声；第四步，将单向阀放入（2）液中超声；第五步，将单向阀放入（4）液中超声；第六步，将单向阀放入（5）液中超声，直至水溶液ph值为7.0；第七步：将单向阀移入（1）液中超声，取出单向阀/单向阀即可清洗干净；第一步至第七步中的超声的条件为：时间为20min，超声功率为3000w。

对比例1

使用的清洗液与实施例1相同，清洗液的使用顺序不同。

在线滤芯清洗方法为：

第一步：将分析防腐剂、氨基酸后污染的在线滤芯先放入适量（2）液中，超声；第二步：将在线滤芯移入（6）液中，继续超声；第三步：将在线滤芯置于（3）液中超声；第四步，将在线滤芯放入（1）液中超声；第五步，将在线滤芯放入（4）液中超声；第六步，将在线滤芯放入（5）液中超声，直至水溶液ph值为7.0；第七步：将在线滤芯移入（1）液中超声，取出在线滤芯即可清洗干净；第一步至第七步中的超声的条件为：时间为30min，超声功率为4000w。

该过程中先使用的甲醇进行清洗，会造成清洗的不彻底，有残留蛋白。

对比例2

一种用于液相色谱在线滤芯的清洗液，清洗液配方组成为六部分：（1）甲醇（色谱纯）与超纯水的体积比为1：1；（2）甲醇（色谱纯）；（3）磷酸；（4）磷酸；（5）超纯水；（6）磷酸（色谱纯）与超纯水的体积比为30：70。

清洗的方法与实施例2相同，该过程中没有磷酸与三丁基焦磷酸铵配合使用，也没有使用磷酸与聚氧乙烯烷基醚配合使用，也会造成蛋白和金属离子的残留，峰形的拖尾。

对比例3

在线滤芯清洗方法为：

第一步：将分析防腐剂、氨基酸后污染的在线滤芯先放入超纯水中超声，超声；第二步：将在线滤芯移入30%体积磷酸中，继续超声；第三步：将在线滤芯置于超纯水中，超声；第四步，将在线滤芯放入5％硝酸溶液中超声；第五步，将在线滤芯放入超纯水中超声；第六步，将在线滤芯放入甲醇中超声；第一步至第六步中的超声的条件为：时间为30min，超声功率为4000w。

清洗的方法使用5％硝酸，硝酸具有强腐蚀性，会造成在线滤芯性能下降，基线不稳、噪声变大和峰面积的减小。

发明人对采用本发明的清洗方法清洗后的在线滤芯与采用对比例1-3清洗后的在线滤芯进行检测峰形分析，结果如图1-图5所示，其中，图3显示了对比例1方法，标样峰面积出现拖尾现象，图1-图2显示了采用本发明的清洗方法前后的对比，使用清洗方法后，检测的标样峰面积正常。

在本实施例中，发明人使用采用本发明的清洗方法50次后进行防腐剂检测，检测方法依据gb5009.28-2016，检测结果如图6所示。检测结果显示，使用本发明提出的清洗方法清洗后的在线滤芯，标准品峰型以及加标样品目标峰峰型完全对称，不会出现拖尾的现象，检测结果符合国标。

本文中所描述的具体实施例仅仅是对本发明精神作举例说明。本发明所属技术领域的技术人员可以对所描述的具体实施例做各种修改或补充或采用类似的方式替代，但并不会偏离本发明的精神或者超越所附权利要求书所定义的范围。