一种大肠杆菌K-12MG1655BLBYZT6及其应用的制作方法

文档序号:36171800发布日期:2023-11-24 10:15阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种大肠杆菌k-12 mg1655 blbyzt6,其特征在于,该大肠杆菌(escherichia coli)k-12 mg1655 blbyzt6保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为cgmcc no.28317,保藏日期为2023年08月31日,保藏机构地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号。

2.如权利要求1所述的大肠杆菌k-12 mg1655 blbyzt6,其特征在于,大肠杆菌k-12mg1655 blbyzt6的培养方法为,将菌株接种于种子液培养基上,在温度为36~38℃、搅拌速率为150~250r/min条件下发酵培养5~10h;种子液培养基按如下浓度的成分配制:复配蛋白胨 8~14g/l、酵母粉 4~12g/l、氯化钠 8~12g/l;复配蛋白胨包括重量比为2~3:1的胰蛋白胨和牛骨蛋白胨。

3.一种权利要求1所述大肠杆菌k-12 mg1655 blbyzt6的应用,其特征在于,在发酵生产2’-岩藻糖基乳糖及二岩藻糖基乳糖中的应用。

4.如权利要求3所述的应用,其特征在于,发酵生产2’-岩藻糖基乳糖及二岩藻糖基乳糖的方法包括如下步骤:

5.如权利要求4所述的应用,其特征在于,步骤(2)中,发酵培养基按如下浓度的成分配制:葡萄糖 5~40g/l、乳糖 5~40g/l、复配蛋白胨 10~15g/l、酵母粉 20~30g/l、磷酸氢二钾 10~20g/l、磷酸二氢钾 1~5g/l、微量金属元素 5~15ml/l;微量金属元素包括如下浓度的成分,硫酸亚铁 6g/l、一水硫酸锰 0.35g/l、七水硫酸锌 2.2g/l、无水硫酸铜 1.0g/l、钼酸铵 0.11g/l。

6.如权利要求4所述的应用,其特征在于,步骤(2)中,发酵的工艺条件为,首先调发酵温度为36~38℃,发酵压力为0.03~0.04mpa,发酵ph为6.8~7.0,发酵时间为8~10h;然后调发酵温度至28~32℃,发酵压力为0.05~0.08mpa,发酵ph为7.2~7.6,发酵过程中补加蛋白胨、乳糖和葡萄糖;整个发酵时间为100~130h,搅拌速率为150~300r/min。

7.如权利要求4所述的应用,其特征在于,步骤(3)中,浓缩的温度≤70℃,发酵液浓缩至固形物含量>83%。

8.如权利要求4所述的应用,其特征在于,步骤(3)中,乙酸结晶的温度为恒温50℃,乙酸的添加量为料液质量的0.5~3倍,结晶的时间为30~50h。

9.如权利要求4所述的应用,其特征在于,步骤(3)中,离心后固体物经过溶解、脱色、离子交换、浓缩、干燥得2’-岩藻糖基乳糖粉末,离子交换采用阳、阴离子树脂混合的满床式离子交换,阳离子树脂和阴离子树脂为体积比为100:110的d001树脂和d301-f树脂。

10.如权利要求4所述的应用,其特征在于,步骤(3)中,脱色采用活性炭脱色,活性炭用量为料液干物质含量的3%~5%,脱色温度为50~60℃,脱色时间为50~70min,料液透光>85%;离子交换进料温度为30~40℃,走料速度为2~3bv/h,出料电导<50us/cm,出料ph值为3~6;浓缩温度为60~67℃,浓缩至固形物含量为50%;色谱分离条件为,色谱进料质量浓度为50%,温度为60~63℃,水料比为1:(3~3.5)。


技术总结
本发明涉及母乳低聚糖生产技术领域,具体涉及一种大肠杆菌(Escherichia coli)K‑12 MG1655 BLBYZT6及其应用,大肠杆菌K‑12 MG1655 BLBYZT6保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCC No.28317,保藏日期为2023年08月31日,保藏机构地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号。本发明大肠杆菌K‑12 MG1655 BLBYZT6应用于发酵生产2’‑岩藻糖基乳糖及二岩藻糖基乳糖中。本发明提高了2’‑岩藻糖基乳糖产率,降低非目标产物干物质占比,分离纯化简单,利于工业化生产,同时可联产纯度>90%二岩藻糖基乳糖。

技术研发人员:李克文,李培功,栾庆民,孔刘娟,熊小兰,薛雅莺,张莉,袁世英,李珍珍,孙桂莲,段元良,李云飞
受保护的技术使用者:保龄宝生物股份有限公司
技术研发日:
技术公布日:2024/1/16
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