一种改善帕金森病的长双歧杆菌婴儿亚种及其应用的制作方法

本发明属于微生物培养，涉及一种改善帕金森病的长双歧杆菌婴儿亚种及其应用，尤其涉及一种长双歧杆菌婴儿亚种 bifidobacterium longum subsp. infantis bi03菌株，包含其的益生菌剂，及其在制备具有预防、改善或治疗帕金森病功效的药物或保健品中的应用。

背景技术：

1、帕金森病是一种慢性进行性神经系统疾病，该疾病的主要特征包括手颤、肌肉僵硬、运动迟缓等，这些症状都与大脑中多巴胺水平的降低有关。尽管目前已经开发出了多种药物来缓解帕金森病症状，但许多患者仍然不满足于现有的治疗方法，并且长期使用某些药物会导致副作用和耐药性问题。因此，寻找新的治疗方案以及预防帕金森病的发生和进展变得非常重要。近年来，益生菌作为一种潜在的治疗选择在帕金森病领域引起了广泛的关注。

2、一些研究表明，益生菌可能具有抗氧化和神经保护作用，这些作用可以通过影响大脑-肠道轴来减轻帕金森病相关的症状。肠道微生物群落是影响大脑-肠道轴的关键因素之一，益生菌可以通过影响肠道内的代谢产物、神经递质和短链脂肪酸等物质来调节肠-脑轴通信，从而减轻帕金森病相关的症状。通过摄入益生菌，可以调节肠道微生物群落的组成和平衡，从而减少慢性低级炎症和氧化应激等因素对神经系统的损害。慢性炎症是许多神经退行性疾病的共同特征，也与帕金森病的发展和进展密切相关。益生菌中的某些菌株可以通过抑制炎症反应和调节免疫系统来减轻炎症反应。另外，氧化应激是引起许多神经退行性疾病的原因之一，某些益生菌可以通过提高抗氧化酶活性和清除自由基等途径来保护神经系统。

3、益生菌干预帕金森病的研究可能会为帕金森病相关运动缺陷、神经损伤、肠道菌群失调等的改善提供新的启发，益生菌可以作为潜在的治疗或附加治疗替代方案。

技术实现思路

1、针对现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种改善帕金森病的长双歧杆菌婴儿亚种及其应用，尤其提供一种长双歧杆菌婴儿亚种 bifidobacterium longum subsp.  infantis bi03菌株，包含其的益生菌剂，及其在制备具有预防、改善或治疗帕金森病功效的药物或保健品中的应用。

2、为达到此发明目的，本发明采用以下技术方案：

3、第一方面，本发明提供一种改善帕金森病的长双歧杆菌婴儿亚种，所述改善帕金森病的长双歧杆菌婴儿亚种命名为长双歧杆菌婴儿亚种 bifidobacterium longum subsp.  infantis bi03菌株，保藏编号为cgmcc no.24473，保藏日期为2022年03月07日。

4、本发明从云南大理白族自治州的母乳喂养健康婴儿粪便样本中分离获得并保藏了一株新的能够改善帕金森病的长双歧杆菌婴儿亚种，将其命名为长双歧杆菌婴儿亚种 bifidobacterium longum subsp. infantis bi03菌株，该菌株能够显著改善帕金森病的症状，具体表现在：（1）显著改善帕金森病相关的运动障碍和皮质酮升高；（2）减弱帕金森病相关的神经炎症；（3）显著促进谷胱甘肽并减弱脑氧化应激损伤。这一发现为开发预防或治疗帕金森病的新药物提供了新思路。且长双歧杆菌婴儿亚种是一种益生菌，将其用于制备预防或治疗帕金森病的产品中时，安全性高，不易产生抗性。

5、本发明所涉及的长双歧杆菌婴儿亚种bi03菌株的筛选步骤如下：

6、（1）选取云南大理白族自治州的母乳喂养健康婴儿粪便样本，使用质量浓度为0.9%的生理盐水进行10倍梯度稀释，稀释3次，涂布在mrs固体培养基（药品购于海博生物）上，在37℃培养48 h后，挑取出不同形态的菌落后在mrs固体培养基表面划线纯化，挑取单菌落在37℃下使用mrs液体培养基扩大培养，再使用质量浓度为30%的甘油进行保藏。

7、（2）针对保藏的多株单菌进行体外生理特性测试，筛选出一株胃肠液耐受能力（人工模拟）、ht-29细胞粘附能力、抑菌能力、功能性低聚糖利用能力最好的单菌株，对其进行鉴定并保藏。

8、第二方面，本发明提供一种预防、改善或治疗帕金森病的菌剂，所述菌剂中的菌株包括第一方面所述的长双歧杆菌婴儿亚种 bifidobacterium longum subsp. infantis bi03菌株。

9、本发明所涉及的长双歧杆菌婴儿亚种 bifidobacterium longum subsp.  infantis bi03菌株可以被单独地应用于相关产品中，也可以与其他菌株联合应用于相关产品中。

10、优选地，在所述菌剂中，长双歧杆菌婴儿亚种 bifidobacterium longum subsp.  infantis bi03菌株的活菌数不低于1×109 cfu/ml或1×109 cfu/g，例如1×109 cfu/g（cfu/ml）、5×109 cfu/g（cfu/ml）、1×1010 cfu/g（cfu/ml）、3×1010 cfu/g（cfu/ml）、5×1010 cfu/g（cfu/ml）、1×1011 cfu/g（cfu/ml）、5×1011 cfu/g（cfu/ml）、1×1012 cfu/g（cfu/ml）、1×1013 cfu/g（cfu/ml）等。

11、优选地，所述菌剂中的菌株还包括长双歧杆菌 bifidobacterium longum bl21菌株，保藏编号为cgmcc no.10452，保藏日期为2015年01月27日。

12、本发明还创造性地发现上述bi03菌株能够与长双歧杆菌bl21菌株进行复配使用用于预防、缓解或治疗帕金森病，具有比单一菌剂或者其他复配方式显著优异的效果，说明bi03菌株与bl21菌株在上述功效上具有协同增效作用。

13、优选地，所述长双歧杆菌婴儿亚种 bifidobacterium longum subsp. infantis bi03菌株与长双歧杆菌 bifidobacterium longum bl21菌株的活菌数比为(2-4):1，例如2:1、5:2、3:1、7:2、4:1等。

14、基于bi03菌株与bl21菌株在上述功效上的潜在相互作用，两种菌株在满足上述特定的质量比例关系时具有更优的协同增效效果。

15、优选地，所述菌剂的剂型包括冻干粉剂、胶囊剂、片剂或颗粒剂。

16、优选地，所述菌剂还包括保护剂和/或辅助添加剂。

17、优选地，所述保护剂选自脱脂乳、明胶、麦芽糊精、阿拉伯胶、右旋糖酐、藻胶钠、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖、乳糖、海藻糖、山梨醇或木糖醇中的任意一种或至少两种的组合。

18、优选地，所述辅助添加剂选自抗性糊精、低聚果糖、低聚半乳糖、低聚木糖、低聚异麦芽糖、大豆低聚糖、菊粉、螺旋藻、节旋藻、云芝多糖、水苏糖、聚葡萄糖、α-乳淸蛋白或乳铁蛋白中的任意一种或至少两种的组合。

19、第三方面，本发明提供根据第一方面所述的长双歧杆菌婴儿亚种 bifidobacterium longum subsp. infantis bi03菌株或第二方面所述的菌剂在制备具有预防、改善或治疗帕金森病功效的药物或保健品中的应用。

20、第四方面，本发明提供根据第一方面所述的长双歧杆菌婴儿亚种 bifidobacterium longum subsp. infantis bi03菌株或第二方面所述的菌剂在制备预防、改善或治疗帕金森病相关的运动缺陷的药物中的应用。

21、第五方面，本发明提供根据第一方面所述的长双歧杆菌婴儿亚种 bifidobacterium longum subsp. infantis bi03菌株或第二方面所述的菌剂在制备预防、改善或治疗帕金森病相关的神经炎症损伤的药物中的应用。

22、相对于现有技术，本发明具有以下有益效果：

23、本发明从云南大理白族自治州的母乳喂养健康婴儿粪便样本中分离获得并保藏了一株新的能够改善帕金森病的长双歧杆菌婴儿亚种，将其命名为长双歧杆菌婴儿亚种 bifidobacterium longum subsp. infantis bi03菌株，该菌株能够显著改善帕金森病的症状，具体表现在：（1）显著改善帕金森病相关的运动障碍和皮质酮升高；（2）减弱帕金森病相关的神经炎症；（3）显著促进谷胱甘肽并减弱脑氧化应激损伤。这一发现为开发预防或治疗帕金森病的新药物提供了新思路。且长双歧杆菌婴儿亚种是一种益生菌，将其用于制备预防或治疗帕金森病的产品中时，安全性高，不易产生抗性。