一种何首乌多糖及其提取方法和应用与流程

本发明涉及医药，尤其涉及一种何首乌多糖及其提取方法和应用。

背景技术：

1、何首乌为蓼科植物何首乌(polygonummultiflorumthunb.)的干燥块根，具有解毒、消痈、截疟、润肠通便等功效。现代药理研究表明何首乌具有抗肿瘤、降血脂、抗动脉粥样硬化、抗衰老、提高免疫力、抗炎等活性，因此，近年来何首乌在药品、保健品、化妆品等领域应用广泛。化学成分研究表明何首乌块根中主要含有二苯乙烯苷类、多糖类、蒽醌类、黄酮类、磷脂类等活性成分。在何首乌的活性研究中，研究者们也多集中于二苯乙烯苷类、蒽醌类成分的结构分析以及活性毒性研究等。近年来研究发现何首乌中多糖成分具有抗衰老、抗疲劳、抗氧化、降血脂、抗肿瘤、免疫调节等活性，并且多糖成分是何首乌中的主要成分之一，进一步开发何首乌多糖的提取方法并研究其潜在药用价值具有重要意义。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供一种何首乌多糖及其提取方法和应用。本发明提取到的何首乌多糖rpmp-n和rpmp-a，能够恢复相关抗氧化酶活性，保护脏器组织，改善脏器的衰老损伤，延缓机体衰老。

2、为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

3、本发明提供了一种何首乌多糖的提取方法，包括如下步骤：

4、(1)将何首乌粉末依次经石油醚、乙醇溶液、水回流提取后，得到上清液；

5、(2)将上清液经浓缩、醇沉、纯化、干燥后，得到何首乌粗多糖；

6、(3)依次以水和氯化钠溶液为洗脱液，将所述何首乌粗多糖溶液用q-sepharosefastflow柱洗脱，经除杂、干燥，得到不同分子量的何首乌多糖rpmp-n和何首乌多糖rpmp-a。

7、优选的，步骤(1)所述何首乌粉末依次经石油醚、乙醇溶液、水回流提取的过程具体为：将何首乌粉末经石油醚回流提取，得到药渣a；将药渣a经乙醇溶液回流提取，得到药渣b；将药渣b经水回流提取，得到上清液。

8、优选的，所述何首乌粉末与所述石油醚的质量体积比为(40～60)g：(0.5～1.0)l；所述石油醚的沸程为60～90℃；所述何首乌粉末经石油醚回流提取的温度为60～70℃，时间为2～4h；

9、所述何首乌粉末与乙醇溶液的质量体积比为(40～60)g：(1.5～2.5)l；所述乙醇溶液的体积分数为75～90％；所述药渣a经乙醇溶液回流提取的温度为80～90℃，时间为0.5～1.5h；

10、所述药渣b与水的质量体积比为(40～60)g：(1.5～2.5)l；将药渣b经水回流提取的温度为95～100℃，时间为1.5～3h。

11、优选的，所述浓缩后的上清液浓度为0.4～0.6kg/l；所述醇沉是指，将所述浓缩后的上清液与无水乙醇按照1：(3～5)的体积比混合；所述醇沉的温度为2～5℃，所述醇沉的时间为10～15h；所述纯化包括除蛋白和透析；所述除蛋白的方法为sevag法，所述除蛋白的次数为5～10次；所述透析所用透析袋的截留分子量为10kda；所述透析的时间为20～30h。

12、优选的，所述何首乌粗多糖溶液的18～22mg/ml。

13、优选的，所述洗脱的流速为0.5～2ml/min；所述洗脱的过程为：依次以水和氯化钠溶液为洗脱液，所述水的用量为350～500ml，所述氯化钠溶液的用量为350～500ml；所述氯化钠溶液的浓度为0.4～0.6mol/l；每10ml收集一管洗脱液，将第11～23管洗脱液除杂、干燥，得到所述何首乌多糖rpmp-n；将第42～46管洗脱液除杂、干燥，得到所述何首乌多糖rpmp-a。

14、优选的，所述除杂为透析除杂，所述除杂用的透析袋的截留分子量为10kda，所述除杂的时间为40～60h，所述除杂的温度为2～5℃。

15、本发明还提供了一种上述提取方法提取得到的何首乌多糖rpmp-n。

16、本发明还提供了一种上述提取方法提取得到的何首乌多糖rpmp-a。

17、本发明还提供了一种上述何首乌多糖rpmp-n和/或上述何首乌多糖rpmp-a在制备抗衰老药物中的应用。

18、本发明提供了一种何首乌多糖及其提取方法和应用。本发明分别以石油醚、乙醇和水为提取液，采用回流提取法，并利用q-sepharosefastflow柱，以水和氯化钠为洗脱液，分离何首乌多糖组分，最终分离到具有抗衰老活性的何首乌多糖rpmp-n和rpmp-a。本发明的何首乌多糖rpmp-n和rpmp-a两个组分，能够通过恢复相关抗氧化酶活性，抵抗机体ros的积累，保护脏器组织，改善脏器的衰老损伤，通过抑制p53-p21及cdks表达中关键蛋白p16的表达，延缓衰老。

技术特征：

1.一种何首乌多糖的提取方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，步骤(1)所述何首乌粉末依次经石油醚、乙醇溶液、水回流提取的过程具体为：将何首乌粉末经石油醚回流提取，得到药渣a；将药渣a经乙醇溶液回流提取，得到药渣b；将药渣b经水回流提取，得到上清液。

3.根据权利要求2所述的提取方法，其特征在于，所述何首乌粉末与所述石油醚的质量体积比为(40～60)g：(0.5～1.0)l；所述石油醚的沸程为60～90℃；所述何首乌粉末经石油醚回流提取的温度为60～70℃，时间为2～4h；

4.根据权利要求3所述的提取方法，其特征在于，所述浓缩后的上清液浓度为0.4～0.6kg/l；所述醇沉是指，将所述浓缩后的上清液与无水乙醇按照1：(3～5)的体积比混合；所述醇沉的温度为2～5℃，所述醇沉的时间为10～15h；所述纯化包括除蛋白和透析；所述除蛋白的方法为sevag法，所述除蛋白的次数为5～10次；所述透析所用透析袋的截留分子量为10kda；所述透析的时间为20～30h。

5.根据权利要求4所述的提取方法，其特征在于，所述何首乌粗多糖溶液的18～22mg/ml。

6.根据权利要求5所述的提取方法，其特征在于，所述洗脱的流速为0.5～2ml/min；所述洗脱的过程为：依次以水和氯化钠溶液为洗脱液，所述水的用量为350～500ml，所述氯化钠溶液的用量为350～500ml；所述氯化钠溶液的浓度为0.4～0.6mol/l；每10ml收集一管洗脱液，将第11～23管洗脱液除杂、干燥，得到所述何首乌多糖rpmp-n；将第42～46管洗脱液除杂、干燥，得到所述何首乌多糖rpmp-a。

7.根据权利要求6所述的提取方法，其特征在于，所述除杂为透析除杂，所述除杂用的透析袋的截留分子量为10kda，所述除杂的时间为40～60h，所述除杂的温度为2～5℃。

8.一种权利要求1～7任一项所述提取方法提取得到的何首乌多糖rpmp-n。

9.一种权利要求1～7任一项所述提取方法提取得到的何首乌多糖rpmp-a。

10.一种权利要求8所述何首乌多糖rpmp-n和/或权利要求9所述何首乌多糖rpmp-a在制备抗衰老药物中的应用。

技术总结
本发明提供了一种何首乌多糖及其提取方法和应用，属于医药技术领域。本发明的何首乌多糖的提取方法，包括如下步骤：(1)将何首乌粉末依次经石油醚、乙醇溶液、水回流提取后，得到上清液；(2)将上清液经浓缩、醇沉、纯化、干燥后，得到何首乌粗多糖；(3)依次以水和氯化钠溶液为洗脱液，将所述何首乌粗多糖溶液用Q‑SepharoseFastFlow柱洗脱，经除杂、干燥，得到不同分子量的何首乌多糖RPMP‑N和何首乌多糖RPMP‑A。本发明提取到的何首乌多糖RPMP‑N和RPMP‑A，能够恢复相关抗氧化酶活性，保护脏器组织，改善脏器的衰老损伤，延缓机体衰老。

技术研发人员：马双成,王莹,金红宇,范晶,杨建波,程显隆,汪祺,于健东,魏锋
受保护的技术使用者：中国食品药品检定研究院
技术研发日：
技术公布日：2024/1/15