一种NOTCH1的胞内活化结构域（NICD1）调节剂及其应用的制作方法

本发明涉及生物制药领域，更为具体的，本发明涉及一种notch1的胞内活化结构域(nicd1)调节剂及其应用。

背景技术：

1、视黄醇(维生素a)及其主要代谢物视黄醛和atra是天然存在的维a酸类药物。已知，atra是诱导治疗急性早幼粒细胞白血病的一线药物。而内源性atra的功能在于维持精子发生、胚胎发育、上皮以及神经和免疫系统的分化。作为脂溶性维生素，维生素a及其衍生物水溶性较差，在胞浆中产生的视黄醛和atra需要通过细胞脂质结合蛋白转运入核，目前已识别的脂质结合蛋白，如crbp1、crbp2、crabp1、crabp2和fabp5，是人类主要的5种视黄醇转运蛋白。crabp2分布在皮肤、子宫和卵巢组织中，crabp2是ra的胞浆至核内的转运体，是arta作为转录因子入核的重要保障。然而，越来越多的研究识别crabp2在各种肿瘤类型中异常表达，其抑癌功能或者促癌功能，具有显著的组织差异性，机制复杂，有待阐明。

2、归纳crabp2促癌和抑癌通路的研究有：①高表达crabp2的患者在雌激素受体(er+)和er-乳腺癌中表现出不同的预后。crabp2可以通过调节lats1在体外和体内的稳定性来抑制er+乳腺癌的侵袭和转移；相反crabp2促进er-乳腺癌的侵袭和转移；②crabp2通过hur和整合素β1/fak/erk信号传导促进肺癌细胞的转移；③shrna敲低crabp2抑制肝癌(hepatocellular carcinoma，hcc)细胞系增殖、迁移和侵袭，随后增加肿瘤凋亡相关蛋白表达并降低erk/vegf通路相关蛋白表达。hcc细胞中的crabp2沉默也导致无法在体内形成肿瘤。④rara和crabp2作为肾母细胞瘤进展的生物标志物。⑤多形性胶质母细胞瘤(gbm)中细胞质而非细胞核的crabp2水平与患者低生存率相关；⑥头颈部鳞状细胞癌(hnscc)中，缺乏crabp2蛋白与无病生存率降低有关；⑦恶性外周神经鞘瘤(mpnst)是侵袭性肿瘤，crabp2促进mpnst细胞存活，并不依赖视黄酸的肿瘤抑制作用；⑧crabp2在高级别胶质瘤中的表达减弱，crabp2甲基化所致的表观遗传沉默可能导致神经胶质瘤细胞中未成熟表型的关键；⑨胰腺癌中，crabp2高表达相反fabp5低表达是采用atra治疗有效的指征。然而，现有文献大多将crabp2作为atra治疗的量效关系评价，但没有任何报道显示crabp2的功能与atra在acc治疗中存在相关性，在文献″crabp1 and crabp2 protein levels correlate witheach other but do not correlate with sensitivity of breast cancer cells toretinoic acid″中，显示crabp2与atra在治疗中无关。综上所述，阐明crabp2信号通路可能有助于了解类视黄醇信号通路，为未来的临床试验提供有用的生物标志物。

3、据pubmed统计(bioproject：prjeb4337，publication：pmid 24309898)，对95个人类个体的组织样本，涵盖了27种不同组织，进行了rna测序，该数据提供了crabp2表达的组织特异性特征。在正常组织中，可以看见前列腺、唾液腺等腺体的表达低于食管、子宫内膜、皮肤和膀胱，也突出一个关键问题：表达异常应基于正常组织的表达阈值，如对于唾液腺，crabp2异常高表达应该是功能异常的指标。也是大多数研究未考虑到的阈值背景问题。

技术实现思路

1、为了克服现有技术中存在的缺陷，本发明提供如下的技术方案：

2、本发明的第一个方面，提供一种crabp2在用于制备调节notch1的胞内活化结构域(nicd1)功能的制剂中的用途，其中，所述用途为控制notch1的胞内活化结构域(nicd1)入核。

3、在一种实施方式中，可通过临床术后检查肿瘤组织中crabp2和nicd1的表达量，指导后续atra的治疗方案。

4、本发明的第二个方面，提供一种atra在用于制备调节crabp2功能的制剂中的应用，其中，所述应用包括通过调控crabp2的表达来控制nicd1的入核。

5、在一种实施方式中，当atra临床治疗效果不佳时，提示维甲酸转运系统存在问题，可考虑联用crabp2激活剂抗癌。

6、在一种实施方式中，所述制剂为药物。

7、在一种实施方式中，所述药物为crabp2激活剂。

技术特征：

1.一种crabp2在用于制备调节notch1的胞内活化结构域(nicd1)功能的制剂中的用途，其特征在于，所述用途为控制notch1的胞内活化结构域(nicd1)入核，进而降低癌基因nicd1在核内的功能。

2.一种atra在用于制备调节crabp2功能的制剂中的应用，其特征在于，所述应用包括通过促进crabp2的表达来控制nicd1的入核，从而发挥atra抗癌效应。

3.如权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述制剂为药物。

4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述药物为crabp2激活剂。

技术总结
本发明首次公开了ATRA的细胞内转运蛋白CRABP2，具有阻止NOTCH1的胞内活化结构域(NICD1)进入细胞核的新功能。根据实验结果显示，在侵袭力较低的83细胞系中，抑制CRABP2的表达后，NICD1进入细胞核显著增加。相反，当使用NICD1活化抑制剂DAPT处理细胞，同样看到CRABP2的上调，提示CRABP2与NICD1之间存在互相拮抗调节机制，也是CRABP2新功能的体现。这种现象在具有肺转移能力的LM细胞系中不存在。间接提示了维甲酸系统在转移性ACC细胞中存在功能异常，因此可以作为临床使用NOTCH1抑制剂或者ATRA治疗时响应能力的指证。

技术研发人员：孔璐,陈晓红,杨佳杰,周梦娇,马廷耀,封格烜,王雪莲,刘洪亮,文冰亭,徐娟
受保护的技术使用者：上海良福生物科技有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/11