一种丁酸梭菌及其在畜禽养殖中的应用的制作方法

本发明涉及功能微生物筛选与应用，具体涉及一种丁酸梭菌及其在畜禽养殖中的应用。

背景技术：

1、在动物养殖中，肠道健康水平对动物的整体健康及其生产水平与效率起着重要作用。近年，随着限用以及禁用抗生素的时代到来，畜禽肠道健康问题日益突出。尤其在现阶段，家禽大规模的养殖环境条件不佳以及饲料营养科学性欠缺的情况下，其胃肠生理状态的好坏直接影响营养物质的消化和吸收，以及机体抗病能力和生产性能的高低，容易引发肠道疾病发生率居高不下。其中，坏死性肠炎是禽养殖肠道疾病中最严重的疾病之一，尤其对于肉鸡是普遍存在的疾病，重创全球禽养殖经济效益，造成全球经济每年超过60亿美元的损失（wade等，2015）。

2、针对禽坏死性肠炎研究发现，发病阶段球虫在肠道定殖，破坏了上皮细胞正常功能，导致内容物渗漏或者降低肠道消化率，为梭菌增殖提供条件。患病动物的每克肠道产气荚膜梭菌数量可达到107-109 cfu（kondo, 1988）。产气荚膜梭菌引起的细菌感染可造成肉鸡肠道严重的炎症反应。在球虫和产气荚膜梭菌的共同影响下，引发坏死性肠炎。进而降低肉鸡生产力，引起疾病的发生，最终对肉鸡养殖业造成巨大经济损失。

3、如何改善肉鸡的肠道健康水平以及预防和降低坏死性肠炎疾病的发生，提高肉鸡的生产效率，已成为肉鸡养殖行业的一个研究热点。微生态制剂作为一种健康、安全、环保的饲料添加剂走入了人们的视野，逐渐得到了广泛的研究和推广。微生态制剂被定义为一类对宿主有益，并且能够平衡肠道菌群的活性益生菌剂。国内外饲用微生态制剂的微生物主要包括芽孢杆菌属、乳酸杆菌属、酵母菌属、及肠球菌等。由于益生菌能够与宿主共同作用，从而提高其免疫力与肠道形态的健康程度，最后达到减少感染潜在致病菌几率的目的。一个被广泛接受的机理是，益生菌能够在宿主肠道中竞争性抑制病原菌，达到防控疾病发生的目的。在2010年6月，欧盟已经批准了使用芽孢杆菌pb6作为商品菌使用从而防治家禽细菌性肠炎疾病。jayaraman等研究发现，饲喂芽孢杆菌pb6能够降低肉鸡感染坏死性肠炎50%的死亡率。cao等研究发现，在肉鸡饲料中添加发酵乳杆菌1.2029能够有效减少产气荚膜梭菌对肉鸡回肠造成的炎症。

4、时至今日，微生态制剂替代抗生素的呼声越来越高，绿色、安全、高效的精准微生态制剂的筛选和科学推广越来越受青睐，为实现绿色养殖，减少抗生素添加具有重要的作用。

技术实现思路

1、本发明为解决现有技术问题，提供了一种丁酸梭菌（ clostridium butyricum）及其应用。所述丁酸梭菌筛选自白羽肉鸡盲肠内容物，产酸能力强，对多种病原菌具有显著的抑制效果，能有效提高肉鸡的抗病能力，改善养殖性能，应用前景广阔。

2、本发明一方面提供了一种丁酸梭菌，为丁酸梭菌719-d（ clostridium butyricum 719-d），已于2023年3月14日保藏于中国武汉 武汉大学的中国典型培养物保藏中心，其保藏编号为cctcc no：m 2023314。

3、所述丁酸梭菌的16srdna序列为seq id no:1。

4、本发明一方面提供了所述丁酸梭菌在饲料生产中的应用。

5、本发明还提供了一种益生菌制剂，包含上述丁酸梭菌。

6、所述益生菌制剂还包含地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌、粪肠球菌、双歧杆菌、屎肠球菌、乳酸片球菌、嗜酸乳杆菌中的任意一种或多种。

7、所述益生菌菌剂中丁酸梭菌的活菌量不低于108cfu/g。

8、本发明还提供了上述益生菌制剂在饲料生产中的应用。

9、本发明提供的丁酸梭菌719-d具有很强的产酸和产淀粉酶能力，其发酵代谢物中主要包含三种有机酸，其中丁酸含量最高，达到12.70 g/l，乙酸次之，乳酸最少；其中，丁酸和乙酸的含量均显著高于市售丁酸梭菌。

10、所述丁酸梭菌719-d对产气荚膜梭菌、鸭疫里默氏杆菌、金黄色葡萄球菌等多种病原菌均具有显著的抑菌效果。其中，对鸡源产气荚膜梭菌抑菌圈直径达到17mm，对鸭疫里默氏杆菌ra-6型抑菌圈直径达到27mm，效果非常显著。

11、所述丁酸梭菌719-d具有一定的细胞黏附性和抗炎作用。通过在炎症模型中添加丁酸梭菌719-d的裂解液，能显著下调促炎因子il-8的表达水平，相比阳性对照组，促炎因子il-8表达量下降约30%左右。

12、所述丁酸梭菌719-d对肉鸡球虫的防治效果明显优于抗生素组。随着感染时间推移，阳性对照组肉鸡粪便中卵囊值逐渐提高，抗生素组卵囊值较恒定，而丁酸梭菌处理组卵囊值显著降低，在感染后7d，丁酸梭菌处理组肉鸡粪便中卵囊值为0。该菌株能有效保护感染球虫和产气荚膜梭菌的肉鸡的肠道，丁酸梭菌处理组肉鸡肠道损伤的评分低于1分，远低于阳性对照组和抗生素组（p<0.05），肠道基本无明显损伤，没有发生肠壁变薄、变脆。

13、丁酸梭菌719-d能够显著降低肉鸡的腹泻和死淘发生率，有效改善生产性能。与对照组相比，丁酸梭菌处理组肉鸡粪便成型更好，死淘率和腹泻率分别降低了56.7%和24.2%，料重比也明显降，取得了意料不到的技术效果。

14、本发明提供的丁酸梭菌719-d可单独或与其他益生菌复配，应用于畜禽养殖饲料的生产，前景广阔。

技术特征：

1.一种丁酸梭菌，其特征在于，所述丁酸梭菌的保藏编号为cctcc no：m 2023314。

2.如权利要求1所述的丁酸梭菌，其特征在于，所述丁酸梭菌的的16srdna序列为seqid no：1。

3.权利要求1所述的丁酸梭菌在饲料生产中的应用。

4.一种益生菌制剂，其特征在于，所述益生菌制剂包含权利要求1所述的丁酸梭菌。

5.如权利要求4所述的益生菌制剂，其特征在于，所述益生菌制剂还包含地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌、粪肠球菌、双歧杆菌、屎肠球菌、乳酸片球菌、嗜酸乳杆菌中的任意一种或多种。

6.如权利要求4所述的益生菌制剂，其特征在于，所述益生菌制剂中丁酸梭菌的活菌量不低于108cfu/g。

7.权利要求4-6任一所述的益生菌制剂在饲料生产中的应用。

技术总结
本发明涉及功能微生物筛选与应用技术领域，具体提供了一种丁酸梭菌（Clostridium butyricum）及其在畜禽养殖中的应用。所述丁酸梭菌筛选自白羽肉鸡盲肠内容物，已于2023年3月14日保藏于中国武汉武汉大学的中国典型培养物保藏中心，其保藏编号为CCTCC NO：M 2023314。该菌株产酸、产酶能力强，对多种病原菌具有显著的抑制效果，能有效提高肉鸡的抗病能力，改善养殖性能，应用前景广阔。

技术研发人员：周英俊,梁莉,车传燕,唐融志,陈琳,孔垂彬,赵磊,牛庆奎,凌红丽
受保护的技术使用者：山东蔚蓝生物科技有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/13