一种逆转低分子肝素抗凝活性的三嗪化合物及其制备方法和应用

本发明属于医药领域，涉及一种逆转低分子肝素抗凝活性的三嗪化合物及其制备方法和应用，具体涉及一种能逆转低分子肝素抗凝活性的精胺取代三嗪化合物及其制备方法和应用，以及含有精胺取代三嗪骨架化合物的药物组合物。

背景技术：

1、肝素是一种线性糖胺聚糖，是生物系统中已知电荷密度最大的天然聚阴离子。临床上，肝素是一种重要的抗凝剂，主要通过激活抗凝血酶依赖途径抑制凝血，产生抗凝效果。在医学领域，肝素被广泛应用于防止血栓形成、心血管手术、血液透析等方面，全身肝素化是心外科手术和心脏手术及血液透析过程中常见的抗凝血程序，但全身肝素化存在一些不良反应，如出血和过敏等。

2、低分子肝素(low molecular weight heparin,lmwh)是肝素的一种衍生物，分子量在3500～8000da，与普通肝素相比，低分子肝素带负电荷量少，拥有更少的副作用。低分子肝素在预防血栓并发症方面更具优势，并且可能具有更低的出血风险。低分子肝素已被广泛用于肺栓塞、深静脉血栓和心脏手术等情况下的抗凝治疗。低分子肝素可降低住院患者静脉血栓栓塞的发生率，不增加严重出血的风险。手术结束时，为了减少患者可能的低血压、心率减缓及出血风险，需要及时监测肝素效价并使用肝素逆转剂。

3、硫酸鱼精蛋白(protamine sulfate,ps)是中国唯一批准的肝素逆转剂。硫酸鱼精蛋白可以迅速逆转肝素的作用，但使用硫酸鱼精蛋白可能会产生不良反应，包括过敏反应、呼吸问题和严重的心血管反应，如低血压和心动过缓，严重时会引发冠状动脉血栓和心肌梗死。据报道，硫酸鱼精蛋白只可部分逆转低分子肝素的抗凝效果，并且fda未批准硫酸鱼精蛋白用于逆转低分子肝素。此外，鱼精蛋白的代谢物丙胺属于高毒物。环境污染、季节短缺等因素进一步限制了鱼精蛋白的获取与应用。因此，需要开发药效明确、安全的肝素逆转剂。

4、为了逆转肝素的抗凝作用，目前研究出了andexanet alfa和小分子药物delparantag与ciraparantag等肝素逆转剂。andexanet alfa可能会引发促凝作用和血栓栓塞事件，并且治疗费用高，难以在临床实践中推广。delparantag是一类小分子水杨酸衍生物，作为肝素逆转剂在体内及体外都有良好的中和作用，但临床ⅱ期存在低血压案例终止了项目。ciraparantag是一种小分子阳离子，通过氢键和电荷相互作用结合肝素结合，目前处于临床ⅱ期。

5、目前，仍需要开发具有肝素抗凝逆转活性或更好药效学性能的化合物。

技术实现思路

1、本发明的目的是提供一类新型的具有逆转肝素抗凝活性和更好药效学性能的三嗪化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体和溶剂合物。

2、本发明的目的是通过以下技术方案实现的：

3、结构如式i所示的三嗪化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体和溶剂合物：

4、

5、其中：

6、r1、r2、r3、r4彼此相同或不同，可以各自独立地选自氢、通过或不通过任意数量的烷基链与n原子连接的任选取代的烷基、烷氨基、烷氧基、单环或多环芳香环基、单环或多环脂肪环基、多环芳香环并脂肪环基；也可以通过r1与r2、r3与r4直接连接与相连氮原子组成任选取代的芳香环或者脂肪环或芳香环并脂肪环；

7、r5、r6、r7、r8、r9彼此相同或不同，可以各自独立地选自氢、通过或不通过任意数量的烷基链与n原子连接的任选取代的烷基、烷氨基、烷氧基、单环或多环芳香环基、单环或多环脂肪环基、多环芳香环并脂肪环基；

8、所述的任选取代中，取代是指被下列一个或多个取代基所取代，取代基选自：卤素、c1-6烷基、羟基、环烷基、杂原子被取代或不被取代的杂环烷基、烷氧基、羰基、芳基等。

9、进一步的，r1、r2、r3、r4彼此相同或不同，可以各自独立地选自氢、通过或不通过c1-3的烷基链与n原子连接的任选取代的烷氨基、烷氧基、单环或多环芳香环基、单脂肪环基、芳香环并脂肪环基；也可以通过r1与r2、r3与r4直接连接与相连氮原子组成任选取代的哌嗪基、吗啉基、哌啶基、咪唑并哌啶等；

10、r5、r6、r7、r8、r9彼此相同或不同，可以各自独立地选自氢、c1-6烷基、c1-6烷氨基、c1-6烷氧基；

11、所述的任选取代中，取代是指被下列一个或多个取代基所取代，取代基选自：卤素、c1-6烷基、羟基、环烷基、杂原子被取代或不被取代的杂环烷基、烷氧基、羰基、芳基等。

12、更进一步的，所形成的r1-n-r2基团和r3-n-r4基团彼此相同或不同，分别独立地选自以下基团：

13、

14、m为1～3的整数，n为1～3的整数；

15、r5、r6、r7、r8、r9分别独立地选自氢。

16、作为本发明最优选的技术方案，结构如式i所示的三嗪化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、溶剂合物：

17、

18、其中：

19、r1-n-r2选自以下基团：

20、r3-n-r4选自以下基团：m为1～3的整数，n为1～3的整数；

21、r5、r6、r7、r8、r9分别独立地选自氢。

22、更具体的，本发明所述的三嗪化合物选自如下结构所示的化合物：

23、表1.本发明小分子三嗪化合物

24、

25、

26、

27、所述的药学上可接受的盐为结构如式i所示的化合物与下列酸形成的酸加成盐：盐酸、氢溴酸、硫酸、磷酸、甲磺酸、对甲苯磺酸、萘磺酸、柠檬酸、酒石酸、乳酸、丙酮酸、乙酸、马来酸、苯磺酸、琥珀酸、富马酸、水杨酸、苯基乙酸或杏仁酸。此外还包括无机碱的酸式盐，如：含有碱性金属阳离子、碱土金属阳离子、铵阳离子盐。

28、所述的溶剂合物为结构如式i所示的三嗪化合物的水合物。

29、本发明的另一个目的是提供一种所述的三嗪化合物的合成方法，合成路线如下：

30、

31、其中，an为bm为cy为r1、r2、r3、r4、r5、r6、r7、r8、r9如前所述；

32、包括以下步骤：

33、步骤(1)、以四氢呋喃为反应溶剂，以n,n-二异丙基乙胺为缚酸剂，三聚氯氰和an在温度-20℃下进行反应，得到中间体ⅲ；其中，三聚氯氰和an的摩尔比是1:1；三聚氯氰和n,n-二异丙基乙胺的摩尔比是1:1～1:1.2；

34、步骤(2)、以二氯甲烷为反应溶剂，以n,n-二异丙基乙胺为缚酸剂，中间体ⅲ和bm在温度-20℃下投料，再在温度0℃下进行反应，得到中间体ⅱ；中间体ⅲ和bm的摩尔比是1:1；中间体ⅲ和n,n-二异丙基乙胺的摩尔比是1:1～1:3.2；

35、步骤(3)、以二甲基亚砜为反应溶剂，以三乙胺为缚酸剂，中间体ⅱ和cy在回流条件下反应，得到结构如式ⅰ所示的三嗪化合物；中间体ⅱ和cy的摩尔比是1:1～1:3；中间体ⅱ和三乙胺的摩尔比是1:1～1:5。

36、步骤(1)中，反应结束后，往反应液中加水淬灭反应，二氯甲烷萃取，合并二氯甲烷层，二氯甲烷层依次经饱和氯化钠溶液洗涤、无水硫酸钠干燥，减压浓缩，再经硅胶柱层析分离纯化，得到中间体ⅲ。

37、步骤(2)中，反应结束后，采用硅胶柱层析分离纯化，得到中间体ⅱ。

38、步骤(2)中，反应结束后，往反应液中加入盐酸-乙酸乙酯调节ph≤1，丙酮洗涤，抽滤，滤饼使用甲醇重悬，加入碳酸氢钠调节ph≥8，减压浓缩，制备薄层层析分离纯化，减压浓缩，冻干，得到结构如式ⅰ所示的三嗪化合物。

39、本发明的另一个目的是提供一种药物组合物，以所述的三嗪化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、溶剂合物为有效成分或主要有效成分，与药学上可接受的载体制成制剂。

40、低分子肝素与本发明小分子三嗪化合物体外结合药效实验及毒性实验显示，本发明所述的三嗪化合物可以对低分子肝素产生良好的结合作用，并逆转肝素的抗凝作用，是安全低毒的小分子化合物，可用于制备逆转肝素抗凝活性的药物，治疗和/或预防肝素抗凝过度导致的不良反应和疾病，具有良好的临床应用前景。

41、本发明的另一个目的是提供所述的三嗪化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、溶剂合物或所述的药物组合物在制备抗凝血剂逆转剂中的用途。

42、本发明的另一个目的是提供所述的三嗪化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、溶剂合物或所述的药物组合物在制备治疗因使用肝素治疗疾病出现过度抗凝副作用的药物、制备用于治疗外科手术中需要逆转肝素抗凝活性药物的用途。

43、使用肝素治疗的疾病为血栓栓塞性的疾病；所述的栓塞性疾病为心肌梗死、血栓性静脉炎、肺栓塞；所述的外科手术为血液透析、体外循环、导管术、微血管手术。