一种丙酚替诺福韦乳糖杂质的制备方法与流程

1.本发明涉及药物杂质制备领域，具体的，涉及一种丙酚替诺福韦乳糖杂质的制备方法。


背景技术：

2.富马酸丙酚替诺福韦，英文名tenofovir alafenamide fumarate(taf)，是一种核酸逆转录酶抑制剂，由美国吉利德科学公司开发，单方商品名为韦立得，于2018年获nmpa批准上市，在临床上用于治疗慢性乙型肝炎；复方品种必妥维，于2019年获nmpa批准上市，在临床上用于治疗艾滋病毒(hiv)感染。必妥维上市不到两年时间，2020年销售额达到了72.59亿美元，创下了艾滋病药物的单药销售记录。
3.taf与目前最常用的乙肝药富马酸替诺福韦二吡呋酯(tdf)都是替诺福韦(tfv)的前药，taf仅用十分之一的剂量即可产生与tdf相当的抗病毒作用，从而大大降低了肾毒性和骨质疏松风险，具有更高的安全性和耐受性。
4.taf分子结构如下所示：
[0005][0006]
已知伯胺和仲胺与乳糖经过缩合反应生成乳糖结合杂质(maillard l.r.,comptes rendus,1912；154(2):66；colaco c.,collett m.,roser b.,chem oggi,1996；14:32)，但是尚无文献报道taf乳糖结合杂质得制备方法。


技术实现要素：

[0007]
本发明提出一种丙酚替诺福韦乳糖杂质的制备方法，获得纯度在90％以上的taf乳糖结合杂质，提高了富马酸丙酚替诺福韦标准品的质量。
[0008]
本发明的技术方案如下：
[0009]
一种丙酚替诺福韦乳糖杂质的制备方法，所述丙酚替诺福韦乳糖杂质为n6-[2,3-二羟基-5-羟甲基-4-(3,4,5-三羟基-6-羟甲基-四氢-吡喃-2-基氧基)-四氢-吡喃-2-基]-9-{(r)-2-[((s)-{[(s)-1-(异丙氧基羰基)乙基]氨基}-苯氧基氧膦基)甲氧基]丙基}腺嘌呤，所述制备方法包括以下步骤：
[0010]
s1、将丙酚替诺福韦溶解于有机溶剂中；
[0011]
s2、升温，与乳糖经缩合反应蒸馏去除有机溶剂，得到粗品；
[0012]
s3、将所述粗品纯化得到所述丙酚替诺福韦乳糖杂质。
[0013][0014]
作为进一步的技术方案，所述有机溶剂为二甲基亚砜或n,n-二甲基甲酰胺。
[0015]
优选的，所述有机溶剂为二甲基亚砜。
[0016]
作为进一步的技术方案，所述丙酚替诺福韦与所述有机溶剂的质量体积比为1g:(1～1.2ml)。
[0017]
作为进一步的技术方案，所述有机溶剂含水量＜0.1％。
[0018]
作为进一步的技术方案，所述丙酚替诺福韦与所述乳糖的摩尔比为1：4
[0019]
作为进一步的技术方案，所述步骤s2中，温度为50～100℃，反应时间为25～40h。
[0020]
作为进一步的技术方案，所述温度90～95℃，反应时间为35～40h。
[0021]
作为进一步的技术方案，所述在步骤s3中，粗品纯化以十八烷基键合硅胶为固定相，流动相a为碳酸氢铵溶液，流动相b为乙腈，通过梯度洗脱后，冷冻干燥。
[0022]
一种根据所述的丙酚替诺福韦乳糖杂质的制备方法制备得到的丙酚替诺福韦乳糖杂质在丙酚替诺福韦质量控制中的应用。
[0023]
本发明的有益效果为：
[0024]
本发明中提供了一种丙酚替诺福韦乳糖杂质(n6-[2,3-二羟基-5-羟甲基-4-(3,4,5-三羟基-6-羟甲基-四氢-吡喃-2-基氧基)-四氢-吡喃-2-基]-9-{(r)-2-[((s)-{[(s)-1-(异丙氧基羰基)乙基]氨基}-苯氧基氧膦基)甲氧基]丙基}腺嘌呤)的制备方法，以丙酚替诺福韦为反应物，经缩合反应得到taf乳糖结合杂质，合成方法简单，便于操作，可以获得纯度在90％以上的taf乳糖结合杂质，提高了富马酸丙酚替诺福韦标准品的质量。
附图说明
[0025]
下面结合附图和具体实施方式对本发明作进一步详细的说明。
[0026]
图1为本发明实施例1制备得到的杂质氢谱；
[0027]
图2为本发明实施例1制备得到的杂质碳谱。
具体实施方式
[0028]
下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都
涉及本发明保护的范围。
[0029]
实施例1
[0030]
丙酚替诺福韦(30g)和二甲基亚砜(315ml，水分为0.05％)到500ml反应瓶中，搅拌加入乳糖(86g)，在温度90～95℃下反应35小时。将反应液减压蒸馏去除二甲基亚砜，得到粗品，粗品用制备柱纯化，制备条件如下：
[0031]
以十八烷基键合硅胶为固定相，流动相a:碳酸氢铵溶液，流动相b:乙腈。梯度洗脱条件如下：
[0032]
time(min)流动相a流动相b070％30％2150％50％21.55％95％265％95％26.590％10％30.590％10％
[0033]
得到的制备液冷冻干燥，得到taf乳糖结合杂质，hplc纯度97.2％。
[0034]
taf乳糖结合杂质结构确证数据分析：
[0035]
hr-esi(m/z)：[m+h]
+
＝801.3184；[2m+h]
+
＝1601.5817
[0036]1h-nmr(400mhz,dmso-d6)δ(ppm):8.308(s，h)，8.221(s，h)，7.703(d，h，j＝6.0hz)，7.287(t，2h，j＝7.6hz)，7.127(t，h，j＝7.6hz)，7.042(d，2h，j＝7.6hz)，6.180(m，h)，5.630(t，h，j＝11.2hz)，5.268(d，h，j＝4.8hz)，5.093(d，h，j＝3.2hz)，4.850(sep，h，j＝6.4hz)，4.809(d，h，j＝2.0hz)，4.743(t，h，j＝4.8hz)，4.701(brs，h)，4.551(d，h，j＝4.0hz)，4.508(t，h，j＝5.6hz)，4.332(dd，h，j＝14.4hz,2.8hz)，4.274(d，h，j＝6.4hz)，4.192(dd，h，j＝14.4hz,6.4hz)，3.839～4.009(overlap，4h)，3.780(dd，h，j＝13.2hz,9.6hz)，3.484～3.654(overlap，8h)，3.415(m,h)，3.350(m，2h)，1.153(d，9h,j＝6.4hz)，1.084(d，3h,j＝6.0hz)。
[0037]
13
c-nmr(400mhz,dmso-d6)δ(ppm):17.08，20.78，21.85，21.89，47.42，49.54，60.77，60.91，64.53，68.41，68.65，70.93，71.16，71.41，71.62，73.75，75.90，75.95，78.32，80.97，103.99，119.42，120.93，124.85，129.98，142.63，150.62，150.71，152.48，154.93，173.36。
[0038]
实施例2
[0039]
丙酚替诺福韦(20g)和n,n-二甲基甲酰胺(200ml，水分为0.02％)加入到反应瓶中，搅拌加入乳糖(57g)，在温度90～95℃下反应40小时，将反应液减压蒸馏去除n,n-二甲基甲酰胺，得到粗品。
[0040]
粗品用制备柱纯化，制备条件同实施例1，得到的制备液冷冻干燥，得到taf乳糖结合杂质，hplc纯度95.6％。
[0041]
以上仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。