1.一种番茄褐色皱纹果病毒侵染可视化追踪系统的构建方法,其特征在于:将番茄褐色皱纹果病毒tobrfv或同源序列的cp启动子、外源gfp、tobrfv 3’非编码区以及mp c端的部分序列插入到pcb301-tobrfv mp的3’端。
2.根据权利要求1所述的番茄褐色皱纹果病毒侵染可视化追踪系统的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:
3.根据权利要求2所述的番茄褐色皱纹果病毒侵染可视化追踪系统的构建方法,其特征在于:所述mp-cp-pro-f-2和mp-cp-pro-r-2引物序列如seq id no:11-12所示,
4.根据权利要求2所述的番茄褐色皱纹果病毒侵染可视化追踪系统的构建方法,其特征在于:所述gfp(nsbi)-f-2和gfp(ehei)-r-2引物序列如seq id no:13-14所示,
5.根据权利要求2所述的番茄褐色皱纹果病毒侵染可视化追踪系统的构建方法,其特征在于:所述utr-f-2和utr-r-2引物序列如seq id no:15-16所示,
6.根据权利要求2所述的番茄褐色皱纹果病毒侵染可视化追踪系统的构建方法,其特征在于:所述cp-f-2和cp-r-2引物序列如seq id no:17-18所示,
7.根据权利要求6所述的番茄褐色皱纹果病毒侵染可视化追踪系统的构建方法,其特征在于:所述pcb-f-2和pcb-r-2引物序列如seq id no:19-20所示,
8.一种携带gfp的番茄褐色皱纹果病毒侵染可视化追踪系统的pcb-tobrfv-gfp-2重组载体,其特征在于:序列如seq id no:29所示。
9.权利要求1-7任一所述构建方法得到的番茄褐色皱纹果病毒侵染可视化追踪系统或权利要求8所述的pcb-tobrfv-gfp-2重组载体在分析tobrfv病毒蛋白功能、筛选与tobrfv侵染相关的寄主因子,或评估寄主因子、药物或制剂对抗病毒效果中的应用。
10.权利要求8所述的携带gfp的番茄褐色皱纹果病毒侵染可视化追踪系统的pcb-tobrfv-gfp-2重组载体在表达外源蛋白中的应用。