HEK293细胞裂解液的纯化方法与流程

文档序号:31607780发布日期:2022-09-21 11:35阅读:来源:国知局

技术特征:
1.一种hek293细胞裂解液的纯化方法,其特征在于,包括以下步骤:获取hek293细胞裂解液;对所述细胞裂解液采用碟式离心机进行离心,收集离心上清液;及将所述离心上清液进行深层过滤处理,得到澄清液。2.根据权利要求1所述的纯化方法,其特征在于,所述离心的参数包括:进料速度为200l/h~500l/h,转鼓转速为6500rpm~8500rpm,背压为3bar以上,以及操作水压力为3bar以上。3.根据权利要求2所述的纯化方法,其特征在于,所述离心的参数包括:进料速度为200l/h~300l/h,转鼓转速为7000rpm~8000rpm,背压为3bar~5bar,以及操作水压力为3bar~6bar。4.根据权利要求2或3所述的纯化方法,其特征在于,所述离心的参数还包括:排渣间隔为1000s~2000s,以及单次排渣时间为20s~40s。5.根据权利要求1~3任一项所述的纯化方法,其特征在于,采用14块~16块深层滤膜进行所述深层过滤处理。6.根据权利要求5所述的纯化方法,其特征在于,所述深层过滤处理时间为80min~100min。7.根据权利要求1~3任一项所述的纯化方法,其特征在于,所述细胞裂解液的浊度为900ntu~1500ntu。8.根据权利要求7所述的纯化方法,其特征在于,所述离心上清液的浊度为200ntu~350ntu。9.根据权利要求7所述的纯化方法,其特征在于,所述细胞裂解液的温度为0℃~20℃。10.根据权利要求1~3任一项所述的纯化方法,其特征在于,所述澄清液的浊度为20ntu~80ntu。

技术总结
本发明涉及一种HEK293细胞裂解液的纯化方法。该HEK293细胞裂解液的纯化方法,由于细胞裂解液中存在大量的细胞碎片、宿主细胞蛋白(HCP)以及宿主细胞DNA等杂质,先经过碟式离心机离心去除大部分细胞碎片后再进行深层过滤,能够极大地减轻深层过滤的压力,避免深层过滤时的滤膜堵塞,大大提高深层过滤的效率,易于扩大生产,并能制备得到浊度较低的澄清液,所得澄清液中的宿主细胞DNA含量和HCP含量都得到了大幅度降低,极大减轻了后续蛋白进一步纯化工艺的压力,降低了生产成本。降低了生产成本。降低了生产成本。


技术研发人员:钱锋 姜波 陈建涛 陈庆庆 魏玮 阚子义 罗顺
受保护的技术使用者:上海健士拜生物科技有限公司 健顺生物科技(南通)有限公司 上海澳斯康生物制药有限公司 甘肃健顺生物科技有限公司
技术研发日:2022.07.07
技术公布日:2022/9/20
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