一种不同混合菌剂对土壤微生物的预测方法与流程

文档序号:31725096发布日期:2022-10-05 00:20阅读:37来源:国知局

1.本发明涉及土壤微生物技术领域,具体为一种不同混合菌剂对土壤微生物的预测方法。


背景技术:

2.土壤微生物是土壤中一切肉眼看不见或看不清楚的微小生物的总称,严格意义上应包括细菌、古菌、真菌、病毒和原生动物和显微藻类,其个体微小,一般以微米或毫微米来计算,通常一克土壤中有几亿到几百亿个,其种类和数量随成土环境及其土层深度的不同而变化。
3.目前人们需要定期的对土壤微生物进行预测,以测定土壤微生物是否满足农作物正常生长的需求,例如中国专利cn 103667517 b中提出的一种检测棘孢木霉菌在土壤中定殖量的方法,具有检测方法单一性高,检测结果准确,而传统平板分离计数法因培养条件,人工从表面形态分离各种木霉菌等原因常使结果有很大误差,因此借助于实时荧光定量pcr技术,对任何时期的土壤,只需检测其里面dna的ct值,就可得到棘孢木霉菌的质量浓度,只需要pcr仪检测即可,操作方便,快捷的优点,但是该方法存在着检测效果较差的缺点,无法有效的对土壤微生物进行检测,导致工作人员无法有效的预测土壤微生物对农作物生长的影响,无法有效的预测土壤是否利于农作物对根系生长。


技术实现要素:

4.(一)解决的技术问题
5.针对现有技术的不足,本发明提供了一种不同混合菌剂对土壤微生物的预测方法,具备检测效果较好等优点,解决了土壤微生物存在着检测效果较差的缺点,无法有效的对土壤微生物进行检测,导致工作人员无法有效的预测土壤微生物对农作物生长的影响,无法有效的预测土壤是否利于农作物对根系生长的问题。
6.(二)技术方案
7.为实现上述检测效果较好目的,本发明提供如下技术方案:一种不同混合菌剂对土壤微生物的预测方法,包括以下步骤:
8.1)选取六块测试田地,分别为田地一、田地二、田地三、田地四、田地五和田地六;
9.2)选取测定时需要用的有机肥料、混合菌剂甲和混合菌剂乙,再将一部分的有机肥料与混合菌剂甲进行混合,将一部分的有机肥料与混合菌剂乙进行混合;
10.3)在田地一中撒入有机肥料,在田地二中撒入混合菌剂甲,在田地三中撒入混合菌剂乙,在田地五中撒入有机肥料与混合菌剂甲的混料,在田地六中撒入有机肥料与混合菌剂乙的混料;
11.4)时隔30-90天后,分别在田地一、田地二、田地三、田地四、田地五和田地六中分别采取一部分的土壤进行检测;
12.5)先对田地一、田地二、田地三、田地四、田地五和田地六土壤中的土壤生物数量
进行测定;
13.6)田地一土壤的土壤放线菌数量为1.5-12
×
105个/g,田地二土壤的土壤放线菌数量为1.6-10
×
105个/g,田地三土壤的土壤放线菌数量为1.8-9.8
×
105个/g,田地四土壤的土壤放线菌数量为1.7-12
×
105个/g,田地五土壤的土壤放线菌数量为1.4-13
×
105个/g,田地六土壤的土壤放线菌数量为1.9-14
×
105个/g;
14.7)田地一土壤的土壤细菌数量为3.5-17
×
105个/g,田地二土壤的土壤细菌数量为3.2-16
×
105个/g,田地三土壤的土壤细菌数量为3.4-12
×
105个/g,田地四土壤的土壤细菌数量为3.1-15
×
105个/g,田地五土壤的土壤细菌数量为3.7-18
×
105个/g,田地六土壤的土壤细菌数量为3.9-14
×
105个/g;
15.8)田地一土壤的土壤真菌数量为6-9
×
105个/g,田地二土壤的土壤真菌数量为9-7
×
105个/g,田地三土壤的土壤真菌数量为6.5-6.8
×
105个/g,田地四土壤的土壤真菌数量为7-8
×
105个/g,田地五土壤的土壤真菌数量为7.9-10
×
105个/g,田地六土壤的土壤真菌数量为8.9-12
×
105个/g;
16.9)田地一土壤的土壤假单胞杆菌数量为1.2-11
×
105个/g,田地二土壤的土壤假单胞杆菌数量为1.4-1
×
105个/g,田地三土壤的土壤假单胞杆菌数量为1.5-1.6
×
105个/g,田地四土壤的土壤假单胞杆菌数量为1.5-14
×
105个/g,田地五土壤的土壤假单胞杆菌数量为1.1-15
×
105个/g,田地六土壤的土壤假单胞杆菌数量为1.7-15
×
105个/g。
17.优选的,所述步骤7)中土壤细菌培养测定的方法为刮刀法,刮刀法接种稀释10-5土壤悬浮液于琼脂表面,所述步骤7)土壤细菌是在29℃下进行培养,36h后进行计数。
18.优选的,所述步骤8)中土壤真菌培养测定的方法为刮刀法,刮刀法接种稀释10-2土壤悬浮液于琼脂表面,所述步骤8)土壤细菌是在29℃下进行培养,84h后进行计数。
19.优选的,所述步骤6)中土壤放线菌培养测定的方法为刮刀法,刮刀法接种稀释10-3土壤悬浮液于琼脂表面,所述步骤6)土壤细菌是在29℃下进行培养,108h后进行计数。
20.优选的,所述步骤9)中土壤假单胞杆菌培养测定的方法为刮刀法,刮刀法接种稀释10-4土壤悬浮液于琼脂表面,所述步骤9)土壤细菌是在29℃下进行培养,48h后进行计数。
21.优选的,所述步骤4)中采样的深度为20cm,所述步骤2)中有机肥料为腐熟菌包。
22.(三)有益效果
23.与现有技术相比,本发明提供了一种不同混合菌剂对土壤微生物的预测方法,具备以下有益效果:
24.1、该不同混合菌剂对土壤微生物的预测方法,选取六块测试田地,分别为田地一、田地二、田地三、田地四、田地五和田地六,选取测定时需要用的有机肥料、混合菌剂甲和混合菌剂乙,再将一部分的有机肥料与混合菌剂甲进行混合,将一部分的有机肥料与混合菌剂乙进行混合,在田地一中撒入有机肥料,在田地二中撒入混合菌剂甲,在田地三中撒入混合菌剂乙,在田地五中撒入有机肥料与混合菌剂甲的混料,在田地六中撒入有机肥料与混合菌剂乙的混料,时隔30-90天后,分别在田地一、田地二、田地三、田地四、田地五和田地六中分别采取一部分的土壤进行检测,先对田地一、田地二、田地三、田地四、田地五和田地六土壤中的土壤生物数量进行测定,田地一土壤的土壤放线菌数量为1.5
×
105个/g,田地二土壤的土壤放线菌数量为1.6
×
105个/g,田地三土壤的土壤放线菌数量为1.8
×
105个/g,田
地四土壤的土壤放线菌数量为1.7
×
105个/g,田地五土壤的土壤放线菌数量为1.4
×
105个/g,田地六土壤的土壤放线菌数量为1.9
×
105个/g,田地一土壤的土壤细菌数量为3.5
×
105个/g,田地二土壤的土壤细菌数量为3.2
×
105个/g,田地三土壤的土壤细菌数量为3.4
×
105个/g,田地四土壤的土壤细菌数量为3.1
×
105个/g,田地五土壤的土壤细菌数量为3.7
×
105个/g,田地六土壤的土壤细菌数量为3.9
×
105个/g,田地一土壤的土壤真菌数量为6
×
105个/g,田地二土壤的土壤真菌数量为9
×
105个/g,田地三土壤的土壤真菌数量为6.5
×
105个/g,田地四土壤的土壤真菌数量为7
×
105个/g,田地五土壤的土壤真菌数量为7.9
×
105个/g,田地六土壤的土壤真菌数量为8.9
×
105个/g,田地一土壤的土壤假单胞杆菌数量为1.2
×
105个/g,田地二土壤的土壤假单胞杆菌数量为1.4
×
105个/g,田地三土壤的土壤假单胞杆菌数量为1.5
×
105个/g,田地四土壤的土壤假单胞杆菌数量为1.5
×
105个/g,田地五土壤的土壤假单胞杆菌数量为1.1
×
105个/g,田地六土壤的土壤假单胞杆菌数量为1.7
×
105个/g。
25.2、该不同混合菌剂对土壤微生物的预测方法,土壤真菌、细菌和假单胞杆菌数量在处理30天时各处理间的差异不显著,90天以后有明显增加趋势,实现了土壤微生物检测效果好的目的,可以有效的对土壤微生物进行检测,工作人员可以有效的预测土壤微生物对农作物生长的影响,可以有效的预测土壤是否利于农作物对根系生长。
具体实施方式
26.下面将结合本发明的实施例,对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
27.实施例一:一种不同混合菌剂对土壤微生物的预测方法,包括以下步骤:
28.1)选取六块测试田地,分别为田地一、田地二、田地三、田地四、田地五和田地六;
29.2)选取测定时需要用的有机肥料、混合菌剂甲和混合菌剂乙,再将一部分的有机肥料与混合菌剂甲进行混合,将一部分的有机肥料与混合菌剂乙进行混合,有机肥料为腐熟菌包;
30.3)在田地一中撒入有机肥料,在田地二中撒入混合菌剂甲,在田地三中撒入混合菌剂乙,在田地五中撒入有机肥料与混合菌剂甲的混料,在田地六中撒入有机肥料与混合菌剂乙的混料;
31.4)时隔30天后,分别在田地一、田地二、田地三、田地四、田地五和田地六中分别采取一部分的土壤进行检测,采样的深度为20cm;
32.5)先对田地一、田地二、田地三、田地四、田地五和田地六土壤中的土壤生物数量进行测定;
33.6)田地一土壤的土壤放线菌数量为1.5
×
105个/g,田地二土壤的土壤放线菌数量为1.6
×
105个/g,田地三土壤的土壤放线菌数量为1.8
×
105个/g,田地四土壤的土壤放线菌数量为1.7
×
105个/g,田地五土壤的土壤放线菌数量为1.4
×
105个/g,田地六土壤的土壤放线菌数量为1.9
×
105个/g,土壤放线菌培养测定的方法为刮刀法,刮刀法接种稀释10土壤悬浮液于琼脂表面,土壤细菌是在29℃下进行培养,108h后进行计数;
34.7)田地一土壤的土壤细菌数量为3.5
×
105个/g,田地二土壤的土壤细菌数量为3.2
×
105个/g,田地三土壤的土壤细菌数量为3.4
×
105个/g,田地四土壤的土壤细菌数量为3.1
×
105个/g,田地五土壤的土壤细菌数量为3.7
×
105个/g,田地六土壤的土壤细菌数量为3.9
×
105个/g,土壤细菌培养测定的方法为刮刀法,刮刀法接种稀释10土壤悬浮液于琼脂表面,土壤细菌是在29℃下进行培养,36h后进行计数;
35.8)田地一土壤的土壤真菌数量为6
×
105个/g,田地二土壤的土壤真菌数量为9
×
105个/g,田地三土壤的土壤真菌数量为6.5
×
105个/g,田地四土壤的土壤真菌数量为7
×
105个/g,田地五土壤的土壤真菌数量为7.9
×
105个/g,田地六土壤的土壤真菌数量为8.9
×
105个/g,土壤真菌培养测定的方法为刮刀法,刮刀法接种稀释10土壤悬浮液于琼脂表面,土壤细菌是在29℃下进行培养,84h后进行计数;
36.9)田地一土壤的土壤假单胞杆菌数量为1.2
×
105个/g,田地二土壤的土壤假单胞杆菌数量为1.4
×
105个/g,田地三土壤的土壤假单胞杆菌数量为1.5
×
105个/g,田地四土壤的土壤假单胞杆菌数量为1.5
×
105个/g,田地五土壤的土壤假单胞杆菌数量为1.1
×
105个/g,田地六土壤的土壤假单胞杆菌数量为1.7
×
105个/g,土壤假单胞杆菌培养测定的方法为刮刀法,刮刀法接种稀释10土壤悬浮液于琼脂表面,土壤细菌是在29℃下进行培养,48h后进行计数。
37.不同处理的土壤放线菌个数变化,30天时,各处理与对照组差异不显著,90天时,处田地五和田地六与对照组差异显著,放线菌数量分别增加了8.3%和16.6%;田地二和田地三土壤放线菌数量显著减少,田地三与对照组无显著差异。
38.不同处理的土壤细菌数量变化,30天时,不同处理对土壤真菌数量的影响无显著差异,90天时,田地一和田地五的土壤细菌数量显著增加,分别为13.3%和26.6%。
39.不同处理的土壤真菌数量变化,以田地四为对照组,30天时,不同处理对土壤真菌数量的影响不显著,90天时,田地四、田地五和田地六的土壤真菌数量显著增加,分别增加了12.5%、25%和50%,田地二和田地三的土壤真菌数量显著降低。
40.不同处理的土壤假单胞杆菌数量变化,30天时,不同处理对土壤假单胞杆菌数量影响较大,其中田地六的土壤假单胞杆菌数量达到1.5
×
105个/g,与田地四相比增加了15%,其他田地与田地四相比差异不明显,90d时,田地三、田地一和田地五的土壤假单胞杆菌数量与田地四无显著差异,田地二和田地三则显著降低。
41.实施例二:一种不同混合菌剂对土壤微生物的预测方法,包括以下步骤:
42.1)选取六块测试田地,分别为田地一、田地二、田地三、田地四、田地五和田地六;
43.2)选取测定时需要用的有机肥料、混合菌剂甲和混合菌剂乙,再将一部分的有机肥料与混合菌剂甲进行混合,将一部分的有机肥料与混合菌剂乙进行混合,有机肥料为腐熟菌包;
44.3)在田地一中撒入有机肥料,在田地二中撒入混合菌剂甲,在田地三中撒入混合菌剂乙,在田地五中撒入有机肥料与混合菌剂甲的混料,在田地六中撒入有机肥料与混合菌剂乙的混料;
45.4)时隔90天后,分别在田地一、田地二、田地三、田地四、田地五和田地六中分别采取一部分的土壤进行检测,采样的深度为20cm;
46.5)先对田地一、田地二、田地三、田地四、田地五和田地六土壤中的土壤生物数量
进行测定;
47.6)田地一土壤的土壤放线菌数量为12
×
105个/g,田地二土壤的土壤放线菌数量为10
×
105个/g,田地三土壤的土壤放线菌数量为9.8
×
105个/g,田地四土壤的土壤放线菌数量为12
×
105个/g,田地五土壤的土壤放线菌数量为13
×
105个/g,田地六土壤的土壤放线菌数量为14
×
105个/g,土壤放线菌培养测定的方法为刮刀法,刮刀法接种稀释3土壤悬浮液于琼脂表面,土壤细菌是在29℃下进行培养,108h后进行计数;
48.7)田地一土壤的土壤细菌数量为17
×
105个/g,田地二土壤的土壤细菌数量为16
×
105个/g,田地三土壤的土壤细菌数量为12
×
105个/g,田地四土壤的土壤细菌数量为15
×
105个/g,田地五土壤的土壤细菌数量为18
×
105个/g,田地六土壤的土壤细菌数量为14
×
105个/g,土壤细菌培养测定的方法为刮刀法,刮刀法接种稀释5土壤悬浮液于琼脂表面,土壤细菌是在29℃下进行培养,36h后进行计数;
49.8)田地一土壤的土壤真菌数量为9
×
105个/g,田地二土壤的土壤真菌数量为7
×
105个/g,田地三土壤的土壤真菌数量为6.8
×
105个/g,田地四土壤的土壤真菌数量为8
×
105个/g,田地五土壤的土壤真菌数量为10
×
105个/g,田地六土壤的土壤真菌数量为12
×
105个/g,土壤真菌培养测定的方法为刮刀法,刮刀法接种稀释2土壤悬浮液于琼脂表面,土壤细菌是在29℃下进行培养,84h后进行计数;
50.9)田地一土壤的土壤假单胞杆菌数量为11
×
105个/g,田地二土壤的土壤假单胞杆菌数量为1
×
105个/g,田地三土壤的土壤假单胞杆菌数量为1.6
×
105个/g,田地四土壤的土壤假单胞杆菌数量为14
×
105个/g,田地五土壤的土壤假单胞杆菌数量为15
×
105个/g,田地六土壤的土壤假单胞杆菌数量为15
×
105个/g,土壤假单胞杆菌培养测定的方法为刮刀法,刮刀法接种稀释4土壤悬浮液于琼脂表面,土壤细菌是在29℃下进行培养,48h后进行计数。
51.不同处理的土壤放线菌个数变化,30天时,各处理与对照组差异不显著,90天时,处田地五和田地六与对照组差异显著,放线菌数量分别增加了8.3%和16.6%,田地二和田地三土壤放线菌数量显著减少,田地三与对照组无显著差异。
52.不同处理的土壤细菌数量变化,30天时,不同处理对土壤真菌数量的影响无显著差异,90天时,田地一和田地五的土壤细菌数量显著增加,分别为13.3%和26.6%。
53.不同处理的土壤真菌数量变化,以田地四为对照组,30天时,不同处理对土壤真菌数量的影响不显著,90天时,田地四、田地五和田地六的土壤真菌数量显著增加,分别增加了12.5%、25%和50%,田地二和田地三的土壤真菌数量显著降低。
54.不同处理的土壤假单胞杆菌数量变化,30天时,不同处理对土壤假单胞杆菌数量影响较大,其中田地六的土壤假单胞杆菌数量达到1.5
×
105个/g,与田地四相比增加了15%,其他田地与田地四相比差异不明显,90d时,田地三、田地一和田地五的土壤假单胞杆菌数量与田地四无显著差异,田地二和田地三则显著降低。
55.本发明的有益效果是:
56.土壤真菌、细菌和假单胞杆菌数量在处理30天时各处理间的差异不显著,90天以后有明显增加趋势。
57.与现有技术相比,实现了土壤微生物检测效果好的目的,可以有效的对土壤微生物进行检测,工作人员可以有效的预测土壤微生物对农作物生长的影响,可以有效的预测
土壤是否利于农作物对根系生长。
58.尽管已经示出和描述了本发明的实施例,对于本领域的普通技术人员而言,可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型,本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。
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