一种番茄褐色皱纹果病毒侵染可视化追踪系统的构建方法及重组载体和应用

文档序号:36256225发布日期:2023-12-03 18:12阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种番茄褐色皱纹果病毒侵染可视化追踪系统的构建方法,其特征在于:将番茄褐色皱纹果病毒tobrfv或同源序列的cp启动子、外源gfp、tobrfv 3’非编码区以及mp c端的部分序列插入到pcb301-tobrfv mp的3’端。

2.根据权利要求1所述的番茄褐色皱纹果病毒侵染可视化追踪系统的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:

3.根据权利要求2所述的番茄褐色皱纹果病毒侵染可视化追踪系统的构建方法,其特征在于:所述mp-cp-pro-f-2和mp-cp-pro-r-2引物序列如seq id no:11-12所示,

4.根据权利要求2所述的番茄褐色皱纹果病毒侵染可视化追踪系统的构建方法,其特征在于:所述gfp(nsbi)-f-2和gfp(ehei)-r-2引物序列如seq id no:13-14所示,

5.根据权利要求2所述的番茄褐色皱纹果病毒侵染可视化追踪系统的构建方法,其特征在于:所述utr-f-2和utr-r-2引物序列如seq id no:15-16所示,

6.根据权利要求2所述的番茄褐色皱纹果病毒侵染可视化追踪系统的构建方法,其特征在于:所述cp-f-2和cp-r-2引物序列如seq id no:17-18所示,

7.根据权利要求6所述的番茄褐色皱纹果病毒侵染可视化追踪系统的构建方法,其特征在于:所述pcb-f-2和pcb-r-2引物序列如seq id no:19-20所示,

8.一种携带gfp的番茄褐色皱纹果病毒侵染可视化追踪系统的pcb-tobrfv-gfp-2重组载体,其特征在于:序列如seq id no:29所示。

9.权利要求1-7任一所述构建方法得到的番茄褐色皱纹果病毒侵染可视化追踪系统或权利要求8所述的pcb-tobrfv-gfp-2重组载体在分析tobrfv病毒蛋白功能、筛选与tobrfv侵染相关的寄主因子,或评估寄主因子、药物或制剂对抗病毒效果中的应用。

10.权利要求8所述的携带gfp的番茄褐色皱纹果病毒侵染可视化追踪系统的pcb-tobrfv-gfp-2重组载体在表达外源蛋白中的应用。


技术总结
本发明公开了一种番茄褐色皱纹果病毒侵染可视化追踪系统的构建方法及重组载体和应用,该系统构建方法通过在ToBRFV编码的MP的3’端插入ToBRFV或同源序列的CP启动子、外源绿色荧光蛋白、ToBRFV 3’非编码区以及MP C端的部分序列,使其表达出GFP蛋白。本发明构建出的可视化追踪系统及重组载体具有以下特征和优势:(1)具有侵染性,插入的GFP不会影响ToBRFV的侵染性;(2)能够表达出绿色荧光蛋白,可用于追踪ToBRFV的侵染状态和侵染部位;(3)本发明载体能够用于快速筛选评估不同基因对ToBRFV的抗性。

技术研发人员:杨秀玲,周雪平,马子玥,方铸,石钰杰
受保护的技术使用者:中国农业科学院植物保护研究所
技术研发日:
技术公布日:2024/1/16
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