一株假黄单胞菌属细菌NJAU-T102及其应用

本发明涉及生物防控，具体涉及一株兼具消减土壤抗生素抗性基因和促生功能的假黄单胞菌属细菌njau-t102及其应用。

背景技术：

1、土壤抗生素抗性基因的爆发与水平转移会引起土壤中许多致病微生物携带抗生素抗性基因，该现象在作物的整个生长期均可发生。由于病原菌能在土壤中大量存活，一旦获得抗生素抗性，存在从食物链移动到餐桌，对人体健康造成危害的潜在威胁。另外，施用畜禽粪污及大量施用其制造而成的有机肥也会引入外源抗生素抗性基因，不合理的耕作施肥容易导致病原菌爆发造成土壤抗性基因激增。我国已发现抗生素抗性基因含量过高的土壤，因此，探索消减土壤抗生素抗性基因新型技术，成为当前研究的热点。目前市面上大都是普通腐熟有机肥、化肥和促生或防控土传病害生物有机肥产品，对于能消减土壤抗生素抗性基因生物有机肥产品很少提及。基于此，本发明从番茄植株根际土壤分离筛选出一株能够有效消减土壤中抗生素抗性基因含量的功能细菌，将其添加至具有良好改土增产效果的腐熟有机肥作为基肥的土壤中去，对其消减土壤中抗生素抗性基因及增产效果进行了测定，以期创制消减土壤抗生素抗性基因的新型生物有机肥产品。

技术实现思路

1、本发明的目的是提供一株兼具消减土壤抗生素抗性基因和促生功能的假黄单胞菌属细菌njau-t102及其应用，以解决现有技术的不足。

2、本发明的目的可通过以下技术方案实现：

3、本发明第一方面提供了一株假黄单胞菌属细菌njau-t102，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏日期为2022年12月25日，保藏编号为cgmccno.26210。

4、本发明第二方面提供了上述假黄单胞菌属细菌njau-t102制备的菌剂。

5、进一步地，所述菌剂通过以下方法制备得到：将保藏编号为cgmcc no.26210的假黄单胞菌属细菌njau-t102进行液体发酵，发酵结束后离心获得菌体，用无菌生理盐水重悬菌体，使菌悬液中菌含量≥106个/ml。

6、更进一步地，所述菌剂通过以下方法制备得到：将保藏编号为cgmcc no.26210的假黄单胞菌属细菌njau-t102接种至r2a液体培养基进行液体发酵，发酵条件：ph为7.0，温度为30℃，转速为170~190r/min，发酵时间为48~72h；发酵结束后6000~8000r/min离心8~10min获得菌体，用无菌生理盐水重悬菌体，使菌悬液中菌含量≥106个/ml。

7、本发明第三方面提供了上述菌剂在促进作物生长、消减作物种植土壤中抗生素抗性基因含量中的应用。

8、进一步地，所述作物包括番茄。

9、进一步地，所述抗生素抗性基因包括链霉素耐药基因aada、1类整合子酶基因intl1、万古霉素耐药基因vana。

10、进一步地，应用时，以腐熟有机肥作为基肥，作物定植后一段时间施入所述菌剂。

11、更进一步地，所述腐熟有机肥包括腐熟鸡粪有机肥或腐熟中药渣有机肥。

12、更进一步地，盆栽作物时，上述菌剂施入量为20~50ml·kg-1土壤，优选30~35ml·kg-1土壤。

13、本发明的有益效果：

14、本发明针对有效消减番茄作物种植土壤已有的高抗生素抗性基因含量和遏制由于施肥不当带入或病原菌爆发引起的土壤抗生素抗性基因持续增加现象，筛选出一株用于消减土壤抗生素抗性基因和促进作物生长的假黄单胞菌属细菌njau-t102，为降低土壤抗生素抗性基因含量和增加作物生物量提供技术支持及应用。

15、本发明盆栽试验结果表明，使用该功能菌株研制的生物有机肥能够良好促进番茄植株的生长，显著降低土壤中多类抗生素抗性基因含量，如链霉素耐药基因aada、1类整合子酶基因intl1，在鸡粪有机肥与该菌株结合的处理中也展现出对万古霉素耐药基因vana的显著消减能力。链霉素耐药基因aada属于氨基糖苷类抗生素抗性基因，1类整合子酶基因intl1属于整合子类抗生素抗性基因，万古霉素耐药基因vana属于万古霉素类抗生素抗性基因，皆为土壤常见抗生素抗性基因或其遗传元件。可见，假黄单胞菌属细菌njau-t102对番茄土壤抗生素抗性基因有显著消减效果，也对番茄的生长有良好的促进效果。

技术特征：

1.一株假黄单胞菌属细菌njau-t102，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏日期为2022年12月25日，保藏编号为cgmcc no.26210。

2.权利要求1所述的假黄单胞菌属细菌njau-t102制备的菌剂。

3.根据权利要求2所述的菌剂，其特征在于，所述菌剂通过以下方法制备得到：将保藏编号为cgmcc no.26210的假黄单胞菌属细菌njau-t102进行液体发酵，发酵结束后离心获得菌体，用无菌生理盐水重悬菌体，使菌悬液中菌含量≥106个/ml。

4.根据权利要求3所述的菌剂，其特征在于，所述菌剂通过以下方法制备得到：将保藏编号为cgmcc no.26210的假黄单胞菌属细菌njau-t102接种至r2a液体培养基进行液体发酵，发酵条件：ph为7.0，温度为30℃，转速为170~190r/min，发酵时间为48~72h；发酵结束后6000~8000r/min离心8~10min获得菌体，用无菌生理盐水重悬菌体，使菌悬液中菌含量≥106个/ml。

5.权利要求2或3或4所述的菌剂在促进作物生长、消减作物种植土壤中抗生素抗性基因含量中的应用。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述作物包括番茄。

7.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述抗生素抗性基因包括链霉素耐药基因aada、1类整合子酶基因intl1、万古霉素耐药基因vana。

8.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，应用时，以腐熟有机肥作为基肥，作物定植后一段时间施入所述菌剂。

9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述腐熟有机肥包括腐熟鸡粪有机肥或腐熟中药渣有机肥。

10.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，盆栽作物时，权利要求4所述菌剂施入量为20~50ml·kg-1土壤。

技术总结
本发明公开了一株假黄单胞菌属细菌NJAU‑T102，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏日期为2022年12月25日，保藏编号为CGMCC No.26210。本发明也公开了由其制备的菌剂及在促进作物生长、消减作物种植土壤中抗生素抗性基因含量中的应用。本发明假黄单胞菌属细菌NJAU‑T102对番茄土壤抗生素抗性基因有显著消减效果，也对番茄的生长有良好的促进效果。

技术研发人员：李荣,冉滨源,沈其荣,欧燕楠,邓旭辉,沈宗专,王嘉宝,李若尘
受保护的技术使用者：南京农业大学三亚研究院
技术研发日：
技术公布日：2024/1/13