技术特征:
1.一种h5n8亚型流感病毒rt
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pcr检测引物,其特征在于,包括以下8组引物:针对h5n8亚型流感病毒pb1、pb2、pa、m、np、ha、na、ns基因相对保守区域分别设计8组引物,即共计有正向引物8条,反向引物8条;所述8组h5n8亚型流感病毒特异性引物包括seq id no.1~16,其中seq id no.1~2特异性扩增pb1基因,seq id no.3~4特异性扩增pb2基因,seq id no.5~6特异性扩增pa基因,seq id no.7~8特异性扩增m基因,eq id no.9~10特异性扩增np基因,seq id no.11~12特异性扩增ha基因,seq id no.13~14特异性扩增na基因,seq id no.15~16特异性扩增ns基因。2.rt
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pcr检测引物在扩增h5n8亚型流感病毒基因中的应用,其特征在于,包括以下步骤:s1:利用rna提取试剂从待测样本中提取rna;s2:利用m
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mlv反转录酶合成cdna;s3:利用权利要求1中所述的引物对h5n8流感病毒8个基因进行pcr扩增;s4:利用琼脂糖凝胶电泳检测,判断待检测样本中h5n8流感病毒是否阳性。3.根据权利要求2所述的rt
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pcr检测引物在扩增h5n8亚型流感病毒基因中的应用,其特征在于,还包括rt
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pcr检测引物在测定h5n8基因组序列及其演化分析中的应用,包括以下步骤:s1:利用dna胶回收试剂盒将扩增得到的h5n8流感病毒8个基因目的片段胶回收;s2:将h5n8流感病毒8个基因目的片段连接至pmd18
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t载体中并筛选阳性克隆;s3:将包含h5n8流感病毒8个基因片段的阳性克隆进行测序;s4:利用mega6.0软件对h5n8流感病毒8个基因进行遗传演化分析。4.根据权利要求3所述的rt
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pcr检测引物在扩增h5n8亚型流感病毒基因中的应用,其特征在于,所述流感病毒包括h5n8亚型流感病毒。
技术总结
本发明公开了一种H5N8亚型禽流感病毒RT
技术研发人员:刘存 刘砚涵 李佳璇 陈静 孙圣福 邢林林 韦雪华 王敏
受保护的技术使用者:山东省动物疫病预防与控制中心
技术研发日:2021.09.13
技术公布日:2021/11/30