无定形的B-RAF激酶二聚体抑制剂的制作方法

本发明涉及b-raf激酶二聚体抑制剂1-((1s，las，6bs)-5-((7-氧代-5，6，7，8-四氢-1，8-二氮杂萘-4-基)氧基)-1a，6b-二氢-1h-环丙并[b]苯并呋喃-1-基)-3-(2，4，5-三氟苯基)脲(以下有时称为化合物1)的一种稳定无定形形式，所述无定形化合物的制备方法和所述无定形化合物的治疗用途。

背景技术：

1、pct专利申请wo 2014/206343 a1中公开了第二代b-raf抑制剂，其中包括1-((1s，1as，6bs)-5-((7-氧代-5，6，7，8-四氢-1，8-二氮杂萘-4-基)氧基)-1a，6b-二氢-1h-环丙并[b]苯并呋喃-1-基)-3-(2，4，5-三氟苯基)脲。化合物1的结构如下所示：

2、

3、作为第二代b-raf抑制剂，化合物1对丝氨酸/苏氨酸激酶的raf家族，特别是braf/craf二聚体具有强效抑制作用。该化合物对mak通道上有突变(包括b-raf突变和k-ras/n-ras突变)的癌症具有靶向治疗作用，是分子靶向治疗剂。相比于第一代b-raf抑制剂，例如威罗菲尼(vemurafenib)和达拉非尼(dabrafenib)，化合物1得到了改进。

4、结晶形式的化合物1作为一种有机合成的游离碱，在水中的溶解度较低，由此口服生物利用度也比较低。

5、无定形形式是物质多晶型现象中的一种形式，是一种非晶型状态。无定形药物的各种理化性质及临床药效特征常有别于一般的晶型药物。因此，在固体药物的多晶型研究中，对无定形物质的深入探讨同样有着重要意义。一般而言，无定形形式相比于结晶形式具有高分散性与高能状态，因此相比于结晶形式无定形形式具有较高的溶解性与生物利用度。但是，无定形形式由于稳定性较差，其在制药工业领域的应用受到了很大的限制。

6、本发明的发明人发现了一种化合物1的纯无定形形式，其不同于一般的无定形形式具有相对较长的稳定性，且相比于结晶形式具有相对较高的生物利用度。

技术实现思路

1、本发明提供一种化合物1的纯无定形形式，所述无定形形式在14天的测试期间没有发生晶形转化，即在14天的测试期间内依然没有显示任何衍射峰；而且所述无定形形式相比于结晶形式具有相对较高的生物利用度。这表明，本发明的无定形形式具备药物制备的潜在用途。

2、第一方面，本发明提供化合物1的纯无定形形式，其特征在于，所述纯无定形形式的x-射线粉末衍射图无衍射峰，如图7所示。

3、优选地，本发明的纯无定形形式具有如图11所示的1h-nmr谱。

4、优选地，本发明的纯无定形形式的玻璃态转变温度在约135至143℃之间，更优选为约138.3℃。

5、优选地，本发明的纯无定形形式的粒度为在约60至约80μm之间的d90，在约2至约6μm之间的d50，在约1至约2μm之间的d10；更优选地d90为约69.9μm、d50为约3.5μm，以及d10为约1.4μm。

6、第二方面，本发明提供制备化合物1的纯无定形形式的方法，所述方法包括：对化合物1的结晶形式在极性溶剂中的溶液进行喷雾干燥，得到粉末状物质。

7、优选地，所述极性溶剂包括醚类、羧酸酯类、腈类、酮类、酰胺类、砜类、亚砜类或卤代烃类。更优选地，所述极性溶剂包括但并不限于，乙酸、丙酮、乙腈、苯、氯仿、四氯化碳、二氯甲烷、二甲基亚砜、1，4-二氧六环、乙醇、乙酸乙酯、丁醇、叔丁醇、n，n-二甲基乙酰胺、n，n-二甲基甲酰胺、甲酰胺、蚁酸、庚烷、己烷、异丙醇、甲醇、甲基乙基酮、1-甲基-2-吡咯烷酮、均三甲苯、硝基甲烷、聚乙二醇、丙醇、2-丙酮、吡啶、四氢呋喃、甲苯、二甲苯、它们的混合物等等。优选地，所述极性溶剂为卤代烃类/醇类的混合物，例如dcm/meoh的混合物。

8、优选地，所述喷雾干燥通过喷雾干燥器进行。优选地，所述喷雾干燥器的入口温度设定为约50至70℃，所述喷雾干燥器的出口温度设定为约25至45℃；更优选地，所述喷雾干燥器的入口温度设定为约60℃，所述喷雾干燥器的出口温度设定为约35℃。

9、优选地，所述化合物1的结晶形式是结晶形式a。在一个实施方案中，所述结晶形式a的特征在于包含至少三个、四个、五个或六个具有独立选自下组2θ°值的衍射峰的x射线粉末衍射图：4.7±0.2、9.4±0.2、13.6±0.2、14.0±0.2、14.9±0.2和15.6±0.2°。优选地，所述结晶形式a的特征在于包含至少三个、四个、五个或六个具有独立选自下组2θ°值的衍射峰的x射线粉末衍射图：4.7±0.2、9.4±0.2、13.6±0.2、14.0±0.2、14.9±0.2、15.6±0.2、21.2±0.2、24.3±0.2、24.7±0.2、25.1±0.2和29.1±0.2°。更优选地，所述结晶形式a的特征在于包含具有独立选自下组2θ°值的衍射峰的x射线粉末衍射图：4.7±0.2、9.4±0.2、10.2±0.2、13.6±0.2、14.0±0.2、14.9±0.2、15.6±0.2、17.2±0.2、17.4±0.2、18.7±0.2、20.0±0.2、20.4±0.2、21.2±0.2、22.3±0.2、24.3±0.2、24.7±0.2、25.1±0.2、25.5±0.2、26.8±0.2、27.4±0.2、27.8±0.2、28.6±0.2、29.1±0.2、30.2±0.2、31.8±0.2、32.0±0.2、33.1±0.2、34.1±0.2和34.6±0.2°。在一个优选的实施方案中，所述结晶形式a的特征在于基本上如图1中所示的x射线粉末衍射图。

10、优选地，所述化合物1的结晶形式是单晶a**。

11、在一个实施方案中，所述单晶形式a**的晶胞参数

12、在一个实施方案中，所述单晶形式a**的空间群为单斜(晶系)p21。

13、在一个优选的实施方案中，所述结晶形式a是通过商业规模方法制备的。

14、第三方面，本技术公开了治疗或预防对受试者中raf激酶的抑制有响应的疾病或病症的方法，包括给予所述受试者治疗有效量的化合物1，其中化合物1呈本技术公开的纯无定形形式。

15、在一个实施方案中，所述疾病或病症是选自下组的癌症：脑癌、肺癌、肾癌、骨癌、肝癌、膀胱癌、乳腺癌、头颈癌、卵巢癌、黑素瘤、皮肤癌、肾上腺癌、宫颈癌、淋巴瘤或甲状腺肿瘤及其并发症。

16、在另一个实施方案中，所述疾病是选自下组的braf(v600e或非v600e)或nras或kras突变癌症：脑癌、肺癌、肾癌、骨癌、肝癌、膀胱癌、乳腺癌、头颈癌、卵巢癌、黑素瘤、皮肤癌、肾上腺癌、宫颈癌、淋巴瘤或甲状腺肿瘤及其并发症。

17、在另一个实施方案中，化合物1的给药剂量为1-200mg/天，并且给药频率为每天一至三次。

18、在另一个实施方案中，化合物1的给药剂量为2.5-100mg/天，并且给药频率为每天一至三次。

19、在另一个实施方案中，化合物1的给药剂量为5-50mg/天，并且给药频率为每天一次。

20、在一个实施方案中，受试者是大鼠、犬或人。

21、第四方面，本技术公开了药物组合物，其包含治疗有效量的化合物1，所述化合物1呈本技术公开的纯无定形形式。其中，活性化合物，即化合物1可占药物组合物的1-99％(重量)，优选1-50％(重量)，更优选1-30％(重量)，或最优先1-20％(重量)。

22、药物组合物可以如下形式给药：以诸如胶囊、片剂、丸剂、粉末形式口服给药，持续释放注射剂(诸如无菌溶液、悬浮液或乳液)形式给药；通过局部治疗形式，诸如糊剂、乳霜或软膏；或通过栓剂诸如栓剂形式。药物组合物可以是适合于精确剂量应用的单位剂型。

23、合适的药物载体包括水、各种有机溶剂和各种惰性稀释剂或填充剂。如果需要，药物组合物可含有各种添加剂，诸如香料、粘合剂和赋形剂。对于口服给药，片剂和胶囊可含有各种赋形剂，诸如柠檬酸；各种崩解剂，诸如淀粉、海藻酸和一些硅酸盐；以及各种粘合剂，诸如蔗糖、明胶和阿拉伯胶。此外，包括硬脂酸镁和滑石填料的润滑剂通常用于片剂的生产。相同类型的固体组分也可用于配制软和硬明胶胶囊。当口服给药需要含水悬浮液时，活性化合物可与各种甜味剂或调味剂、颜料或染料组合混合。如果需要，可以使用各种乳化剂或产生悬浮液；可以使用稀释剂诸如水、乙醇、丙二醇、甘油或它们的组合。

24、上述药物组合物优选口服给药。

25、上述药物组合物优选呈胶囊或片剂形式。

26、本发明包括：

27、1. 1-((1s，1as，6bs)-5-((7-氧代-5，6，7，8-四氢-1，8-二氮杂萘-4-基)氧基)-1a，6b-二氢-1h-环丙并[b]苯并呋喃-1-基)-3-(2，4，5-三氟苯基)脲的纯无定形形式，其特征在于，所述无定形形式的x-射线粉末衍射图无衍射峰，如图7所示。

28、2.项1的纯无定形形式，其特征在于，所述纯无定形形式具有如图11所示的1h-nmr谱。

29、3.项1的纯无定形形式，其特征在于，所述纯无定形形式的玻璃态转变温度在约135至143℃之间，更优选为约138.3℃。

30、4.项1的纯无定形形式，其特征在于，所述纯无定形形式的粒度为在约60至约80μm之间的d90，在约2至约6μm之间的d50，在约1至约2μm之间的d10；更优选地d90为约69.9μm、d50为约3.5μm，以及d10为约1.4μm。

31、5.一种制备如项1-4中任一项的纯无定形形式的方法，所述方法包括：对1-((1s，1as，6bs)-5-((7-氧代-5，6，7，8-四氢-1，8-二氮杂萘-4-基)氧基)-1a，6b-二氢-1h-环丙并[b]苯并呋喃-1-基)-3-(2，4，5-三氟苯基)脲的结晶形式在极性溶剂中的溶液进行喷雾干燥，得到粉末状物质。

32、6.项5的方法，其特征在于，所述极性溶剂包括醚类、羧酸酯类、腈类、酮类、酰胺类、砜类、亚砜类或卤代烃类。

33、7.项6的方法，其特征在于，所述极性溶剂选自乙酸、丙酮、乙腈、苯、氯仿、四氯化碳、二氯甲烷、二甲基亚砜、1，4-二氧六环、乙醇、乙酸乙酯、丁醇、叔丁醇、n，n-二甲基乙酰胺、n，n-二甲基甲酰胺、甲酰胺、蚁酸、庚烷、己烷、异丙醇、甲醇、甲基乙基酮、l-甲基-2-吡咯烷酮、均三甲苯、硝基甲烷、聚乙二醇、丙醇、2-丙酮、吡啶、四氢呋喃、甲苯、二甲苯、它们的混合物。

34、8.项5的方法，其特征在于，所述喷雾干燥器的入口温度设定为约50至70℃，所述喷雾干燥器的出口温度设定为约25至45℃；更优选地，所述喷雾干燥器的入口温度设定为约60℃，所述喷雾干燥器的出口温度设定为约35℃。

35、9.项5的方法，其特征在于，所述化合物的结晶形式是结晶形式a。

36、10.项9的方法，其特征在于，所述结晶形式a包含至少三个、四个、五个或六个具有独立选自下组2θ°值的衍射峰的x射线粉末衍射图：4.7±0.2、9.4±0.2、13.6±0.2、14.0±0.2、14.9±0.2和15.6±0.2°；优选地，所述结晶形式a包含至少三个、四个、五个或六个具有独立选自下组2θ°值的衍射峰的x射线粉末衍射图：4.7±0.2、9.4±0.2、13.6±0.2、14.0±0.2、14.9±0.2、15.6±0.2、21.2±0.2、24.3±0.2、24.7±0.2、25.1±0.2和29.1±0.2°；更优选地，所述结晶形式a包含具有独立选自下组2θ°值的衍射峰的x射线粉末衍射图：4.7±0.2、9.4±0.2、10.2±0.2、13.6±0.2、14.0±0.2、14.9±0.2、15.6±0.2、17.2±0.2、17.4±0.2、18.7±0.2、20.0±0.2、20.4±0.2、21.2±0.2、22.3±0.2、24.3±0.2、24.7±0.2、25.1±0.2、25.5±0.2、26.8±0.2、27.4±0.2、27.8±0.2、28.6±0.2、29.1±0.2、30.2±0.2、31.8±0.2、32.0±0.2、33.1±0.2、34.1±0.2和34.6±0.2°。

37、11.项10的方法，其特征在于，所述结晶形式a基本上如图1中所示的x射线粉末衍射图。