一种耐热木糖苷酶及其应用的制作方法

文档序号:29073479发布日期:2022-03-01 22:02阅读:来源:国知局

技术特征:
1.一种耐热木糖苷酶,其特征在于,所述木糖苷酶具有seq id no.4所示的氨基酸序列。2.权利要求1所述木糖苷酶的编码基因。3.如权利要求2所述的编码基因,其特征在于,具有seq id no.3所示的核苷酸序列。4.包含权利要求2所述编码基因的重组载体或重组菌株。5.如权利要求4所述的重组载体,其特征在于,表达载体为ppic9质粒。6.如权利要求5所述的重组菌株,其特征在于,宿主细胞为毕赤酵母gs200。7.权利要求所述重组载体或重组菌株在生产权利要求1所述木糖苷酶中的应用。8.如权利要求7所述的应用,其特征在于,采用所述重组菌株发酵生产木糖苷酶的方法如下:按发酵培养基体积10-15%接种量,培养温度30-31℃,转速200-800rpm,风量2m3/h-6m3/h,通风搅拌培养,ph 5.0-5.5,第0-20h,流加碳源40-50%葡萄糖,流加速度为600-800g/h,溶氧20-30%,培养至菌体湿重160-180g/l,停补碳源,溶氧反弹至80%以上,保持1h;流加甲醇,流加速度为50-200g/h,控制溶氧20-30%,培养至145-155h发酵结束。9.权利要求1所述木糖苷酶在水解木糖苷中的应用。

技术总结
本发明属于生物技术领域,具体涉及一种耐热木糖苷酶及其应用。本发明通过PCR获得来自曲霉菌突变菌的耐热木糖苷酶突变基因A-2,并将A-2构建到pPIC9质粒上,得到重组质粒pPIC9-A-2,并转化到毕赤酵母中,筛选得到高表达耐热木糖苷酶的重组菌,其产耐热木糖苷酶发酵酶活可达4508U/mL。本发明提供的耐热木糖苷酶在90℃的条件下处理16h,该酶相对活性仍剩余80%左右,具有较好的耐热性。具有较好的耐热性。具有较好的耐热性。


技术研发人员:刘文龙 曹世源 王克芬 王兴吉 郭庆文 刘胜利
受保护的技术使用者:山东隆科特酶制剂有限公司
技术研发日:2021.11.22
技术公布日:2022/2/28
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