一种杨梅MrSPL4基因及其应用

本发明属于植物基因工程，尤具体涉及一种杨梅mrspl4基因及其应用。

背景技术：

1、杨梅(myrica rubra sieb.et zucc.)隶属于杨梅科(myricaceae)杨梅属(myricalour.)常绿果树，是南方特色经济水果之一，集中分布在长江流域以南。其果实肉质细软，汁多味浓，兼备医疗应用和生态效益，广受消费者青睐，尤以浙江省内杨梅闻名，很大程度上促进了杨梅产业的健康发展，带动了种植区经济发展。

2、杨梅的开花时间、花期及熟期长短易影响果实品质，造成市场成熟集中压力；此外，杨梅花期易受“倒春寒”、熟期易受“梅雨”等自然天气的影响，落果率增加，造成果农采收损失。有研究显示果树栽培过程中开花期提前，果实可提前成熟【韩佩汝,张正伟,郑静等.低温对草莓花芽分化的影响[j].中国农业大学学报,2019,24(01):30-39.】。

技术实现思路

1、为了使杨梅花期提前，本申请对杨梅开花过程中的基因进行了研究，发现了杨梅mrspl4基因及其在促植物开花方面的作用。

2、本发明的第一方面，提供了一种mrspl4基因，所述mrspl4基因的核苷酸序列如seqno.1所示。所述mrspl4基因是发明人进行杨梅开花基因相关研究时意外获得的，具有促开花作用。

3、应当强调的是，对mrspl4基因的核苷酸序列进行简单的变换或修饰，例如：某一位点碱基的删除、增加或替换；或者某一位点碱基的修饰，如磷酸化、甲基化、氨基化、巯基化等，对mrspl4基因的功能不会造成影响，或者说经过简单变换或修饰后的mrspl4基因仍具有促开花作用。这些简单的变换或修饰并不需要创造性的劳动，因而，经过这些简单变换或修饰后的mrspl4基因仍属于本申请的保护范围。另外，与mrspl4基因的核苷酸序列有至少60％、80％或90％或95％以上同源性的核苷酸序列，且该核苷酸序列具有mrspl4基因的相同的功能，都应属于本发明的保护范围。

4、本发明的第二方面，提供了一种表达载体或重组宿主细胞。

5、所述表达载体包含mrspl4基因。

6、在一些方式中，所述表达载体为质粒。可通过限制性内切酶对含mrspl4基因的核苷酸片段以及质粒进行切割，并通过重组酶将切割后的片段重组，构建成含mrspl4基因的质粒。

7、在一些方式中，所述表达载体上还含有抗性基因，例如本申请的一个实施例中，表达载体上含有卡纳霉素(kan)抗性基因。通过抗性基因可以筛选导入所述表达载体的目标细胞或细菌或真菌或植株，也可以用于确认所述表达载体是否成功导入目标生命体。

8、进一步，将所述表达载体导入宿主细胞，即获得所述重组宿主细胞。例如本申请一个实施例中转化了35s::mrspl4-pcambia2301-ky超表达载体的农杆菌细胞。

9、本发明的第三方面，提供了mrspl4基因的应用。

10、在一些方式中，所述mrspl4基因用于培育开花期提前的转基因植物，例如转入mrspl4基因的本氏烟。

11、在一些方式中，所述mrspl4基因可以用于杨梅育种，如同上将所述mrspl4基因导入杨梅中，获得花期较早的转基因杨梅。此外，可以通过提取杨梅的总rna，以其为模板合成cdna，再通过pcr扩增，检测mrspl4基因的含量，寻找mrspl4基因含量更高的杨梅，则该杨梅花期较早的概率更高。

12、本发明的优势在于：本发明提供了mrspl4基因，该基因具有促进开花的作用。可将mrspl4基因应用于培育花期提前的植物，特别是对于杨梅，若能使其花期提前，则可使杨梅果期提前避免“梅雨”等自然天气对果实产量的影响，同时也可提供杨梅果实的商业价值。

技术特征：

1.一种mrspl4基因，其特征在于，所示mrspl4基因的核苷酸序列如seq id no.1所示。

2.如权利要求1所述的mrspl4基因，其特征在于，所述mrspl4基因来源于杨梅。

3.一种表达载体，其特征在于，所述表达载体含有权利要求1至2之一所述的mrspl4基因。

4.如权利要求3所述的表达载体，其特征在于，所述表达载体为质粒。

5.如权利要求3所述的表达载体，其特征在于，所述表达载体含有抗性基因。

6.含有权利要求3至5之一所述表达载体的重组宿主细胞。

7.如权利要求1至2之一所述mrspl4基因的应用。

8.如权利要求7所述的应用，其特征在于，所述mrspl4基因用于培育开花期提前的转基因植物。

9.如权利要求8所述的应用，其特征在于，所述植物为本氏烟。

10.如权利要求7所述的应用，其特征在于，所述mrspl4基因用于杨梅育种。

技术总结
本发明公开了一种MrSPL4基因及其应用，MrSPL4基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。将所述MrSPL4基因与质粒组合构建表达载体、转入农杆菌，进一步侵染本氏烟草，获得转MrSPL4基因本氏烟，培养发现转MrSPL4基因本氏烟具有早花特性，证实了MrSPL4基因的促开花作用。可将MrSPL4基因应用于培育花期提前的植物，特别是对于杨梅类经济作物，若能使其花期提前，则可使果期提前避免“梅雨”等自然天气对果实产量的影响，也可提高果实的商业价值。

技术研发人员：张淑文,戚行江,梁森苗,张启,俞浙萍,孙鹂,郑锡良,武祥琪
受保护的技术使用者：浙江省农业科学院
技术研发日：
技术公布日：2024/2/19