技术特征：
1.一种草本纤维提取用微生物菌剂的制备方法，其特征在于，包括：将活化后的dce-01菌种接种至改良发酵培养液中扩培发酵，随后将获得的成熟发酵液浓缩，最后添加保护剂，混匀后将得到的菌悬液干燥即可；所述改良发酵培养液为含有甘露糖0.08-0.25wt％、海藻糖0.075-0.24wt％和葡萄糖0.2-0.55wt％的发酵培养液。2.根据权利要求1所述的草本纤维提取用微生物菌剂的制备方法，其特征在于，所述保护剂为包含糖类、蛋白质和淀粉的复合保护剂；优选地，所述保护剂为由玉米淀粉、脱脂奶粉、海藻糖、乳糖、糊精、甘露醇、谷氨酸钠和甘油组成的复合保护剂。3.根据权利要求2所述的草本纤维提取用微生物菌剂的制备方法，其特征在于，在所述复合保护剂中，所述糊精、海藻糖、乳糖的质量比为10∶3-5∶2-1；和/或，所述玉米淀粉和脱脂奶粉的质量比为1∶3-5。4.根据权利要求2所述的草本纤维提取用微生物菌剂的制备方法，其特征在于，所述保护剂的加入质量为浓缩后的成熟发酵液的质量的0.4-0.5倍。5.根据权利要求1-4任一项所述的草本纤维提取用微生物菌剂的制备方法，其特征在于，所述改良发酵培养液的配方为：甘露糖0.1-0.2wt％+海藻糖0.1-0.2wt％+葡萄糖0.3-0.5wt％+牛肉膏0.5wt％+蛋白胨0.5wt％+nacl 0.5wt％，余量为水；优选地，所述草本纤维提取用微生物菌剂的制备方法还包括，在将活化后的dce-01菌种接种至改良发酵培养液中扩培发酵之前，通过加入nh3·
h2o将所述改良发酵培养液的ph调节为7.0-7.5，随后在115℃下灭菌18-25min。6.根据权利要求1-5任一项所述的草本纤维提取用微生物菌剂的制备方法，其特征在于，所述扩培发酵具体包括：将活化后的dce-01菌种的种子液与改良发酵培养液按体积比为1∶30-50的比例置于密封的发酵罐中，并控制发酵罐的灌装量为其容积的0.5-0.6倍，同时通过添加nh3·
h2o控制ph值为6.7-7.0，在32-35℃、180-200rpm和对应于每升种子液的通气量为0.5-0.7m3/h的条件下，发酵培养8-10h直至其ph值恒定或上升；优选地，扩培发酵所获得的成熟发酵液中，所述dce-01菌的浓度大于2
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108cfu/ml；和/或，所述浓缩为采用孔径为0.2μm的超滤膜包对所获得的成熟发酵液浓缩7.5-15倍。7.根据权利要求1-6任一项所述的草本纤维提取用微生物菌剂的制备方法，其特征在于，所述活化具体为：将混有dce-01菌苔的营养肉汤培养液接种至30-50倍体积的营养肉汤培养液中并混匀，在33-35℃和150-180rpm条件下培养5-6h得一级种子液，随后再将一级种子液与200-350倍体积的营养肉汤培养液混匀，在33-35℃和150-180rpm条件下培养5-6h得二级种子
液；优选地，所述营养肉汤培养液的配方为：葡萄糖1wt％+牛肉膏0.5wt％+蛋白胨0.5wt％+nacl 0.5wt％，并用naoh调ph值为7.0-7.5；进一步优选地，所述dce-01菌苔的制备方法为：将冷驯化的dce-01菌种接种至营养肉汤培养液中并混匀，在33-35℃下培养5-6h，稀释后涂布于yq营养琼脂平板中，在33-35℃下培养18-20h后分离单菌落，挑选典型菌落划线于新鲜斜面上，在33-35℃下培养18-20h后真空包装，常温保存，半年内有效。8.根据权利要求1-7任一项所述的草本纤维提取用微生物菌剂的制备方法，其特征在于，所述菌悬液的干燥具体采用冷冻喷雾干燥法。9.权利要求1-8任一项所述的制备方法制备得到的草本纤维提取用微生物菌剂。10.权利要求1-8任一项所述的制备方法或权利要求9所述的微生物菌剂在草本纤维提取中的应用。
技术总结
本发明公开了一种草本纤维提取用微生物菌剂及其制备方法和应用，制备方法包括：将活化后的DCE-01菌种接种至改良发酵培养液中扩培发酵，随后将获得的成熟发酵液浓缩，最后添加保护剂，混匀后将得到的菌悬液干燥即可；改良发酵培养液为含甘露糖0.08-0.25wt％、海藻糖0.075-0.24wt％和葡萄糖0.2-0.55wt％的发酵培养液。本发明通过调整改良发酵培养液的配方，采用甘露糖和海藻糖替代部分葡萄糖制备改良发酵培养液，菌体吸入甘露糖和海藻糖后细胞内大分子的稳定性增强，提高其抗冷冻能力；通过选用包含糖类、蛋白质和淀粉的复合保护剂，其菌体吸附容量大，保护效果好，实际应用效果优异。优异。优异。
技术研发人员：成莉凤 段盛文 冯湘沅 杨琦 郑科 彭正红
受保护的技术使用者：中国农业科学院麻类研究所
技术研发日：2022.04.15
技术公布日：2022/6/24