一株用于污泥堆肥除臭的巨大芽孢杆菌及其应用的制作方法

1.本发明涉及功能微生物筛选与应用技术领域，具体涉及一株新型巨大芽孢杆菌及其 在污泥堆肥除臭中的应用。


背景技术：

2.我国的国家标准《恶臭污染物排放标准》(gb14554-93)中将恶臭污染物定义为： 一切刺激嗅觉器官引起人们不愉快及损坏生活环境的气体物质。恶臭气体可以污染环境、 危害人体健康，在环境六大公害中，仅次于噪声。同所有的污染一样，每种恶臭污染物 都会表现出各自特有的危害，对人体的健康造成损害。人通过呼吸系统吸入这些臭气， 常常伴有症状是：恶心、头疼、食欲不振、营养不良、喝水减少、妨碍睡眠、嗅觉失调 和诱发哮喘等。此外，臭味也会让人精神上感到压抑和厌烦，容易造成精神恍惚、烦躁， 注意力不集中，工作效率低下，甚至导致思维迟钝和记忆力减退。人如果长期处于臭气 环境中，哪怕是低浓度的，也会危害自身的神经、内分泌、呼吸、循环等系统，继而引 发嗅觉功能、消化功能的衰退等，情况严重者可破坏高级的神经调节系统，如大脑皮层 的调节功能。
3.早期发展的除臭技术主要是借鉴化工原理及相关操作技术，如吸收、吸附、氧化、 燃烧等方法，这些技术已经非常成熟、可靠和有效，且俱备完善的设计标准、制造工艺、 工程实施和运行管理经验。因此，化工单元操作仍然是污染气体处理方法的主流，目前 国内外污染气体处理技术主要分为物理法、物理化学法和生物法等。
4.物理法分为稀释法和掩蔽剂法。稀释法的途径有两个，一是通过增强大气湍流，使 臭气源和受污染点之间的距离逐渐扩大；二是通过烟囱抬升排放源的高度，从而降低影 响范围内的臭气浓度。稀释法适用于浓度比较低的工业有组织排放源的恶臭处理，费用 低，运行简单。物理化学法包含水洗法、化学吸收法、吸附法、燃烧法等。生物法主要 是依靠微生物的作用。微生物通过一系列的生理生化作用，把臭气中的恶臭组分氧化分 解，一部分作为营养物质供自身生长，另一部分转化为无臭无害的成分排入气相或水相 中。将人工筛选的特定微生物群固定于生物载体内和表面上，当污染气体经过生物表面 时被特定微生物捕获并消化掉，从而使有毒有害污染物得到去除。去除率高，运行成本 低，无二次污染。
5.上世纪80年代初，日本琉球大学农学系比嘉照夫教授培养出em菌群(即被称为 有效微生物群，effective microorganisms)，em广泛的应用于环保领域，在污水处理、 净化水质、生物除臭方面都有一定的效果。这主要得益于em菌群的组成成分复杂，拥 有多种环境友好型的细菌或真菌，且菌群之间相互作用协调，能共同完成具有净化环境、 除臭的功效。许丽娟等为了治理城市生活垃圾对环境造成的臭气污染，从环境中分离出 降氨氮和硫化氢的菌株各两株。在实验室中，菌株对氨的去除率达到85％以上，对硫化 氢的去除率达到60％以上，在对垃圾进行除臭时，在24小时内，与对照相比，恶臭明 显降低2个臭味等级。贺亮等从污水处理厂污泥中驯化得到脱硫微生物和脱氮微生物， 培养驯化两周后，对软性纤维为填料的生物滤塔进行脱硫微生物的挂膜，以沸石为生物 载体的sbr富集脱氮微生物，该组合能够快速启动反应器，并在运行一周时可以达到 较好的脱硫除氮的能力，分别
泛应用于农业生产领域，效果显著，应用前景广阔。
附图说明
20.图1为ybg02菌株的平板菌落形态图；
21.图2为ybg02菌株的maldi-tof ms质谱图。
具体实施方式
22.本发明实施例中选用的设备和试剂可以选自市售任意一种。对于实施例中所用到的 具体方法或材料，本领域技术人员可以在本发明技术思路的基础上，根据已有的技术进 行常规的替换选择，而不仅限于本发明实施例的具体记载。
23.实施例中使用的培养基配方：
24.富集培养基：mgcl2·
6h2o 0.8g，nh4cl 1.0g，kh2po
4 2.0g，nahco
3 2.0g，na2s2o
3 5.0g， 蒸馏水1000ml，ph 6.8～7.2，121℃灭菌20min；
25.分离培养基：在上述富集培养基中加入15～20g琼脂粉即成为固体培养基。
26.实施例中使用的腐熟剂是购于山东蔚蓝生物科技有限公司的腐熟发酵接种剂源康 宝，50亿cfu/g。
27.下面结合具体实施例进一步阐述本发明。
28.实施例1除臭菌株的筛选
29.1、样品
30.污泥样品：采集自河南污水处理厂活性污泥。
31.2、菌株的富集培养和纯化分离
32.取1g污泥加入到含有99ml无菌水的培养瓶中，并加入几粒玻璃珠，制成混悬液； 取1ml混悬液接入含有50ml富集培养基的培养瓶中，封口，置于30℃生化培养箱中 静置培养3-7d。富集培养物产气多、浑浊度大，将其涂布于分离培养基，30℃培养2d， 分别挑出单菌落在营养琼脂培养基上继续纯化2～3次。将纯化的单菌落分别接种到 50ml lb液体培养基中，37℃，220r/min培养14h。采用平板计数法检测各菌株发酵液 中的有效活菌数，筛选出超过108cfu/ml的菌株。
33.最终，申请人筛选到3株菌，分别命名为ybg01，ybg02，ybg03，其发酵液中的有 效活菌数分别为1.28
×
108cfu/ml，1.94
×
108cfu/ml，2.56
×
108cfu/ml。
34.2、除氨气和硫化氢菌株的复筛
35.(1)降氮效果
36.将ybg01、ybg02、ybg03分别接种到lb液体培养基中，30℃，150r/min培养24h， 离心收集菌体后用生理盐水重悬，制成浓度为0.5
×
102cfu/ml的菌悬液。将菌悬液按 1％的体积比接种至降氮筛选培养基(nano
2 1g，ch3coona 4.8g，琼脂15g，加水至 1l，ph 7.5)中，在30℃，150r/min条件下培养20h。
37.培养结束后，分别取样测定od
600
，8000r/min，离心10min后，取上清测定亚硝 态氮浓度，计算亚硝态氮和总氮去除率。
38.结果显示，ybg02菌株对亚硝态氮的去除率高达80％，总氮去除率高达75％，且无 硝态氮和总氨态氮积累。而ybg01、ybg03菌株对亚硝态氮和总氮的去除率均小于50％。
39.(2)降硫效果
40.将ybg01、ybg02、ybg03分别接种于lb液体培养基中，30℃，150r/min培养3d。 获得种子液，调整菌液浓度为7
×
10
6-9
×
106cfu/ml。
41.取100ml脱硫菌液体选择培养基(蛋白胨10g，牛肉膏2g，nacl
2 5g，na2s.9h2o
2 3g， 蒸馏水1l)加入到250ml三角瓶中，接种上述种子液，以没有接种菌液的培养基作为 空白对照，在30℃静置培养。定期通过碘量法测定培养基中硫化物的浓度。同时，以空 白对照培养基中硫化物浓度计100％，计算接种的培养基中硫化物的含量百分比。
42.硫化物含量百分比(％)＝接种培养基中硫化物浓度/空白对照培养基中硫化物浓度
ꢀ×
100％。
43.结果显示，接种ybg02菌株后第2天，培养基中硫化物的含量就降低了65％；到第 4天时，培养基中就检测不到硫化物的含量，降硫效果非常显著，取得了意料不到的技 术效果。而ybg01、ybg03菌株在第4天时仍能检出硫化物。
44.上述结果表明，本发明筛选获得的三株菌中，ybg02菌株对亚硝态氮和硫化物的降 解能力最强。
45.实施例2ybg02菌株的鉴定
46.2.1菌落形态鉴定
47.ybg02菌株的菌落形态如图1所示，菌落呈黄色，直径11-15mm，菌落边缘光滑， 中间隆起，菌体为短直杆状，革兰氏阳性菌，可产生芽孢；芽孢呈椭圆形，末端圆形， 孢子囊不膨胀；细胞单独或呈短链状存在。
48.2.2 16s rdna分子鉴定
49.采用试剂盒提取ybg02菌株的基因组。然后以该基因组为模板，利用特异性引物对 其16s rdna进行扩增。将扩增得到的pcr产物进行1％的琼脂糖凝胶电泳检测，并送测 序公司进行测序。
50.测序结果显示，pcr扩增产物的序列为seq id no:1。通过将该序列在ncbi数据库 中进行blast比对，发现其与巨大芽孢杆菌(bacillus megaterium)的相似性最高。 因此，初步确定ybg02菌株为巨大芽孢杆菌(bacillus megaterium)。
51.seq id no:1如下所示：
52.ttactccaccgacttcgggtgttacaaactctcgtggtgtgacgggcggtgtgtacaaggcccgggaacgta ttcaccgcggcatgctgatccgcgattactagcgattccagcttcatgtaggcgagttgcagcctacaatccgaa ctgagaatggttttatgggattggcttgacctcgcggtcttgcagccctttgtaccatccattgtagcacgtgtg tagcccaggtcataaggggcatgatgatttgacgtcatccccaccttcctccggtttgtcaccggcagtcacctt agagtgcccaactaaatgctggcaactaagatcaagggttgcgctcgttgcgggacttaacccaacatctcacga cacgagctgacgacaaccatgcaccacctgtcactctgtcccccgaaggggaacgctctatctctagagttgtca gaggatgtcaagacctggtaaggttcttcgcgttgcttcgaattaaaccacatgctccaccgcttgtgcgggccc ccgtcaattcctttgagtttcagtcttgcgaccgtactccccaggcggagtgcttaatgcgttagctgcagcact aaagggcggaaaccctctaacacttagcactcatcgtttacggcgtggactaccagggtatctaatcctgtttgc tccccacgctttcgcgcctcagcgtcagttacagaccaaaaagccgccttcgccactggtgttcctccacatctc tacgcatttcaccgctacacgtggaattccgcttttctcttctgcactcaagttccccagtttccaatgaccctc cacggttgagccgtgggctttcacatcagacttaagaaaccgcctgcgcgcgctttacgcccaataattcc
ggat aacgcttgccacctacgtattaccgcggctgctggcacgtagttagccgtggctttctggttaggtaccgtcaag gtacgagcagttactcttgtacttgttcttccctaacaacagagttttacgacccgaaagccttcatcactcacg cggcgttgctccgtcagactttcgtccattgcggaagattccctactgctgcctcccgtaggagtctgggccgtg tctcagtcccagtgtggccgatcaccctctcaggtcggctatgcatcgttgccttggtgagccgttacctcacca actagctaatgcaccgcgggcccatctgtaagtgatagccgaaaccatctttcaatcatctcccatgaaggagaa gatcctatccggtattagcttcggtttcccgaagttatcccagtcttacaggcaggttgcccacgtgttactcac ccgtccgccgctaacgtcatagaagcaagcttctaa。
53.2.3 maldi-tof-ms蛋白质谱鉴定
54.取少量ybg02单菌落以薄膜的形式涂布于靶板上；加1μl质谱样本预处理试剂盒 中的裂解液，室温下自然晾干；加1μl质谱样本预处理试剂盒中的基质溶液覆盖样品， 室温下自然晾干；将样品靶放入质谱仪进行鉴定。鉴定结果显示，ybg02菌株为巨大芽 孢杆菌(bacillus megaterium)，其蛋白质谱峰图如图2所示。
55.申请人利用16s rdna测序和maldi-tof-ms蛋白质谱鉴定系统两种分子生物学手段 对ybg02菌株进行鉴定，鉴定结果一致。再结合ybg02菌株的菌落形态特征，申请人确 定该菌株为巨大芽孢杆菌(bacillus megaterium)，命名为巨大芽孢杆菌ybg02 (bacillus megaterium ybg02)。
56.申请人已于2021年1月13日将上述巨大芽孢杆菌ybg02(bacillus megateriumybg02)保藏于中国武汉武汉大学的中国典型培养物保藏中心，保藏编号为cctcc no： m2021052。
57.实施例3巨大芽孢杆菌ybg02的除臭效果评价
58.1、菌液的制备
59.将活化后的巨大芽孢杆菌ybg02接种于lb液体培养基中，37℃，220r/min培养14h， 获得活菌量为10
8-109cfu/ml的菌液。
60.2、臭源的制备
61.将污泥与花生壳秸秆按4:1质量比混合均匀，调节水分65％，取200g置于500ml 锥形瓶中，备用。
62.3、除臭试验
63.将制备的菌液调至1亿cfu/ml，按照1％的体积比接种到上述臭源中，对照组为接 种相同剂量的lb液体培养基。处理组和对照组各做三个重复。在37℃下培养6天，每 天在12:00左右利用泵吸式气体检测仪检测臭源中氨气和硫化氢的瞬时释放浓度(ppm)， 取平均值。具体结果见表1。
64.表1巨大芽孢杆菌ybg02对污泥的除臭效果
[0065][0066]
从表1的结果可以看出，与对照组相比，接种巨大芽孢杆菌ybg02后，处理组污泥 每天释放氨气和硫化氢的浓度均大幅下降，臭气释放的峰值也降低了41.8-62.8％。其中， 氨气的释放浓度最高降低了53％，硫化氢的释放浓度最高降低了92％，且在第5天，处 理组污泥已经完全消除硫化氢的排放，取得了意料不到的技术效果。
[0067]
4、腐熟度及其他堆肥指标检测
[0068]
腐熟度即为腐熟程度，指堆肥中有机物经矿化、腐殖化过程后达到稳定的程度。
[0069]
根据有机肥料ny/t525-2021新标准，发芽指数(gi)检测指标用来评价有机肥料 的腐熟度，且指数要≥70％。发芽指数越高表示腐熟物料对作物根系的毒力越小。
[0070]
gi的测定方法如下：
[0071]
称取上述腐熟6天后的污泥样品10g，加100ml蒸馏水，200rpm，25℃条件下振荡 30min；取滤液5ml，加到铺有滤纸的9cm培养皿内；每皿点播10粒饱满的黄瓜种子， 28℃恒温恒湿避光培养72h，同时以蒸馏水作对照，重复3次。分别统计各组黄瓜种子 的发芽率和种子根长，计算腐熟度(发芽指数)。
[0072]
gi＝(试验组的发芽率
×
种子根长)/(对照组的发芽率
×
种子根长)
×
100％。
[0073]
按照有机肥料ny/t525-2021的规定对腐熟物料的堆肥指标进行化验，具体结果见 表2。
[0074]
表2堆肥指标化验结果
[0075]
处理总养分(氮磷钾)有机质水分腐熟度(gi)ck5.35％35％80％12.75％处理组5.54％32％75％97.78％
[0076]
从表2的结果可以看出，与对照组相比，接种巨大芽孢杆菌ybg02的处理组污泥的 腐熟度高达97.78％，远超对照组，而且处理组污泥的总养分含量明显提高，有机质和水 分含量明显下降。从而说明，本发明提供的巨大芽孢杆菌ybg02能有效减少对氮源的消 耗，增加对有机质的利用率，大大提高污泥堆肥的腐熟度和肥效，效果非常显著。
[0077]
实施例4巨大芽孢杆菌ybg02的产酶能力评价
[0078]
1、产蛋白酶能力评价
[0079]
将实施例3制备得到的巨大芽孢杆菌ybg02菌液点种到含有脱脂牛奶的琼脂培养基 上，37℃培养48h，可以看到巨大芽孢杆菌ybg02周围有透明圈产生，透明圈直径为22 mm。从而说明，巨大芽孢杆菌ybg02可以产生一定的蛋白酶。
[0080]
进一步，将巨大芽孢杆菌ybg02菌液在4℃、12000rpm条件下离心5min，取上清 液；
利用下述方法检测巨大芽孢杆菌ybg02发酵上清液中蛋白酶的酶活。
[0081]
结果显示，巨大芽孢杆菌ybg02发酵上清液中蛋白酶的酶活为11.3u/ml。
[0082]
(1)酶活定义
[0083]
在一定条件下，每分钟水解底物，生成等同于1微摩尔酪氨酸的酶量，被定义为1 个单位。
[0084]
(2)蛋白酶活测定方法
[0085]
①
吸取1ml待测酶液于16
×
120mm的试管中，37℃预热5min；
[0086]
②
加入1ml酪蛋白于酶液中，不要震荡，37℃反应10min；
[0087]
③
加入2ml三氯乙酸终止液，涡旋振荡；
[0088]
④
在室温中放置5min，再次涡旋振荡；
[0089]
⑤
用whatman 1号滤纸过滤，直径9cm；
[0090]
⑥
取酶促反应液1ml，加5mlna2co3溶液，2mlfolin-酚试剂37℃反应20min
[0091]
⑦
680nm下比色。
[0092]
⑧
空白：将
②③
步骤互换，其余与样品反应一致，每一批次反应只需要只做1个空 白。
[0093]
(3)酶活计算
[0094]
标准曲线：ph7.5：mu/ml＝11
×
abs。
[0095]
酶活：u＝y
×
(1/1000)
×
n。
[0096]
其中，y—酶活mu；
[0097]
1/1000—mu到u的转换系数；
[0098]
n—稀释倍数。
[0099]
2、产内切葡聚糖酶能力评价
[0100]
利用下述方法检测巨大芽孢杆菌ybg02发酵上清液中内切葡聚糖酶的酶活。
[0101]
结果显示，巨大芽孢杆菌ybg02发酵上清液中内切葡聚糖酶活为1.8u/ml。
[0102]
(1)酶活定义
[0103]
在一定条件下，每分钟水解底物，生成等同于1微摩尔还原糖的酶量，被定义为1 个单位。
[0104]
(2)内切葡聚糖酶活测定方法
[0105]
吸取0.5ml待测酶液于16
×
120mm的试管中，40℃预热5min；加入一片底物于酶 液中，不要震荡，40℃反应10min；加入10ml trizma base终止液，涡旋振荡；在室温 中放置5min，再次涡旋振荡；用whatman 1号滤纸过滤，直径9cm；590nm下比色。 空白：将底物加入0.5ml浸提缓冲液中，其余与样品反应一致，每一批次反应只需要只 做1个空白。
[0106]
(3)酶活计算
[0107]
标准曲线：
[0108]
ph5.0：mu/ml＝3.3
×
abs.+0.04；
[0109]
ph6.5：mu/ml＝7
×
abs.+0.25；
[0110]
ph4.5：mu/ml＝4.1
×
abs.+0.7。
[0111]
酶活：u＝y
×
(1/1000)
×2×
n。
[0112]
其中，y—酶活mu；
[0113]
1/1000—mu到u的转换系数；
[0114]
2—0.5ml到1.0ml的转换系数；
[0115]
n—稀释倍数。
[0116]
3、产淀粉酶能力评价
[0117]
将实施例3制备得到的巨大芽孢杆菌ybg02菌液点种到含有淀粉的琼脂培养基上， 37℃培养48h，可以看到巨大芽孢杆菌ybg02周围有透明圈产生，透明圈直径为19mm， 从而说明，本发明提供的巨大芽孢杆菌ybg02可以产生一定的淀粉酶。
[0118]
4、产纤维素酶能力评价
[0119]
将实施例3制备得到的巨大芽孢杆菌ybg02菌液点种到含有羧甲基纤维素的琼脂培 养基上，37℃培养48h，可以看到巨大芽孢杆菌ybg02周围有透明圈产生，透明圈直径 为15mm。从而说明，本发明提供的巨大芽孢杆菌ybg02可以产生一定的纤维素酶。
[0120]
实施例5巨大芽孢杆菌ybg02在污泥堆肥中的应用
[0121]
1、巨大芽孢杆菌ybg02菌粉制备
[0122]
将巨大芽孢杆菌ybg02在5吨发酵罐中进行液体发酵，当镜检芽孢率达到90％以上 时停止发酵；5000rpm离心10min，去除发酵上清液，将菌泥进行喷雾干燥，制得活菌 量为100亿/g的菌粉。
[0123]
2、污泥堆肥物料搭配
[0124]
将400吨市政污泥与100吨花生壳秸秆混合均匀，做成宽2.5米，高1米，长60 米的梯形发酵堆体四条，备用。
[0125]
3、堆肥除臭实验
[0126]
(1)实验地点：河南省三门峡灵宝市新惠通发酵车间。
[0127]
(2)实验设计：
[0128]
将巨大芽孢杆菌ybg02菌粉用麸皮或秸秆粉分别稀释成3亿cfu/g，6亿cfu/g，12 亿cfu/g三种剂量。将稀释后的菌粉分别加入污泥发酵堆体，每个处理对应一个堆 体。
[0129]
空白对照组：无任何处理；
[0130]
处理组1：添加3亿cfu/g ybg02菌粉12.5kg；
[0131]
处理组2：添加6亿cfu/g ybg02菌粉12.5kg；
[0132]
处理组3：添加12亿cfu/g ybg02菌粉12.5kg。
[0133]
从每个堆体取6个点，每天12:00左右在各点取三个样，分别测定样品温度和样品 中氨气和硫化氢的瞬时释放浓度(ppm)，取平均值。具体结果见表3。
[0134]
表3巨大芽孢杆菌ybg02在污泥堆肥中的除臭效果
物料的堆肥指标进行化验，具体结果见表6。
[0159]
表6堆肥指标化验结果
[0160]
菌株空白对照组接种剂对照组ybg02对照组ybg02复配组腐熟度(gi)14.64％101.71％91.23％113.57％总养分(氮磷钾)5.38％5.15％5.71％5.73％有机质％35％32％33％30％水分％78％75％76％74％
[0161]
从表6的结果可以看出，本发明提供的巨大芽孢杆菌ybg02无论是单菌，还是与腐 熟接种剂复配使用，均能显著提高污泥的腐熟度和总养分含量，降低有机质和水分含量。 其中，ybg02复配组污泥堆肥的腐熟度最高，达113.57％，取得了意料不到的技术效果。
[0162]
实施例7巨大芽孢杆菌ybg02与腐熟接种剂复配在污泥堆肥中应用
[0163]
1、实验地点：河南省三门峡灵宝市新惠通发酵车间。
[0164]
2、污泥堆肥物料搭配：
[0165]
将400吨市政污泥与100吨花生壳秸秆混合均匀，做成宽2.5米，高1米，长60 米的梯形发酵堆体四条，备用。
[0166]
3、除臭实验：
[0167]
将巨大芽孢杆菌ybg02菌粉用麸皮或秸秆粉分别稀释成3亿cfu/g，6亿cfu/g，12 亿cfu/g三种剂量。将稀释后的菌粉分别加入污泥发酵堆体，每个处理对应一个堆 体。
[0168]
空白对照组：添加腐熟接种剂12.5kg，不添加ybg02菌粉；
[0169]
处理组1：添加腐熟接种剂12.5kg，3亿cfu/g ybg02菌粉12.5kg；
[0170]
处理组2：添加腐熟接种剂12.5kg，6亿cfu/g ybg02菌粉12.5kg；
[0171]
处理组3：添加腐熟接种剂12.5kg，12亿cfu/g ybg02菌粉12.5kg。
[0172]
从每个堆体取6个点，每天12:00左右在各点取三个样，分别测定样品温度和样品 中氨气和硫化氢的瞬时释放浓度(ppm)，取平均值。具体结果见表7。
[0173]
表7巨大芽孢杆菌ybg02复配接种剂在污泥堆肥中的除臭效果
[0174][0175]
从表7的数据可以看出，与对照组相比，同时添加腐熟接种剂和巨大芽孢杆菌
ybg02 菌粉的处理组污泥硫化氢和氨气的释放浓度均有大幅度降低，臭气释放的峰值也显著降 低。其中，氨气的释放浓度最高降低了75％，硫化氢的释放浓度最高降低了70％，且在 第4天，处理组2污泥已经完全消除硫化氢的排放。从而说明本发明提供的巨大芽孢杆 菌ybg02对硫化氢、氨气有明显的降解作用，取得了意料不到的技术效果。
[0176]
4、腐熟度及其他堆肥指标检测
[0177]
腐熟度检测方法与实施例3相同，按照有机肥料ny/t525-2021的规定对上述腐熟 物料的堆肥指标进行化验，具体结果见表8。
[0178]
表8堆肥指标化验结果
[0179][0180]
从表8的结果可以看出，与对照组相比，巨大芽孢杆菌ybg02与腐熟接种剂复配能 明显提高腐熟接种剂的堆肥效果，处理组污泥的腐熟度得到显著提高，而且随着巨大芽 孢杆菌ybg02剂量的增加，腐熟度进一步增加，最高达105.18％，比对照组提高了45.3％。 此外，巨大芽孢杆菌ybg02还能显著提高堆肥最高温度和平均温度，比对照组提高了5℃， 有利于加快腐熟进程，取得意料不到的技术效果。
[0181]
综上所述，本发明提供的巨大芽孢杆菌ybg02可单独，也可与芽孢杆菌、曲霉菌、 酵母菌、乳酸菌中的任意一种或两种或多种的组合或腐熟接种剂进行复配，广泛应用于 污泥堆肥，不仅能显著降低氨气和硫化氢等臭味气体的排放，还能明显提高堆肥温度， 加快污泥腐熟进程，提高腐熟度和肥效，应用前景广阔。