肽的制作方法

本发明涉及一种含有侧链导入有氟原子的氨基酸残基的肽。本技术要求基于2021年9月22日在日本技术的日本特愿2021－154625号的优先权，并将其内容援引于此。

背景技术：

1、抗体药物、肽药物、核酸药物等具有对靶分子的特异性高、副作用少的优点。但是，都存在难以到达存在于细胞内的靶分子的问题。为了解决该问题，研究了各种方法。其中，细胞膜透过性肽(cell penetrating peptides:cpp)被视为很有希望。作为cpp，可举出来自hiv病毒tat蛋白的肽(专利文献1)、多聚精氨酸序列的肽(专利文献2)作为代表性的例子。使其与药效肽键合能够将药效肽输送到细胞内(例如，专利文献3、非专利文献1)。

2、另一方面，报告了含氟氨基酸显示出特异性生理活性而受到关注。例如，报告了3,3,3－三氟丙氨酸及其衍生物作为吡哆醛酶的自杀式抑制剂(suicide inhibitor)而发挥作用(非专利文献2)。另外，报告了革兰氏阴性菌鼠伤寒沙门氏菌(salmonellatyphimurium)和革兰氏阳性菌嗜热脂肪芽孢杆菌(bacillus stearothermophilus)的丙氨酸消旋酶(alanine racemase)可被3,3,3－三氟丙氨酸灭活(非专利文献3)。含氟氨基酸和含有该含氟氨基酸的肽被期待作为生理活性物质应用于医药领域。

3、已知具有多氟结构的化合物在生物体内稳定且毒性低，在向细胞内摄取和从胞内体脱离的方面上优异(非专利文献4)。报告了能够利用该性质将使用将侧链氨基全氟酰基化后的赖氨酸作为构成氨基酸而得的肽树枝状聚合物用于基因递送(非专利文献5)。但是，由于为树枝状聚合物，因此无法如cpp那样形成与药效活性肽、核酸、作为抗体药物的蛋白质键合而得的杂交体。

4、现有技术文献

5、专利文献

6、专利文献1：美国专利第6316003号说明书

7、专利文献2：美国专利第6306993号说明书

8、专利文献3：国际公开第2008/089491号

9、非专利文献

10、非专利文献1：miyaji et.al.,drug metabolism and disposition,2011,vol.39,p.1946-1953.

11、非专利文献2：sakai et al.,tetrahedron,1996,vol.52(1),p.233-244.

12、非专利文献3：faraci and walsh,biochemistry,1989,vol.28(2),p.431-437.

13、非专利文献4：zhang et al.,mrscommunications,2018,vol.8,p.303-313.

14、非专利文献5：cai et al.,acsapplied materials and interfaces,2016,vol.8,p.5821-5832.

技术实现思路

1、专利文献1等中记载的cpp存在向细胞内的输送效率、生物体内的肽酶所致的分解等各种问题。

2、本发明的目的在于提供含有侧链导入有氟原子的氨基酸残基的肽及其制造方法。

3、本发明人等制造了一种含有侧链导入有氟原子的氨基酸残基的肽，结果发现该肽的细胞膜透过性优异，从而完成了本发明。

4、即，本发明如下。

5、[1]一种肽，是2个以上的氨基酸通过肽键键合而成的肽，

6、构成该肽的氨基酸残基的至少1个的侧链为下述通式(1)。

7、

8、[式(1)中，z1为二、三或四价的除亚烷基以外的连接基团；rf为由至少2个氟原子取代的c1－30烷基(该c1－30烷基在碳原子为2以上的情况下可以在碳原子间具有1～5个醚键性氧原子)、－sf5、或者－sf4－cr101r102－cr103r104cl(r101、r102、r103和r104各自独立地为氢原子、氟原子或氯原子，r101、r102、r103和r104中的2个以上为氟原子)；n3为1、2或3，黑色圆点表示键合位点]。

9、[2]根据上述[1]的肽，其中，上述rf为下述通式(f－1)或(f－2)表示的基团。

10、

11、[式中，rfp表示含有至少2个以上的氟原子的完全卤化c1－10烷基(该c1－10烷基在碳原子为2以上的情况下可以在碳原子间具有醚键性氧原子)，n1为0～10的整数，n2为0～9的整数，黑色圆点表示键合位点]。

12、[3]根据上述[1]或[2]的肽，其中，上述z1为具有环基的连接基团。

13、[4]根据上述[3]的肽，其中，上述环基具有1,4－亚苯基或1,3,5取代苯基。

14、[5]根据上述[1]或[2]的肽，其中，上述z1为不具有环基的连接基团。

15、[6]根据上述[1]或[2]的肽，其中，上述z1为亚烷基、－o－、－s－、－nh－、－n(ch3)－、－n(c2h5)－、－n(c3h7)－、三价氮原子、－c(＝o)－、－s(＝o)2－、从环烷烃中除去2～4个氢原子所得的基团、从芳香环中除去2～4个氢原子所得的基团、从杂环中除去2～4个氢原子所得的基团、或者它们的组合(其中，不包括仅由亚烷基构成的基团)。

16、[7]根据上述[1]或[2]的肽，其中，上述z1为－c(＝o)－、－c(＝o)－o－、－o－c(＝o)－、－nh－c(＝o)－o－、－o－c(＝o)－nh－、－c(＝o)－nh－、－nh－c(＝o)－、－s－s－、－s(＝o)2－nh－、－nh－s(＝o)2－、－s(＝o)2－nh－s(＝o)2－、－c(＝o)－nh－ph－(－ph－为1,4－亚苯基、1,3－亚苯基、1,5－亚苯基或1,3,5取代苯基)、或者它们中的任一基团与c1－6亚烷基的组合。

17、[8]根据上述[1]或[2]的肽，其中，上述z1为下述通式(2)表示的连接基团。

18、

19、[式中，z2为二、三或四价的除亚烷基以外的连接基团；rh为氢原子或c1－6烷基，黑色圆点表示键合位点]。

20、[9]根据上述[1]～[8]中的任一肽，其中，上述通式(1)表示的基团为侧链的氨基酸残基是在天然氨基酸的侧链上直接或间接地连接有1～3个上述rf的氨基酸残基。

21、[10]根据上述[1]～[9]中的任一肽，其中，c末端或n末端可以由保护基保护。

22、[11]根据上述[1]或[2]的肽，其为下述通式(11)表示的三肽。

23、

24、[式中，z1、rf和n3与上述相同；rh为氢原子或c1－6烷基；r11和r12各自独立地为c1－6烷基或苄基；x为9－芴基甲氧基羰基或叔丁氧基羰基；z为c1－6烷氧基、羟基或氨基]。

25、[12]根据上述[1]～[11]中的任一肽，其具有细胞膜透过性。

26、本发明的肽由于侧链导入了氟原子，因此细胞膜透过性优异。因此，该肽作为生理活性物质而期待应用于医药领域。