一种高质量琼脂糖及其制备方法

文档序号:32029258发布日期:2022-11-03 01:03阅读:来源:国知局

技术特征:
1.一种高质量琼脂糖,其特征在于,硫酸基含量小于0.18wt%、电内渗值小于0.15、凝胶强度达到至少1100g/cm2。2.根据权利要求1所述的一种高质量琼脂糖的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:(1)配置琼脂悬浮液,加入过氧化钠,调节体系ph值至少为10并于至少30℃下进行第一反应;(2)待所述第一反应结束后,加入硼酸二氢钠,调节体系ph值小于10进行第二反应;(3)待所述第二反应结束,加入乙醇,调节体系ph值不超过5进行第三反应;(4)待所述第三反应结束后过滤、洗涤,收集第一沉淀;将所述第一沉淀溶解在水中形成样品溶液,再加入聚乙二醇溶液,搅拌下进行第四反应,待所述第四反应结束后过滤、洗涤,收集第二沉淀,将所述第二沉淀干燥、粉碎后即得到高质量琼脂糖。3.根据权利要求2所述的一种高质量琼脂糖的制备方法,其特征在于,步骤1中所述琼脂悬浮液的质量浓度为6-16%,其中琼脂的硫酸基含量大于1%、电内渗大于0.8、凝胶强度大于1000g/cm2;所述过氧化钠的加入质量是该步骤中总反应液体积的4-10%;所述第一反应的条件为:调节体系ph值=10-14、反应温度30-70℃、反应时间0.5-1h。4.根据权利要求2所述的一种高质量琼脂糖的制备方法,其特征在于,步骤2中所述硼酸二氢钠的加入质量是该步骤中总反应液体积的4-10%;所述第二反应的条件为:调节体系ph值=8-9.9、反应温度30-70℃、反应时间0.5-1h。5.根据权利要求2所述的一种高质量琼脂糖的制备方法,其特征在于,步骤3中所述乙醇为无水乙醇,使所述乙醇在所述琼脂悬浮液中的质量浓度为40-80%;所述第三反应的条件为:调节体系ph值=3-5、反应温度30-70℃、反应时间1-3h。6.根据权利要求2-5任一项所述的一种高质量琼脂糖的制备方法,其特征在于,保持所述第一反应、所述第二反应与所述第三反应的反应温度相同。7.根据权利要求2所述的一种高质量琼脂糖的制备方法,其特征在于,步骤4中溶解所述第一沉淀的过程是:将所述第一沉淀与水配置成质量浓度为6-16%(w/v)的悬浮液,采用高压灭菌器于110-121℃下加热溶解20-40min。8.根据权利要求2所述的一种高质量琼脂糖的制备方法,其特征在于,步骤4中所述聚乙二醇为peg-4000、peg-6000、peg-8000中的一种或多种;所述聚乙二醇溶液的质量浓度为10-50%;所述聚乙二醇溶液与所述样品溶液的体积之比为(0.5-3):1;所述第四反应的温度40-100℃、反应时间为5-60min。

技术总结
本发明一种高质量琼脂糖及其制备方法,硫酸基含量小于0.18wt%、电内渗值小于0.15、凝胶强度达到至少1100g/cm2;其制备方法:配置琼脂悬浮液,加入过氧化钠,调节体系pH值至少为10并于至少30℃下进行第一反应;第一反应结束后,加入硼酸二氢钠,调节体系pH值小于10进行第二反应;第二反应结束,加入乙醇,调节体系pH值不超过5进行第三反应;第三反应结束后过滤、洗涤,收集第一沉淀,将其溶解在水中形成样品溶液,再加入聚乙二醇溶液,搅拌下进行第四反应,第四反应结束后过滤、洗涤,收集第二沉淀将其干燥、粉碎后即得到高质量琼脂糖;将其作为电泳介质对不同分子量的DNA片段具有较好的分离效果。离效果。离效果。


技术研发人员:吴孝兰 刘琴 张元兴 顾小焱 贾自自
受保护的技术使用者:华东理工大学
技术研发日:2022.07.29
技术公布日:2022/11/2
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