本发明属于生物工程，具体涉及一种利用色谱技术提取l-瓜氨酸的方法。
背景技术：
1、l-瓜氨酸（l-citrulline）是一种非蛋白质ａ-氨基酸，又名氨基甲酰鸟氨酸，其纯品为白色结晶，呈柱状，其分子式为c6h13n3o3，分子质量为175.19，能溶于水，微溶于乙醇和乙醚，其熔点为222ºc，等电点为5.92，比旋光度为[α]d25=21.0。
2、l-瓜氨酸是一种重要的非必需氨基酸，是尿素循环过程中的重要中间体，具有很多重要的生理功能如清除自由基、异体排斥效应指示剂、血管舒张作用、稳定血压以及诊断类风湿关节炎、抗氧化等；此外，它还有着非常显著的恢复精力和提高人体免疫力的作用。近年来l-瓜氨酸在食品、化妆品和药物等领域越来越来受到重视，具有广泛的开发应用前景。
3、l-瓜氨酸的生产方法目前主要有化学合成法，酶法，提取法和发酵法。
4、化学合成法生产瓜氨酸是在碱性条件下水解精氨酸得到瓜氨酸，生产过程难以准确控制，产物中含有d-瓜氨酸，影响产品纯度，并且污染环境。酶法合成瓜氨酸的优点是产物浓度高，纯化步骤少，但其缺点是很难满足工业生产的要求，原因是精氨酸脱亚氨基酶的活性较低，转化率较低，同时会产生杂酶，影响瓜氨酸的生产。提取法是指从富含有瓜氨酸的天然产物中分离提纯瓜氨酸，瓜氨酸在天然产物中的含量极其有限，生产规模小，分离纯化工艺复杂繁琐，产品收率低，成本高，经济收益低等缺陷使得提取法受到了很大的限制。
5、目前，l-瓜氨酸的生产方法主要是发酵法，发酵法生产l-瓜氨酸得以工业化生产还依赖于l-瓜氨酸分离提取技术，目前国内外l-瓜氨酸的分离提取几乎都采用以离子交换柱分离法，此法虽然可以进行大规模制备，但是产品成本高，且交换树脂用量庞大，洗脱和再生酸碱消耗太多，造成严重的环境污染，另外l-瓜氨酸在强碱和强酸环境容易导致收率低，纯度不高。
技术实现思路
1、为解决l-瓜氨酸提取工艺存在的问题，本发明提供了一种收率高，成本低，节能降耗的高效率l-瓜氨酸提取新工艺。
2、本发明是通过如下技术方案来实现的。
3、一种利用色谱技术提取l-瓜氨酸的方法，其包括如下步骤：（1）陶瓷膜过滤；（2）活性炭脱色；（3）脱色膜脱色；（4）色谱分离；（5）蒸发浓缩；（6）结晶；（7）离心干燥。
4、进一步地，所述方法包括如下步骤 ：
5、步骤1）陶瓷膜过滤：将l-瓜氨酸发酵液调ph至3.0-5.0，经陶瓷膜过滤，除去菌体、大分子蛋白和其他颗粒杂质，收集陶瓷膜清液；
6、步骤2）活性炭脱色：将步骤1）所得陶瓷膜清液打往脱色罐，加入活性炭脱色，过滤，收集脱色液；
7、步骤3）脱色膜脱色：将步骤2）所得脱色液打往脱色膜中进行二次脱色处理，收集脱色清液；
8、步骤4）色谱分离：将步骤3）所得脱色清液经蒸发浓缩后加入弱酸阳离子树脂色谱柱进行吸附，收集l-瓜氨酸水溶液；
9、步骤5）蒸发浓缩：将步骤4）收集的l-瓜氨酸水溶液进行四效蒸发浓缩，当蒸发浓缩至浓度为400-600g/l，出现轻微结晶后打往双效进行浓缩，收集浓缩液；
10、步骤6）结晶：将步骤5）收集的浓缩液进行结晶，得到析出l-瓜氨酸晶体的溶液；
11、步骤7）离心干燥：将步骤6）所得析出晶体的溶液打往离心机进行离心处理，将离心所得l-瓜氨酸湿品进行真空干燥，得l-瓜氨酸成品。
12、优选地，所述步骤 1）中，调ph为3.5-4.5。
13、优选地，所述陶瓷膜孔径大小为50nm，过膜温度控制在60-65℃，进膜操作压力控制在0.4-0.5mpa。
14、优选地，所述脱色参数为：加入0.3-0.6%的活性炭，脱色时间为30-50min，脱色温度为50-70℃。
15、优选地，所述结晶工艺为：4℃条件下冷却结晶8-12h。
16、优选地，所述脱色膜的进膜压力0 .9mpa，出膜压力0 .8mpa，料液流速控制在120ml/min。
17、优选地，所述弱酸阳树脂型号为：pk-3211na，上柱流速为2-5m3/h，ph为5.0-6.0，上柱及洗脱柱温度控制在40℃左右。
18、优选地，所述蒸发浓缩的温度控制在60-85℃。
19、优选地，所述步骤7）中，分离时间控制在20-60min，真空干燥的温度控制在120-145℃。
20、本发明的技术方案具有以下突出优点及独特性：
21、1、本发明采用色谱分离技术分离l-瓜氨酸发酵液，得到l-瓜氨酸产品。与传统的离子交换柱分离法相比收率提高，且分离得到的l-瓜氨酸纯度更高，可达到99%以上。
22、2、本发明采用树脂对l-瓜氨酸与蛋白质、糖、色素、无机盐等杂质的吸附性不同，基本实现l-瓜氨酸、蛋白质、糖、色素、无机盐等杂质的完全分离。
23、3、本发明生产过程全自动化，劳动强度低，节约成本。
24、4、本发明生产过程中不产生离子交换，可以将发酵废液制成菌体蛋白饲料和有机无机复混肥，全过程没有污染产生，绿色环保。
1.一种利用色谱技术提取l-瓜氨酸的方法，其包括如下步骤：（1）陶瓷膜过滤；（2）活性炭脱色；（3）脱色膜脱色；（4）色谱分离；（5）蒸发浓缩；（6）结晶；（7）离心干燥。
2. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤 ：
3. 根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述步骤 1）中，调ph为3.5-4.5。
4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述陶瓷膜孔径大小为50nm，过膜温度控制在60-65℃，进膜操作压力控制在0.4-0.5mpa。
5.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述脱色参数为：加入0.3-0.6%的活性炭，脱色时间为30-50min，脱色温度为50-70℃。
6.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述结晶工艺为：4℃条件下冷却结晶8-12h。
7. 根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述脱色膜的进膜压力0 .9mpa，出膜压力0 .8mpa，料液流速控制在120ml/min。
8.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述弱酸阳离子树脂型号为：pk-3211na，上柱流速为2-5m3/h，ph为5.0-6.0，上柱及洗脱柱温度控制在40℃左右。
9.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述蒸发浓缩的温度控制在60-85℃。
10.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述步骤7）中，分离时间控制在20-60min，真空干燥的温度控制在120-145℃。